Исследование динамики развития нейрональных предшественников в ксенотрансплантате, полученных из ИПСК человека

1.

Исследование динамики развития
нейрональных предшественников
в ксенотрансплантате, полученных
из ИПСК человека
Автор: Блинова Арина
Научный руководитель: Дмитрий Николаевич Воронков

2.

Предыдущие исследования
• Preparing for first human trial of induced pluripotent stem cellderived cells for Parkinson's disease
• Reversing a model of Parkinson’s disease with in situ converted nigral
neurons

3.

Астроциты
• Питание нейронов
• Удаление метаболитов
• Иммунокомпетентные клетки (астроглиоз и toll-like рецепторы)
• Рубцы
• Модулирование сигнала (факторы роста синапсов и глиальные
помпы)
• Гематоэнцефалический барьер

4.

Методика
Получение и дифференцировка ИПСК

5.

Методика
6-OHDA

6.

Методика
Культура клеток

7.

Методика
Иммуногистохимия
• Фиксация
• Криотомия
• Криостат
• Пароварка
• Буферный раствор
• Покрывание антителами
• Пероксидазный метод
• Флуоресцентный метод

8.

Методика
Антитела

9.

Результаты
Развитие нейронов
Интеграция
• SF ↑
• DARPP 32 ↑
• H1F1a ↔
Развитие
• VIM, DCX ↓
• HNA ↓
• NSE ↑, ChgA ↓

10.

Результаты
Локализация нейронов
1 – плотно расположенные нейроны
2 – область глиального вала
3 – периферическая зона, нейронов
человека не выявлено

11.

Результаты
Развитие астроцитов
Развитие
C3 ↗↘
IBA1 ↓
• GFAP, ALDH1L1, AQP4 ↑
• VIM

12.

Результаты
Локализация астроцитов
один фронт движется по
мозолистому телу и радиально в
нижние слои коры, а второй
распространяется от области
трансплантации в стриатум

13.

Выводы
1) Нейрональные предшественники дали смешанную популяцию
зрелых и интегрированных нейронов и астроцитов
2) Микроокружение влияет на глию (она мигрирует)
3) Отсутствует пролиферация
4) Наличие глии положительно влияет на выживаемость
трансплантата