Характеристика возбудителей туберкулеза. Лекция №3

1.

Характеристика
возбудителей
туберкулеза.
Методы диагностики
туберкулеза животных

2.

1. Краткие сведения о болезни.
2. Историческая справка о болезни и возбудителях
туберкулеза.
3. Классификация микобактерий.
4. Характеристика возбудителя.
4.1. Морфологические особенности микобактерий.
4.2. Культуральные свойства.
4.3. Антигенная структура и факторы
патогенности.
5. Устойчивость микобактерий во внешней среде.
6. Методы лабораторной диагностики туберкулеза.
7. Иммунитет при туберкулезе.
8. Профилактика и меры борьбы.
Заключение
2

3.

1. Туберкулез с.-х. животных /Под ред.
Шишкова В.П., Урбана В.П.- М.: Агропромиздат,
1991.- 255 с.
2. Конопаткин А.А. и др. Эпизоотология и
инфекционные болезни с.-х. животных.- М.:
Колос, 1984.- 545 с.
3. Лабинская А.С. Микробиология с техникой
микробиологических исследований. – М.:
Медицина.- 1972. – С. 177.
4. Шишков В.П. и др. Туберкулез животных,
методы диагностики и профилактики.- М.: ВНИИ
информации, 1986.- 43.
3

4.

(tuberculosis)–
хронически протекающая инфекционная болезнь человека, разных видов
животных и птиц, вызываемая
патогенными микобактериями,
характеризующаяся образованием в
различных органах и тканях
специфических узелков – туберкулов,
склонных к творожистому распаду.
ТУБЕРКУЛЕЗ
(tu b e rc u lu m - б уго р о к)
4

5.

По статистике, микобактерией туберкулеза инфицирована
треть населения земного шара (около 2 млрд. человек)

6.

7.

Пути заражения:
1.Алиментарный.
2.Аэрогенный
(ингаляционный).
3.Внутриутробный.
4.Трансовариальный.
Течение болезни:
Хроническое – до 45 дней.
Формы болезни:
1. Легочная.
2. Кишечная.
3. Генитальная.
4. Генерализованная.
5. Жемчужница.
6. Открытый (активный).
7. Закрытый (латентный).
5

8.

Туберкулез у слона. Истощение, изменение пигментации кожи

9. Попугай, больной туберкулезом

10.

Туберкулез аквариумных рыб
6

11.

• Туберкулы на серозных
оболочках органов
брюшной полости
рыбы.

12.

13.

Легочная форма туберкулеза у
человека
7

14.

15.

16. Туберкулез легких

17.

18. Туберкула с творожистым распадом

19.

Кавернозный туберкулез левой почки

20.

Почки

21.

Туберкулез костей

22.

Творожистый распад семенника при туберкулезе

23.

Поражение печени при туберкулезе

24.

25.

Жемчужница

26.

Исторические сведения
IV век д.н.э. – Гиппократ описал клиническую картину
легочной формы болезни.
1819 – француз. врач Леннек дал название болезни.
1843 – Кленк установил заразительность болезни.
1865 – Виллем описал пути заражения туберкулезом.
1882 – Р. Кох открыл возбудителя туберкулеза,
выделил чистую культуру, описал свойства, доказал
инфекционность.
1888 – Х. Гельман предложил аллергический метод
диагностики.
1890 – Кох Р. изготовил туберкулин.
1896 – Леман и Нойман систематизировали
возбудителя туберкулеза.
1924 – Кальметт и Герен изготовили вакцину БЦЖ
(BCG) для профилактики туберкулеза у людей.
Сегодня в мире 35% людей заражены туберкулезом
9

27.

Классификация и
номенклатура микобактерий
Отряд – Firmicutes.
Порядок – Actinomycetales (грамположительные, кислотоустойчивые, аэробные,
палочковидные бактерии).
Семейство – Mycobacteriaceae («mycos» гриб, «bacterium» - палочка).
Род – Mycobacterium (ветвящиеся палочки).
Вид – 30 видов, из них 6 – патогенные
(паразиты), 8 – условно-патогенные
(атипичные), 16 – непатогенные (сапрофиты).
10

28.

К Л А Срода
С И Ф И Mycobacterium
КАЦИЯ
Классификация
р.M y c o b a c te riu m
I
ПО СКОРОСТИ РОСТА
Б ы ст ро
раст ущ ие
II
2гр
М ед ленно
раст ущ ие
П О П А Т О ГЕН Н О С Т И
С А П Р О Ф И ТЫ
П А Р А З И ТЫ
3гр
А ТИ П И Ч Н Ы Е
11

29.

Патогенные
микобактерии:
Условно-патогенные
микобактерии
(атипичные):
M.bovis
M.kansasii
M.tuberculosis
M.marinum
M.scrofulaceum
M.avium
M.intracellularae
M.africanum
M.xenopi
M.paratuberculosis
M.leprae
M.ulcerans
M.fortuitum
M.chelonei
12

30.

Классификация микобактерий по способности
образовывать пигменты
Фотохромогенные
(образуют пигмент
на свету)
Хромогенные
(образуют пигмент)
Скотохромогенные
(образуют пигмент в
темноте)
Нехромогенные
(не образуют пигмента)
15

31.

КЛАССИФИКАЦИЯ
АТИПИЧНЫ Х МИКОБАКТЕРИЙ
4 гр у п п ы
Ф О ТО ХРО М О ГЕННЫ Е
В Ы Д Е Л Я Ю Т о т р е а ги р у ю щ и х н а
т у б е р ку л и н , н о б е з п а т и зм е н е н и й
С ко р о с т ь р о с т а - 1 5 -3 0 /1 0 -2 0
П и гм е н т о б р а зу ю т н а с в е т у
СКО ТО ХРО М О ГЕННЫ Е
ВЫ ДЕЛЯЮ Т от свиней
(tu b л и м ф о д е н и т )
ПОЛИМОРФНЫ Е
П и гм е н т о б р а зу ю т в т е м н о т е
16

32.

33.

13

34.

14

35.

Фотохромогенные
микобактерии на
среде Петраньяни

36.

37. Культура хромогенных микобактерий M. phlei

38. Mycobacterium marium

39.

Фотохромогенные микобактерии

40.

Mycobacterium
kansasii
на среде
ЛевенштайнаЙенсена

41.

Истинные возбудители туберкулеза
Бычьего вида
Птичьего вида
M.bovis
M.avium
Человеческого вида
M.tuberculosis
18

42.

Общие морфологические признаки микобактерий
Тонкие, прямые, слегка изогнутые палочки размером
0,2-0,6 х 1-10 мкм или полиморфные (нитевидные,
ветвящиеся, вакуолизированные формы).
Неподвижные. Аэробы. Спор не образуют, жгутиков не
имеют.
По строению клеточной стенки – грамположительные,
однако плохо окрашиваются по Граму.
В клеточной стенке высокое содержание липидов (до
40%от сухого вещества) поэтому кислото-спиртощелочно устойчивы. Хорошо окрашиваются по методу
Циль-Нильсона в ярко-красный цвет.
Медленно растут на питательных средах (период
генерации 14 - 15 час).
19
Популяцию клеток в колонии окружает микрокапсула.

43.

44.

В цитоплазме видны кислотонеустойчивые
гранулы – зерна Муха
20

45.

21

46.

Клеточные стенки микобактерий
37

47.

22

48.

24
19

49.

25
Микобактерии с
гранулами
внутри
(зерна Муха)

50.

Микобактерии, окрашенные по Циль-Нильсену

51.

52.

53.

54.

26

55.

Микобактерии в легких

56.

57.

58.

Микобактерии в патологическом материале
27

59.

В клеточной стенке микобактерий до 40% липидов

60.

M.bovis – изогнутые или прямые
короткие палочки с закругленными
концами 1,5-4 мкм в длину и 0,3-0,6
мкм в ширину. Как в культуре, так и
в патматериале наблюдается полиморфизм – коккоподобные и длинные формы. Оптимальная температура роста 37-38 С. Микроаэрофил.
M.avium – тонкие, изогнутые
или прямые палочки с закругленными концами, в 2-3 раза
длиннее других микобактерий. Не требовательна к питательным средам. Оптимальная температура роста
40 С.
M.tuberculosis – тонкие,
изогнутые, прямые, короткие, длинные, ветвящиеся
1,3-6 мкм в длину и 0,2-0,6
мкм в ширину. Оптимальная
температура роста 37 С.
Высокоаэробна. При комнатной температуре не дает
роста. Образует L-формы.
29

61.

КУЛЬТУРАЛЬНЫЕ ОСОБЕННОСТИ МИКОБАКТЕРИЙ
Температурный диапазон - 29-42 С (оpt. 36-38 С).
Жидкие среды - среда прозрачная, на
поверхности пленка.
Плотные среды – микроколонии или налет
беловато-желтого цвета.
На сложных питательных средах длительный
рост (длительная адаптация).
ЭЛЕКТИВНЫЕ СРЕДЫ:
Глицериновый бульон (среда Сотона);
Среда Петраньяни (молоко, картофель, яйца);
Среда Левенштайна-Йенсена (яйца, крахмал,
глицерин, факторы роста);
Яичная среда Гельберга.
30

62.

Культуральные
Д И Ф Ф Е свойства
Р Е Н Ц И Апатогенных
ЦИЯ
П А Т О Г Е Нмикобактерий
НЫ Х МИКОБАКТЕРИЙ
M . aviu m
M . tu b ercu lo sis M . b o vis
С ко р о ст ь р о ст а
30-60 /
30-60 /
15-30 /
20-30
20-30
10-20
Ф о р м а ко л о ни й
RГл ад ки е,
R - сухие,
сухи е
ш ероховат ы е
м ел ки е
0
-
Р о ст на М П Б п р и 37-38 С
-
+
31

63.

ДИФФЕРЕНЦИАЦИЯ
ПАТОГЕННЫ Х МИКОБАКТЕРИЙ
M . a v iu m
M . tu b e rc u lo s is
M . b o v is
Р о с т н а я и ч н ы х с р е д а х п р и t 4 5 0C
-
-
+
П ат огенност ь для м орских свинок
г ен ер ал и зо в ан tu b
г ен ер ал и зо в ан tu b
-
П ат огенност ь для кроликов
л о к ал ь н ы й
tu b
-
г ен ер ал и зо в ан tu b
tu b сеп си с
П ат огенност ь для кур
-
г ен ер ал и зо в ан tu b
32

64.

Выращивание микобактерий в среде Сотона
33

65.

66.

Рост патогенных микобактерий на среде
Петраньяни
Рост патогенных
микобактерий на среде
Левенштайна-Йенсена
34

67.

68. Колонии микобактерий на среде Левенштайна-Йенсена

69.

• Mycobacterium
tuberculosis

70.

• Mycobacterium
tuberculosis

71.

• Mycobacterium
avium

72.

M. bovis на среде
Левенштейна-Иенсена
а среде
а-Иенсена
M. bovis на среде
Левенштейна-Иенсена

73.

Mycobacterium bovis

74.

75.

M. bovis на среде
Левенштейна-Иенсена

76.

77.

Микроколонии микобактерий на плотной
питательной среде
35

78.

Биохимические признаки
микобактерий

79.

Антигенная
А Н ТИ ГЕструктура
Н Н О Е Смикобактерий
ТР О Е Н И Е
сл ож ное
У человеческого вида – 17 антигенов, у бычьего вида – 20
А Н ТИ
ГЕ Н Н О Е С ТР О Е Н
антигенов, у птичьего вида – 10 антигенов,
у атипичных
А Н ТИ ГЕ Н Н О Е С ТР О Е Нсл
И Еож ное
микобактерий – 8-10 антигенов.
A g клет очной ст енки
А Н ТИ ГЕ Н Н О Е С ТР О Е Н И Е слAож
g клет
очной ст енки
ное
A
g
цит
оплазм
ы
Сложные
антигены
A g цит оплазм ы
сл ож ное
A g клет очной
ст енки
цит оплазм ы A g рибосом
A g клет очной ст енкиA gA gрибосом
A g цит оплазм ы
A g рибосом
A g рибосом
О Б Щ И Е (М ЕЖ РО Д О В Ы Е)
Б Щ ИРО
Е (М Д
ЕЖОРО
О ВЕ)
Ы Е) терм остабил ь
О Б Щ И Е (МОЕЖ
ВДЫ
устойчив
терм остабил
ьны йк протеаз
терм
остабил
ьны
й
О Б Щ И Е (М ЕЖ РО Д О В Ы
Е)
терм остабилустойчив
ьны й кС Ппротеазам
ЕЦ И Ф И Ч ЕС КИ Й
устойчив
протективны е
С П ЕЦ И Фк
И Чпротеазам
ЕС КИ Й
устойчив
к протеазам
протективны е
С П ЕЦ ИСФП
ИЧ
ЕСИ
КИФЙ И Ч ЕС КИ Й
ЕЦ
протективны е
протективны е MPB 83
39

80.

П ТАИТ О Г Е Н Н О С Т
Ф А К Т О Р Ы П АФТАОКГТЕОНРНЫО С
ФНР
АЫАЫ
КК-ТТЭОП
РРАЫ
П
АГЫ
ТОЕ
О
ГКЗ
Е
Н
НС
ОКС
С
ТНИ
Ф ТО
АТО
ККТ
О
Т
О
Н
Н
О
Т
И
С
И
КЗ
О
ТО
КС
И
Н
Ф
О
Ы
П
А
Т
Г
Е
Н
Н
О
С
Т
И
ТО
К
С
И
Н
Э
О
ТО
И
К С И Н Ы - Э КЗ О ТО КС И Н
Т О К С ИТО
НТО
Ы
Э
К
З
Т
О
К
С
КНС
ННРРЫ
-- О
КЗ
КС
НИ Р УЮ Т
НО
ЕТО
ПТКС
РТИ
ОИН
ДНИ
УЦ
КНЕ
СЕ-ИИП
Ы
ЭЭКЗ
ОР
ТО
О
Д
УЦ
И
УЮ
П
О
Д
УЦ
И
Р
УЮ
Ф
ОР
РЫ
ЫП
ПА
А ТТО
ОГГЕЕННННООССТТИИ
ФА
А КК Т
ТО
Н
ЕФ
ПКТО
Р
О
Д
У
Ц
И
У
А
Т
ОЕ
РП
Ы
П
А
ТД
ОУЦ
ГР
ЕР
Н
НЮ
ОУЮ
СТТ
Т ИТ
Н
Р
О
Д
УЦ
И
УЮ
Э
Н
Д
О
КС
И
Н
Ы
Н
П
Р
О
И
Р
Э НЭТО
ДН О
ТО
КС
И
Н
Ы
ДК О
ТО
КС
И
Н
Ы
С
И
Н
Ы
Э
КЗ
О
ТО
КС
И
Н
С ИКНС
ЫИ- Э
КЗ
О ТО КС И Н
Н Д ОТО
ТКО
Н
Ы
ТОИКН
СО
И
НРЫ
-Ф
Э КЗ
ОТТО
КС(м
И Никр о капсу
К
Д
А
К
О
Р
Э
Н
Д
О
ТО
КС
Ы
К
О
Р
Ф
А
К
Т
О
Р
(м
икр
о
капсул
а)
Н-ЕЕТО
О
УЦНИИЫ
УЮ
Т о капсул а)
ОР
ФППА
КДДТИ
(м
икр
ЭК Н
ДДО
Н
РРКС
О
УЦ
РР
УЮ
Т
Н Е хо
П Рнд
О
Др УЦ
И(а
Р
УЮ
Тетки)
нар
уш
ает
м
ито
ии
ф
ункция
ды
К
О
Р
Д
Ф
А
К
Т
О
Р
(м
и
к
р
о
к
п
с
ул
а
)х
нар
уш
ает
м
ито
хо
нд
р
ии
(
ф
ункция
д
ы
хания
кл
К Онд
РД
- ФА
Кункция
Т О Р (м икр
о капсул
а)
уш
ает
м
ито
хо
р
ии
(
ф
д
ы
хания
кл
етки)
ЭЭнар
Н
Д
О
ТО
КС
И
Н
Ы
Д ОаТО
ИиНтЫоКхО
РнДДд
ФиКС
АиИК(НТф
икр
одкапсул
а)
ЭоН
О-ТО
ЫОуРн (м
р уНш
е тКС
мнар
р
к
ц
и
я
ы
х
а
н
и
яе
Л
И
П
И
Д
Ы
уш
ает
м
ито
хо
нд
р
ии
(
ф
ункция
д
ы
хания
кл
Л
И
П
И
Д
Ы
КК О
Р
ФЛ
АИ
ОИРРД(м
(м
икроокапсул
капсула)
а)
Ы
Онар
РД
Д --уш
Ф
А
КК ТТПО
икр
К
О
Р
Д
Ф
А
К
Т
О
(м
икр
о капсул
а)
ает
м
ито
хо
нд
р
ии
(РМф
ункция
дДы
хания
В
о
ск
Д
УР
А
М
И
Н
И
П
ЕПТ
Л
И
П
И
Д
Ы
В
о
ск
Д
М
УР
А
М
И
Н
Д
И
П
Е
П
Т
И
Д
О
Н
нар
уш
ает
м
ито
хо
нд
р
ии
(
ф
ункция
д
ы
хания
кл
етки)
Л
И
П
И
Д
Ы
нар ушВ
ает
м ито
хо нд рнар
ииМ
( фУР
ункция
дН
ынд
хания
клункция
етки)
о
ск
Д
А
Д
П
ТПИЕДдП
Оы хания
Н И ДклО
уш
ает
мМ
итоИхо
рИ
ииП(Е
ф
ет
В офстио
к Д
М
У
Р
А
М
И
Н
Д
И
Т
фДтио
но
вы
еА
к-ты
сул
ьф
атид
ы
В
о
ск
М
УР
М
И
Н
Д
И
П
Е
П
Т
И
Д
О
Н
Л
И
П
И
Д
Ы
но
вы
е
к-ты
сул
ьф
атид
ы
Л
И
П
И
Д
Ы
Лвы
И Пе
И Дк-ты
Ы
Л И П ьф
И Д Ыатид ы
ф
тио
но
сул
т и Во
е
к
-т
ы
с
у
л
ь
ф
а
т
и
д
ы
оонск
М
УР
А
М
И
Н
Д
И
П
Е
П
Т
И
Д
О
Н
В
о
ск
Д
М
УР
А
М
И
Н
Д
И
П
Еер
О
гибел
ь
м
акр
о
ф
аго
в,
пр
о
л
иф
ф
тио
но
вы
е
к-ты
сул
ьф
атид
ы
В
о
ск
Д
М
УР
А
М
И
Н
Д
И
П
Е
П
ТП
Иация
ДТ
Вгибел
скоД
Двьы
М
УР
А
М
И
Н
И
П
Е
П
Т
И
Д
О
Н
м акр о ф аго в, пр о л иф ер ация гистио цито
в,ОИНДги
тр
ансф
рлк-ты
м
ация
их
веьф
эпител
ио
ид
ны
ео
гибел
ь амеекоакр
оация
ффа
аго
в,
пр
оатид
иф
ер
ация
гистио
цито
в,
ф
тио
но
вы
к-ты
сул
ьф
атид
ы
б
лтр
ь
м
р
о
ф
го
в
,
п
р
о
л
и
ф
е
р
а
ц
и
я
ги
с
т
и
ансф
р
м
их
в
эпител
ио
ид
ны
и
гиганские
тио
но
вы
е
сул
атид
ы
фе
тио
но
вы
к-ты
сул
ьф
ы
гибел
ьвы
м акр
ок-ты
ф аго в, пр осул
л иф ер
ация
гистио
цит
ф
тио
но
е
ьф
атид
ы
трсансф
ртр
мааго
ация
их
виф
ио
ид
еер
ив,ация
гиганские
а
н
ф
оакр
ром
ц ив,я
иомх
вэпител
эТих
пУБ
иаго
т
е
л
ионы
о
иН
д
нны
ги
г
Е
Р
К
УЛ
И
гибел
ь
м
акр
о
ф
в,
пр
л
иф
гистио
цито
гибел
ь
м
о
ф
пр
л
ер
ация
гистио
цито
ансф
о
р
ация
в
эпител
ио
ид
и игиганс
К УЛ
И Нер ация гистио цито в, ыее
гибел ь м акр о Т
фУБ
аго Е
в,Рпр
о л иф
ансф
оИ
рио
мН
ация
в гиганские
ны е и гиганск
гибел
ьих
м
оЛИф
аго
в,
оэпител
л ифио
еридация
гисти
тр
м
эпител
ио
идны
ныих
е ии
гиганские
трансф
ансф оо ррТ
м ация
ация
их
эпител
ид
епр
У
БЕ
К
У
Т УБ
ЕР
РввтрКакр
УЛ
Н
Т УБ Е Р К УЛ И Н
Т УБих
Е Р КвУЛ
ИН
эпител
ио ид ны е и ги
Ттр
УБансф
Е Р К УЛоИрН
Нм ация
40

81.

38

82.

83.

84.

85.

86.

Патогенность микобактерий для
лабораторных животных

87. Развитие инфекционной гранулемы

Клетки, являющиеся результатом защитной
реакции организма на внедрение
туберкулёзной палочки
эпителиоидные
клетки
Гигантские клетки
41

88.

ИДЕНТИФИКАЦИЯ КУЛЬТУР
УЧИТЫ ВАЮ Т:
С КО Р О С Т Ь П О Я В Л Е Н И Я
П Е Р В И Ч Н О ГО Р О С Т А
Кул ьт ур ал ьно -м о р ф о л о ги чески е
и т и нкт о р и ал ьны е сво й ст ва
С п о со б но ст ь к р о ст у п р и
р азл и чны х т ем п ер ат ур ны х
р еж и м ах
П ат о генно ст ь д л я
л аб о р ат о р ны х ж и во т ны х
36

89.

ДИФФЕРЕНЦИАЦИЯ ОТ
АТИПИЧНЫ Х МИКОБАКТЕРИЙ
П А ТО ГЕ Н Н Ы Е
А ТИ П И Ч Н Ы Е
С корост ь рост а
15-30 / 3-10 /
30-60 / 15-30 /
10-20
3-10
20-30
10-20
П И ГМ Е Н ТО О Б Р А ЗО В А Н И Е
+
-
П А ТО ГЕ Н Н О С ТЬ д ля лаб. ж ив.
-
+
49

90.

И З М Е Н Ч И В О С Т Ь
L -Ф О Р М Ы
ст абильны е
нест абильны е
Ф ИЛЬТРУЮ Щ ИЕСЯ
м е л ки е р а зм е р ы
ФОРМ Ы
с л а б о в и р у л е н тн ы
с п о с о б н ы к р е в е р с и и (п р и п а с с а ж а х н а
м о р с ки х с в и н ка х )
ЛЕКАРСТВЕННО УСТО ЙЧИВЫ Е Ф О РМ Ы
и зм е н е н и е ку л ь ту р а л ь н ы х
с в о й с тв
т р уд н о д и аг н о ст и р о в ат ь , н е в ы я в л я ю т ся
п р и ал л ер г и ч ески х и ссл ед о в ан и я х
42

91.

L - Ф О Р М Ы
П о н и ж е н и е м е та б о л и зм а
С л а б о в и р у л е н тн ы
Б ы с тр о р а зр у ш а ю тс я в о в н е ш н е й с р е д е
Т р у д н о о б н а р у ж и ть б а кте р и о с ко п и ч е с ки
В ы зы в а ю т л а те н тн ы е ф о р м ы б о л е зн и
н ест аб и л ь н ы е
ст аб и л ь н ы е
ВИРУЛЕНТНОСТЬ
-
ПАТОГЕННОСТЬ ДЛЯ
МОРСКИХ СВИНОК
+
+
в
О б н а р у ж и в а ю т с я в в акт и в н ы х
tu b о ч агах
н еакт и в н ы х
организме
tu b о ч агах
43

92.

Фазово-контрастная микроскопия
L-форм микобактерий туберкулеза
44

93.

УСТОЙЧИВОСТЬ
70 0 C - чер ез
20м и н
ки пя чени е - 1-3 м и н
t
РЕЖИМ
ПАСТЕРИЗАЦИИ
65 0 C - 30 м и н
в ы с у ш и в а н и е в в ы со хш ей м о кр оате д о 3 м ес.
гн и е н и е
в по д сти л о чно м
нав о зе - 7 м ес
в ж и д ко м нав о зе бо л ее 1 го д
прямы е
ги бел ь чер ез 60 м и н
солнечны е лучи
0
в
м
асл
е
пр
и
4
С д о 300д ней
м олочны е
п р о д у кт ы в сы р е - д о 260д ней в м о л о ке-14 д н
45

94.

У С Тв Ом асле
Й Ч ИприВ 4О0 ССдоТ 300дней
Ь
м олочны е
0
в
м
асле
при
4
С
до
300дней
сы
ре
до
260дней
продукт
ы
м олочны е
в сы ре - до
260дней
продукт
е всм
ятку M .avium не
в яице ы сваренны
теряет вирулентность
сваренны е всм ятку M .avium не
в яице
теряет вирулентность
в зам орож енном
до одного года
м ясеенном
в зам орож
до одного года
м
ясе
УС ТО Й ЧИ В , требуется больш ие
к дез.
дозы и длительная экспозиция
вещк ест
вам
УС ТО Й ЧИ В , требуется больш ие
дез.
вещ ест вам дозы и длительная экспозиция46

95.

ОСНОВНЫЕ МЕТОДЫ
ДИАГНОСТИКИ
Т У Б Е Р КУ Л И Н О В А Я
ПРОБА
Р ГЗ Т
ЛАБО РАТО РНО Е
ИССЛЕДОВАНИЕ
м и кр о ско п и я
л ю м и несц ент ная м и кр о ско п и я
вы д ел ени е кул ьт ур ы на сп ец .
п и т ат ел ьны е ср ед ы
и д ент и ф и кац и я кул ьт ур
биопроба
47

96.

Лабораторные методы диагностики туберкулеза
Биологические
Серологические
Заражение
лабораторных
животных
(биопроба на
морских
свинках,
кроликах и
курах)
Иммуноферментный
анализ (ИФА), РИФ, РСК с
туберкулезным антигеном,
РА, РПГА, агрегатагглютинация, применение
моноклональных антител
Молекулярногенетические
Полимеразная
цепная реакция
(ПЦР), лигазная
цепная реакция
(ЛЦР)
Микробиологические
Бактериоскопические
Окраска по Циль-Нильсену,
окраска флуорохромом
Культуральные
Посевы на плотные и жидкие
питательные среды
48

97.

Микобактерии окрашены аурамином и при исследовании в
ультрафиолетовых лучах люминесцентного микроскопа
выглядят светящимися жёлтыми палочками
50

98.

Микобактерия в макрофаге

99.

100.

Размножение микобактерий туберкулеза
в перитонеальных макрофагах
а) через 7 часов культивирования
53

101.

Размножение микобактерий туберкулеза
в перитонеальных макрофагах
в) через 25 часов культивирования
54

102.

Размножение микобактерий туберкулеза
в перитонеальных макрофагах
через 48 часов культивирования
55

103.

56

104.

57

105.

Схема постановки ИФА
1)
Антиген МРВ83
Сенсибилиза- 1. Внесение в лунки
ция планшета планшетов с антигеном
антигеном
МРВ83 сыворотки крови
МРВ83
больных животных.
2)
Отмывание
планшета
3)
Отмывание
планшета
Субстрат
4)
Остановка
реакции стопреагентом
2. Внесение в лунки
планшетов антиглобулиновой сыворотки,
коньюгированной с
ферментом пероксидазой.
3. Внесение в лунки
планшетов субстратной
смеси для фермента.
4. Учет результатов
реакции.
58

106.

107.

микобактерий комплекса M. Tuberculosis от
Дифференциация
возбудителей
туберкулеза
растущих
нетуберкулезных.
Для
этой цели
Дифференциация
возбудителей
процессе бактериологического
исследования
возникает
следующиеВ биохимические
признаки
культуры:
необходимость
дифференциации
медленно
растущих
1. Ниациновый
тест (синтез
никотиновой
кислоты)
комплекса
M. Tuberculosis
от медленно
• Синтезмикобактерий
никотиновой
кислоты
(ниациновый
тест
растущих нетуберкулезных. Для этой цели определяют
следующие биохимические признаки культуры:
• Синтез никотиновой кислоты (ниациновый тест)
Niacin Detection
Niacin Detection Test Kit
(набор
для ниацино
(набор для ниацинового теста):
1 - отрицательный
контроль;
1 - отрицательный
2 - тестируемая культура;
2 - тестируемая
к
3 - положительный
контроль
3 - положительный

108.

Дифференциация возбудителей туберкулеза
2.
Редукция нитратов
•Редукцию
нитратов
•Редукцию нитратов
Nitrate Reduction Te
Nitrate Reduction Test Kit
(набор
для нитратреду
(набор
для нитратредуктазного
теста): теста):
слева - положительная реакция,
слева
положительная
справа --отрицательная
справа - отрицател

109.

Дифференциация возбудителей туберкулеза
•Наличие пиразинамидазы
3. Наличие пиразинамидазы
•Наличие пиразинамидазы
Pyrazinamidase
(набор
для Test
пиразин
Pyrazinamidase
Kit
(набор для пиразинамидазного
теста):
теста):
1 - исходный
цвет;
1 - исходный
2 - отрицательный контроль;
2 - отрицательный
3 - положительный контроль
3 - положительный

110.

Дифференциация возбудителей туберкулеза
4. Способность к росту на среде с гидразин-тиофен-2
карбоксиловой кислотой (ТСН)
•Способность к росту на среде с
гидразин-тиофен-2
карбоксиловой
кислотой (ТСН)
Th
тио
•С
гидра
кисло
Thiophene Carboxylase Test Kit
(набор для
тиофенкарбоксилазного теста).

111.

Дифференциация возбудителей туберкулеза
5. Тест на каталазу
•Тест на каталаз
•Тест на каталазу
Catalase
Catalase Test Kit
(набор
для
катал
(набор для
каталазного
теста):
видна
пена из об
видна пена
из образовавшихся
пузырьков к
пузырьков кислорода
при положител
при положительной
реакции

112.

Экспресс-тест по форме высыхания слюны

113.

ИММУНИТЕТ
КЛЕТОЧНЫЙ
ИММУННЫЙ ФАГОЦИТОЗ
ГЗТ
ГУМОРАЛЬНЫЙ ИНДИКАТОРНЫЕ At
НЕСТЕРИЛЬНЫЙ
ВАКЦИНА
шт. BCG (ВЦЖ)
59

114. Аллергическая диагностика туберкулеза

115.

60
Положительная
туберкулиновая
проба

116. Аллергическая диагностика туберкулеза (реакция Манту)

Реакция организма на
введение туберкулина.
В месте введения
препарата в кожу
возникает
специфическое
воспаление,
вызванное
инфильтрацией
Т-лимфоцитов.

117.

1– микробактерии
туберкулеза под
микроскопом (окраска по
Цилю-Нельсену);
2– рост микобактерий
туберкулеза вида
Mykobacterium на среде
Петраньяни;
3– положительная
внутрикожная реакция на
туберкулин у коровы; 4–
положительная внутрикожная
реакция на туберкулин у
курицы; 5– положительная
внутрикожная реакция на
туберкулин у свиньи; 6–
лобулярный казеоз в легких с
обызвествлением и
осумкованием;
7– жемчужница;
8– первичный аффект в
легком и лучистый казеоз
бронхиальных
лимфатических узлов.

118.

119.

Эффективность вакцины БЦЖ доказана в борьбе с туберкулезом
сельскохозяйственных животных. С успехом использовали БЦЖ
для иммунизации свиней. Внутрикожное введение пушным
зверям (норкам) БЦЖ в дозе 0,02 мг вызывает образование
иммунитета длительностью 10-12 мес.

120.

121.

Несмотря на многолетний опыт борьбы с туберкулезом,
Россия является одной из самых неблагополучных стран
мира по туберкулезу человека и животных. Это связано с
низким уровнем жизни населения, плохим питанием людей
и плохим содержанием и кормлением животных, недостаточным производством качественных диагностикумов,
дороговизной диагностики, неблагоприятным климатом,
огромным количеством мест заключения осужденных, где
туберкулез процветает, т.к. заключенных не лечат, а
помещения не дезинфицируют.
Разработано много методов диагностики туберкулеза. В
этой области мы впереди планеты всей. Но если жизнь
людей и животных в России не улучшится, особенно в
зонах с холодным, сырым климатом, все методы диагностики туберкулеза – это бессмысленный и неблагодарный
труд микробиологов.
61