Similar presentations:
Автоматизация биохимических исследований
1. Автоматизация биохимических исследований
2.
План• Автоматизация
• Основные принципы биохимического
анализа
• Биохимические анализаторы
• Основные принципы адаптации
биохимических наборов
3.
Задачи автоматизации• Максимально автоматизировать процесс
исследования
• Уменьшить влияние человеческого фактора
• Сократить расход реагентов
• Обеспечить хорошую внутри- и
межлабораторную воспроизводимость
• Внедрить современные методы
исследования в рутину лаборатории
4.
БылоРезультат
5.
СталоРезультат
6.
67. Фотометрия
Закон Бугера-Ламберта-БераA=εlC
7
8. Турбидиметрия
89.
910.
1011.
1112.
1213.
1314.
1415.
1516.
Дозирование пробыи реагентов
Фотометрические
измерения
Инкубация
реакционной смеси
Расчет результата
Автоматизация
16
17. Оборудование для биохимического анализа
Автоматическийанализатор
Полуавтоматический
анализатор
Фотометр
Фотометрия
17
18.
1819. Полуавтоматический б/х анализатор
ПринтерДисплей
Термостатируемая
кювета
Оптическая система
Перистальтический
насос
Трубка забора пробы
19
20. Автоматический б/х анализатор
«Рука»дозатора
Штатив
с реагентами
Моющая станция
Оптическая
система
Штатив с пробами
Реакционный штатив
20
21. Аналитические характеристики
• Лампа (галогеновая/светодиоды) исветофильтры
– Качество
– Стабильность и ресурс
• Дозаторы
– Точность дозирования
• Кюветы
– Одноразовые или моющая станция
– Сухой или водный термостат
• Программное обеспечение
– Калибровка (линейная и нелинейная)
– Контроль качества
21
22. Производительность
• Скорость дозирования– Количество рук-дозаторов
– Количество реакционных кювет или наливная кювета
• Фотометр
– Цикл измерения
• Методика
– Количество реагентов
– Тип методики (конечная точка и т.п.)
• Программное обеспечение
– Последовательность выполнения:
тест за тестом, пациент за пациентом или
свободный доступ
22
23. Удобство в работе
• Штатив для реагентов– Емкость
– Возможность снять штатив
– Охлаждение
• Штатив для образцов
– Емкость
– Возможность снять штатив
– Специальные чашки, первичные пробирки
Расход воды и промывочных растворов
Программное обеспечение
Открытая или закрытая система
Надежность
23
24. Какой анализатор выбрать?
Переченьметодик
Аналитические
характеристики
Число
исследований
Организация
потоков
Бюджет
лаборатории
24
25. Какие выбрать наборы?
1Определить тип
оборудования
2
Выбрать
соответствующие
наборы
25
26. Основные принципы адаптации наборов к биохимическим анализаторам
2627. Интерфейс программы анализатора
2728.
- основная длина волны (main wavelength)- вторая длина волны (sub wavelength)
• тип реакции (method, mode)
• единицы измерения (unit)
• число значимых знаков после запятой
(decimals)
• температура (temperature)
• время задержки (delay time)
• время реакции (reaction time)
28
29.
Абсорбция0,5
0,45
0,4
0,35
0,3
0,25
0,2
0,15
0,1
0,05
0
НАДН
НАД+
280 290 300 310 320 330 340 350 360 370 380 390 400
λ(нм)
29
30.
• длина волны (wavelength)- основная длина волны (main wavelength)
- вторая длина волны (sub wavelength)
• единицы измерения (unit)
• число значимых знаков после запятой
(decimals)
• температура (temperature)
• время задержки (delay time)
• время реакции (reaction time)
30
31.
• Конечная точка• Фиксированное
время
• Дифференциальная
методика
• Кинетика
Абсорбция
Абсорбция
Абсорбция
плато
плато
плато
Время
t
По конечной точке
время
задержки
t
Двухточечное
Время
время
задержки t
=t= t
Кинетическое
Время
31
32.
• длина волны (wavelength)- основная длина волны (main wavelength)
- вторая длина волны (sub wavelength)
• тип реакции (method, mode)
• число значимых знаков после запятой
(decimals)
• температура (temperature)
• время задержки (delay time)
• время реакции (reaction time)
32
33.
• длина волны (wavelength)- основная длина волны (main wavelength)
- вторая длина волны (sub wavelength)
• тип реакции (method, mode)
• единицы измерения (unit)
• температура (temperature)
• время задержки (delay time)
• время реакции (reaction time)
33
34.
• длина волны (wavelength)- основная длина волны (main wavelength)
- вторая длина волны (sub wavelength)
• тип реакции (method, mode)
• единицы измерения (unit)
• число значимых знаков после запятой
(decimals)
• время задержки (delay time)
• время реакции (reaction time)
34
35.
• длина волны (wavelength)- основная длина волны (main wavelength)
- вторая длина волны (sub wavelength)
• тип реакции (method, mode)
• единицы измерения (unit)
• число значимых знаков после запятой
(decimals)
• температура (temperature)
• время реакции (reaction time)
35
36.
АбсорбцияПлато
Линейный
участок
Время
36
37.
• длина волны (wavelength)- основная длина волны (main wavelength)
- вторая длина волны (sub wavelength)
• тип реакции (method, mode)
• единицы измерения (unit)
• число значимых знаков после запятой
(decimals)
• температура (temperature)
• время задержки (delay time)
37
38.
АбсорбцияПлато
• Минимальное время реакции
(считывания) для кинетики
определяется
чувствительностью прибора
• Количество точек считывания
не может быть меньше трех
Линейный
участок
• Минимальное время для
конечной точки определяется
Время временем выходом реакции
на плато
38
39.
Схема анализа (Sapphire-400)R1
S
R2
5 минут
5 минут
15 минут
Фотометрирование
39
40.
• калибратор (calibrator), или фактор для ферментов(factor)
• предел абсорбции (absorption limit)
• объем образца (sample volume)
• объем пробы (reagent volume)
• предел линейности (linearity limit, linear range)
• нормальные величины (normal range)
• засасываемый объем (aspirate volume)
40
41.
• холостая проба (reagent blank)• предел абсорбции (absorption limit)
• объем образца (sample volume)
• объем пробы (reagent volume)
• предел линейности (linearity limit, linear range)
• нормальные величины (normal range)
• засасываемый объем (aspirate volume)
41
42.
V 1000E A / мин
l s
Е – активность фермента, Е/л;
F
А/мин – изменение оптической плотности реакционной смеси
за 1 мин, ед. опт. плотности/мин
V – объём реакционной смеси, мл;
ε – миллимолярный коэффициент экстинкции, л/ммоль´см;
l – длина оптического пути, см;
s – объём пробы (сыворотки), мл;
1000 – коэффициент пересчёта активности в мкмоль/мин. л;
F – фактор
42
43. Коррекция фактора
По мультикалибратору:F
Cкал ибратор
Aкал ибратор
43
44.
• холостая проба (reagent blank)• калибратор (calibrator), или фактор для ферментов
(factor)
• объем образца (sample volume)
• объем реагента (reagent volume)
• предел линейности (linearity limit, linear range)
• нормальные величины (normal range)
• засасываемый объем (aspirate volume)
44
45.
• холостая проба (reagent blank)• калибратор (calibrator), или фактор для ферментов
(factor)
• предел абсорбции (absorption limit)
• объем реагента (reagent volume)
• предел линейности (linearity limit, linear range)
• нормальные величины (normal range)
• засасываемый объем (aspirate volume)
45
46.
• холостая проба (reagent blank)• калибратор (calibrator), или фактор для ферментов
(factor)
• предел абсорбции (absorption limit)
• объем образца (sample volume)
• предел линейности (linearity limit, linear range)
• нормальные величины (normal range)
• засасываемый объем (aspirate volume)
46
47. Расчет количества определений
Объем реагентовв наборе
Объем
реакционной
смеси
Количество
определений в
наборе
47
48. Для полуавтоматов
500 мл / 500 µл = 1000Определений в
наборе
48
49. Для автоматов
240 мл / 200 µл = 1200Определений в
наборе
49
50.
• холостая проба (reagent blank)• калибратор (calibrator), или фактор для ферментов
(factor)
• предел абсорбции (absorption limit)
• объем образца (sample volume)
• объем пробы (reagent volume)
• нормальные величины (normal range)
• засасываемый объем (aspirate volume)
50
51.
• холостая проба (reagent blank)• калибратор (calibrator), или фактор для ферментов
(factor)
• предел абсорбции (absorption limit)
• объем образца (sample volume)
• объем пробы (reagent volume)
• предел линейности (linearity limit, linear range)
• засасываемый объем (aspirate volume)
51
52.
• холостая проба (reagent blank)• калибратор (calibrator), или фактор для ферментов
(factor)
• предел абсорбции (absorption limit)
• объем образца (sample volume)
• объем реагента (reagent volume)
• предел линейности (linearity limit, linear range)
• нормальные величины (normal range)
52
53.
• Регулярно проводить сервисное обслуживание анализатора• Следить за чистотой кювет, наконечников, посуды, картриджей,
при этом
– не использовать моющие средства, содержащие
протеазы
– не использовать для дезинфекции перекись водорода
– для автоматических анализаторов использовать моющие
растворы рекомендованные производителем
– следить за качеством дистиллированной воды
• Регулярно мыть картриджи и заменять их на новые
53
54.
• Для каждой новой серии наборов или при сменефотометрического оборудования следует проводить
калибровку/корректировать фактор по сывороточному
мультикалибратору
• Ставьте калибратор в 3-4 параллелях
• Проверяйте правильность анализов по контрольным
сывороткам
• Правильно выбирайте метод в паспорте
мультикалибратора или контрольных сывороток
54
55.
Для предотвращения контаминации не рекомендуетсяпоследовательно выполнять следующие анализы:
Tg
Tg
Tg
Cl
Cl
Cl
Cl
LDH
AST
Mg
ALP
ALT, AST
Tg
LDH
ALT, AST
ALP
P
LDG
55
56.
ЩЕЛОЧНАЯ ФОСФАТАЗА-НОВО (В-8063)Кинетический метод (DGKC)
Основные параметры для биохимических
анализаторов:
Длина волны
405 нм
Измерение против
Воздуха или воды
Метод измерения
Кинетика
Единица измерения
Е/л
Число знаков после запятой
0
Изменение оптической плотности
Возрастает
Температура
37°С
Соотношение образец:реагент
1:50
Время инкубации (задержка)
60 с
Время реакции (считывания)
60-180 с
Число считываний
≥3
Верхний предел абсорбции реагента против воды
0,800 А
Максимально допустимое изменение оптической
плотности/мин
0,43 А
Фактор
2757
Линейность
До 1200 Е/л
Нормальные величины в сыворотке крови
70-270 Е/л
56
57.
5758.
Схема анализа (Sapphire-400)R1
S
R2
5 минут
5 минут
15 минут
Фотометрирование
58
59.
Схемы анализаR
S
задержка
считывание
Кинетика
Монореагент
прогрев
R1
инкубация
S
прогрев
R2 задержка считывание
инкубация
инкубация
Кинетика
Биреагент
60.
Схемы анализаR
S
прогрев
R1
прогрев
задержка
Счит.1
Счит. 2
Двухточечная
кинетика
Монореагент
инкубация
S
R2
инкубация
задержка
Счит.1
инкубация
Счит. 2
Двухточечная
кинетика
Биреагент
61.
Схемы анализаR
S
прогрев
R1
S
прогрев
считывание
Конечная
точка
Монореагент
инкубация
задержка
инкубация
R2
считывание
инкубация
Конечная
точка
Биреагент
62.
Схемы анализаR1
S
прогрев
R1
задержка
Счит.1 R2
инкубация
Хол.
Хол.
счит.1
счит.2
R2
S
задержка
прогрев
инкубация
Счит. 2
инкубация
Дифференциальная
методика
С движущаяся
холостая проба