проект для Сани Шишпаренок

1. Схема клонирования hTERT в лентивирусный вектор

Потенциальная кассета для вставки
сайты NotI и NheI
Потенциальная кассета для вставки
сайты BamHI и EcoRI
pMD2.G
pMDLg_pRRE
pRSV-Rev

2. Схема клонирования hTERT в лентивирусный вектор. Вариант 1

кассета 1
кассета 2
синтетический промотор

3. Схема клонирования hTERT в лентивирусный вектор. Модульность

Промежуточные векторы пригодны для работы с иными экспрессионными вставками

4. Схема клонирования hTERT в лентивирусный вектор. Праймеры

22 праймера для одного пути клонирования

5. Схема клонирования hTERT в лентивирусный вектор. Вариант 2

кассета 1
вариации
кассета 2
Сравнение эффективности работы промоторов

6. Альтернативная схема клонирования hTERT по IIs типу

Сборка кассет из блоков за один подход методом ПЦР и одной эндонуклеазой

7. Нокаут гена INK4a/ARF

Готовая система. Необходимо подобрать sgRNA

8. Нокаут гена INK4a/ARF + вставка hTERT

knockout и knock-in

9. Нокаут гена INK4a/ARF + вставка hTERT. HDR

donor dsDNA
Иммортализация за одну трансфекцию