Цветные реакции белков

1. Цветные реакции белков

Качественные реакции на
остатки аминокислот

2. Указатель реакций

a)
b)
a)
b)
Биуретовая
Уравнение реакции
Проведение опыта
Нингидриновая
Ксантопротеиновая
Уравнение реакции
Проведение опыта
Миллона
Гопкинса-Коле
Диазореакция Паули

3. Функция качественных реакций

Для аминокислот, постоянно встречающихся в
составе белков, разработано множество цветных
(в том числе именных) реакций. Многие из них
высокоспецифичны, что позволяет определять
ничтожные количества той или иной
аминокислоты.
Надо помнить, что все качественные реакции –
это реакции не собственно на белки, а на
определенные аминокислоты, входящие в их
состав.

4. Аминокислоты

Наиболее
распространенные
аминокислоты см. таблицу
Основной структурной
единицей белков служат
a-аминокислоты. В состав
большинства природных
белков входит около 20 aаминокислот.
Качественные реакции
служат как для
определения
принадлежности вещества
к классу белков, так и для
идентификации входящих
в его состав аминокислот

5. Аминокислоты

Биуретовая реакция
Определяет наличие пептидной связи в
растворе исследуемого соединения.
пептидная связь

6. Биуретовая реакция

Реакция обусловлена образованием биуретового
комплекса в результате соединения меди с пептидной
группировкой белка.
В пептидах и белках пептидная связь обычно
находится в амидной форме (или кетоформе), но в
щелочной среде она переходит в иминольную
(енольную):

7. Биуретовая реакция

Биуретовая реакция протекает так:
+CuSO
+NaOH
4
Вернуться

8. Биуретовая реакция

Вернуться

9. Биуретовая реакция

Нингидриновая реакция
Качественная реакция на -аминокислоты
Аминокислота с нингидрином образует продукт
конденсации типа азометина

10. Нингидриновая реакция

путем перегруппировки
•и гидролиза
образуется 2-аминоиндандион

11. Нингидриновая реакция

2-аминоиндандион реагирует с нингидрином и
дает краситель.
Вернуться

12. Нингидриновая реакция

Ксантопротеиновая реакция
Определяет присутствие в белке ароматических
и гетероциклических - аминокислот :
триптофана,
фенилаланина,
тирозина,
гистидина.

13. Ксантопротеиновая реакция

+HNO3
Вернуться

14. Ксантопротеиновая реакция

При действии
концентрированной
НNО3 на раствор
белка образуется
нитросоединение,
окрашенное в
желтый цвет.
Вернуться

15. Ксантопротеиновая реакция

Реакция Миллона
Это реакция на
аминокислоту
тирозин

16. Реакция Миллона

Реактив Миллона (раствор HgNO3 и Hg(NO2)2
в разбавленной HNO3, содержащей примесь
3
HNO2) взаимодействует с тирозином
с
образованием ртутной соли
2 2окрашенной в
нитропроизводного тирозина,
розовато-красный цвет:
+HgNO
+Hg(NO )
+HNO3
+HNO2
Вернуться

17. Реакция Миллона

Реакция Гопкинса–Коле
Эта реакция
определяет
аминокислоту
триптофан.

18. Рекомендации к проведению опыта

Реакция Гопкинса–Коле
Из глиоксиловой кислоты под действием
концентрированной серной кислоты
сначала получается формальдегид:
СО2

19. Реакция Гопкинса–Коле

формальдегид затем конденсируется с триптофаном:
конденсации окисляется до бис-2-триптофанилкарбинола,
который в присутствии минеральных кислот образует соли,
окрашенные в сине-фиолетовый цвет:
Продукт
Вернуться

20. Реакция Гопкинса–Коле

Реакция Паули
(Диазореакция Паули)
Эта реакция
аминокислоту
гистидин.

21. Реакция Гопкинса–Коле

Реакция Паули
(Диазореакция Паули)
при взаимодействии кислого раствора
сульфаниловой кислоты с нитритом
натрия образуется
диазобензолсульфоновая кислота:

22. Рекомендации к проведению опыта

Реакция Паули
(Диазореакция Паули)
Диазобензолсульфоновая кислота,
взаимодействуя с гистидином, дает
соединение вишнево-красного цвета:
Вернуться