Технология получения препаратов гризина

1. Технология получения препаратов гризина

Продуцент
антибиотика – культура гриба
Actinomyces griseus.
Активен в отношении грамположительных и
грамотрицательных
бактерий
и
микроскопических грибов.
При
добавке
к
кормам
оказывает
стимулирующее воздействие на рост молодника
животных.
Активность чистых препаратов гризина до 1000
ед./мг.

2.

Кормовой препарат выпускается в виде кормогризина -5, 10, -40, представляет собой высушенную к.ж. продуцента
Act. griseus, содержащую соответственно 5,10 и 40 г чистого
антибиотика в 1г готового препарата.
• Культуру продуцента хранят на агаризованных средах или
в виде спорового материала, выращенного на пшене.
Посевной материал получают путем последовательного
размножения культуры сначала в колбах на качалке.
• В две генерации при t=26-28 ºС в течение 24ч. на среде с
рН от 6,8 до 7,3 и состава, %:
• Крахмал
- 1,5
• Кукурузная мука
- 2,0
• Нитрат аммония
- 0,5
• Хлорид натрия
- 0,2
• Фосфат калия одноз. – 0,02
• Мел
- 0,3.

3.

• Посевной материал 2-й генерации после
проверки морфологического состава на
отсутствие постороннего фага и посторонней
микрофлоры в количестве 0,1% передается в
посевной аппарат.
• Среда посевной среды та же с добавлением
0,05% сульфата магния и добавляют до 0,2%
стерильного пеногасителя.
• Культивирование в условиях перемешивания и
аэрации (1м3/м3*мин.).
• Параметры выращивания: t=26-28 ºС в
течение 24ч. на среде с рН от 6,8 до 7,3.

4.

Культивирование в ферментере на среде, %:
• Крахмал
- 1,8
• Кукурузная мука
- 2,0
• Нитрат аммония
- 0,5
• Хлорид натрия
- 0,2
• Фосфат калия одноз. –0,02
• Мел
- 0,5
• τ= 50-60ч., затем вакуум-выпаривание в 3-4 раза
при : t=50 ºС, активность концентрата не ниже
3000 ед./ см3. Концентрат высушивают на
распылительной сушилке, потери антибиотика
около 11%. С 1т концентрата получают до 100 кг
сухого продукта.
• Затем стандартизация.

5. ФРАДИЗИН.

• Препарат ветеринарного назначения,
содержащий антибиотик тилозин и наполнитель.
• Свойства. По внешним признакам это
крупнозернистый порошок от светлокоричневого до темно-коричневого цвета,
нерастворимый в воде, хорошо смешивается с
кормами.
• Фрадизин
относится
к
малотоксичным
лекарственным средствам.
• Форма выпуска. Выпускается в порошке,
расфасованном по 20 кг в полиэтиленовые мешки,
вложенные в бумажные мешки.

6.

• В зависимости от содержания тилозина,
выпускается промышленностью в форме
фрадизин-5 и фрадизин-10, содержащих в
1 г соответственно 5 тыс. и 10 тыс. ед.
антибиотика. Препарат хранят с
предосторожностью (список Б), в сухом,
затемненном помещении, при температуре
не выше 20°С, упакованным в
водонепроницаемую тару.
• Срок годности при соблюдении условий
хранения 6 месяцев.

7.

• Тилозин всасывается в желудочно-кишечном тракте и
создает терапевтическую концентрацию в крови в
течение 6-8 часов.
• Фрадизин подавляет рост и развитие стафилококков,
стрептококков, пневмококков и микоплазм, а также
клостридий, пастерелл и других микроорганизмов.
• Назначают фармакологическое средство с целью
профилактики и лечения бронхопневмонии и
гастроэнтеритов свиней, для предупреждения
послеродовых заболеваний у свиноматок, а также с
профилактической и лечебной целями при
респираторном микоплазмозе бройлеров, цыплят
яичных пород и ремонтного молодняка птиц.
• Перед применением препарат тщательно
перемешивают с кормом. Проварка смеси не
допускается.

8.

• Получение фрадизина
• Фрадизин представляет собою обезвоженную
культуральную жидкость продуцента антибиотика
тилозина Streptomyces fradiae с внесенными в нее
при необходимости наполнителями.
• Фрадизин может выпускаться в виде сухого
препарата (если культуральная жидкость
обезвожена полностью) или в виде жидкого
препарата (если культуральная жидкость
обезвожена частично).
С 1 м3 ферментационной среды получают
примерно 62 кг готового продукта, содержащего
40 г тилозина в 1 кг продукта.

9.

• Выращивание культуры-процента на
ферментационной среде следующего состава,
г/л:
• меласса свекловичная 23,0-27,0;
• мука пшеничная 13,0-17,0;
• глютен кукурузный 8,0-12,0;
• масло соевое или жир животный 10,0-12,0;
• дрожжи кормовые 2,0-3,0;
• углекислый кальций 1,8-2,2;
• однозамещенный фосфорнокислый аммоний
0,8-1,2;
• хлористый натрий 0,8-1,2;

10.

• В качестве продуцента тилозина был использован
штамм Streptomyces fradiae
• Музейную культуру рассеивают на отдельные
колонии на чашках Петри с агаризованной средой.
• Затем культуру выращивают в колбах
Эрленмейера вместимостью 750 мл, заполненных
100 мл посевной среды следующего состава, г/л:
• мука соевая 5,0;
• дрожжи кормовые 3,0;
• кукурузный экстракт 3,0;
• углекислый кальций 3,0;
• масло соевое 10,0 и вода водопроводная до 1 л.
При температуре 29±1oC на термостатированной
качалке (240 об/мин) в течение 48 ч.

11.

• Посевной материал в количестве 3-5% переносят в
ферментер.
• Процесс биосинтеза тилозина ведут при постоянно
работающей мешалке.
Температурный режим ферментации:
• первые 10 ч культивирования (стадия накопления
биомассы продуцента) - 36+1oC,постепенное в
течение 4 ч снижение температуры до 29+1oC и
поддержание на этом уровне до конца процесса.
• Режим аэрации : первые сутки - 0,5 л воздуха/л
среды в минуту, 2-5 сут - 1,0 л воздуха/л среды в
минуту, далее до конца процесса - 0,7 л воздуха/л
среды в минуту.

12.

• Через 155 ч культивирования с трехкратным
доливом ферментера водопроводной водой
получают 10 м3культуральной жидкости с
активностью 5000 ед/мл.
• После ее упаривания и сушки на распылительной
сушилке получают концентрат с содержанием
тилозина.
• Съем готового продукта с 1 м3 ферментационной
среды составляет 72,6 кг.
Для получения стандартизированного
товарного фрадизина с содержанием тилозина 40
г/кг готового продукта приготовленный концентрат
смешивают с кукурузной мукой в качестве
наполнителя.

13.

• Бактериальные препараты
• Бактериальные инсектициды
• Бактериальные препараты, относящиеся
к инсектицидам нового поколения, эффективны
в отношении порядка 400 видов насекомых,
включая вредителей полей, садов, леса и
виноградников.
• биопрепараты, созданные на основе
кристаллообразующих бактерий из групп Bacillus
thuringiensis, var. Thuringiensis и Bacillus
thuringiensis, var. kurstaki, а также Спиносад,
являющийся продуктом ферментации
природного почвенного организма.

14.

• Спиносад высокоактивен, обладает ярко
выраженным кишечно-контактным действием.
• К гибели насекомых приводит нарушение
передачи нервных импульсов и ингибирование
никотин-ацетилхолиновых рецепторов.
Защитное действие около двух недель.
Действие на вредные организмы
• Бактерии, и их токсины, попадая с пищей в
кишечный тракт насекомого, способны вызвать
паралич, заболевания и гибель заразившихся
особей из-за повреждения внутренних
органов.

15.

• Сразу после их применения у насекомых
вредителей уменьшается активность питания.
Их гибель отмечается на 3-5-е сутки после
обработки и примерно на 10-тый день
достигает максимума.
• Биопрепараты обладают и выраженным
последействием, проявляющимся в гибели
фитофагов на поздних стадиях развития.
• Недостатком бактериальных препаратов
является то, что бактерии группы Thuringiensis
не обладают высокой вирулентностью и
контагиозностью для насекомых. Поэтому
желаемый эффект получают только при
первичном заражении корма.

16.

• Влияние факторов внешней среды
• Препараты на основе бактерий проявляют
эффективное действие только при высокой
пищевой активности насекомого вредителя
(при температуре не ниже 16°С)
Эффективность бактериальных препаратов
снижается под влиянием неблагоприятной
погоды – затяжных дождей, смывающих
препарат, ультрафиолетового излучения,
частично инактивирующего бактерии, а также
низкой температуры воздуха, ослабляющей
активность питания вредителей.

17.

• Токсичность
• У препаратов, изготовляемых из спор
токсических бактерий, отсутствуют
специфические запахи, они безвредны для
человека, животных и полезных насекомых,
безопасны для растений.
• Бактериальные родентициды
• Специфическим возбудителем заболеваний
мышевидных грызунов является штамм
бактерий Salmonella enteritidis, var.
Issatschenko, 29/1. Препараты на его основе
применяются в сельском хозяйстве и в целях
медицинской, санитарной и бытовой
дератизации.

18.

Действие на вредные организмы
• Препараты на основе Salmonella enteritidis, var.
Issatschenko, 29/1 строго избирательны.
Зараженное зерно, попадая в организм
грызуна, вызывает развитие желудочнокишечного заболевания. На 3-14 сутки зверьки
погибают.
• Родентициды на основе штамма бактерий
обеспечивают в популяции контактное
перезаражение мышей (может происходить
даже между разными видами).

19.

• Бактерии, попадая в желудок, затем в кишечник,
проникают в кровь, вызывая септицемию.
Временное повышение активности грызунов
(сильно спадающая на 3-5-е сутки)
свидетельствует о начале брюшнотифозной
инфекции. У зверьков начинают слезиться глаза,
шерсть становится взъерошенной, появляются
вялость и плохой аппетит. Заболевание, как
правило, продолжается до 1-ой недели.
• Препарат не токсичен для теплокровных
животных.
• Родентициды на основе бактерий Исаченко не
опасны для человека, в связи с строго
селективной патогенностью.

20.

Бактериальные фунгициды
• Бактерии из рода Pseudomonas активны в
подавлении развития возбудителей корневых
гнилей и увядания растений. Бактерия
Pseudomonas fluorescens продуцирует
антибиотик пирролнитрин, активный против
возбудителя болезни всходов хлопчатника.
• Другие бактерии-антагонисты эффективны
против фузариозной гнили кукурузы,
ризоктониоза пшеницы, овса и ячменя, гнили
корней моркови и других болезней.[3]

21.

• Штамм ризосферных бактерий Bacillus subtilis Ч13 является иммунизирующим и лечащим
фунгицидом. Образует вещества, подавляющие
развитие фитопатогенов и стимулирующие рост
растений. При поселении на корнях растений,
Bacillus subtilis Ч-13, повышает их иммунитет и
стрессоустойчивость.
• Биоинсектициды на основе грибов
• Наибольшее распространение получили
препараты на основе гриба Streptomyces
avermitilis, именуемые Авермектинами
• В авермектинах действует не сам гриб
Streptomyces avermitilis, а продукты его
жизнедеятельности.

22.

• Также распространенным энтомопатогенным грибом
является Metarhizium anisopliae Р-72. Он способен
контролировать сотни видов насекомых из различных
отрядов.
• Авермектины,обладая контактным и системным
действием, имеют сильно выраженные акарицидные
свойства, вызывая гибель многих открыто живущих
сосущих вредителей.
• Действующие вещества приводят к торможению и
блокированию передачи нервного импульса, что
приводит к параличу, а затем и гибели многих видов
клещей, насекомых и нематод.
• Максимальное преобладание в популяциях вредителей
наиболее уязвимых стадий (гусеницы младших
возрастов, подвижные стадии клещей) является
оптимальным сроком применения авермектинов.

23.

• Инсектоакарициды Аверсектин С и АвертинN имеют и нематицидный эффект. Не уничтожая
инвазионных личинок нематод , эти вещества в
течение длительного времени дезориентируют
их в поисках корней растения-хозяина.
• Авермектины проявляют наибольшую
биологическую активность при повышенной
температуре 28-30 °С и резко снижают
эффективность при температуре ниже 18 °С.
• Штамм гриба Metarhizium anisopliae Р-72
вызывает у насекомых токсикоз, следствием
которого являются повреждения различных
систем организма.

24.

• Биофунгициды на основе грибов
• Грибы рода Trichoderma наиболее изучены в
качестве антагонистов.
• Эти грибы широко распространены в почве, они
продуцируют активные антибиотики –
глиотоксин, виридин, триходермин и другие,
которые обладают антибактериальными и
антигрибными свойствами.