Презентация на защиту

1. Исследование ингаляционной фармакокинетики левофлоксацина на лабораторных мышах

Институт химической кинетики и горения
им. В.В. Воеводского СО РАН
Исследование ингаляционной
фармакокинетики левофлоксацина на
лабораторных мышах
ФГБОУ ВО «Новосибирский
государственный педагогический
университет»
Работу выполнил: студент группы
5.005.2.23, НГПУ, ИЕСЭН
Бычков Максим Александрович
Научный руководитель: к.х.н, доцент,
доцент кафедры химии,
Валиулин Сергей Владимирович

2.

Актуальность работы
побочное действие на ЖКТ;
ингаляционная
доставка
создает
повышенную
локальную концентрацию в
очаге заболевания;
фармакокинетика
ингаляционной
доставки
левофлоксацина
изучена
недостаточно.
Левофлоксацин
Слайд 2

3.

Цель: исследование фармакокинетических параметров левофлоксацина при
ингаляции его аэрозольных частиц лабораторным мышам
Задачи:
1) разработать методику генерации аэрозольных частиц левофлоксацина с
оптимальным размером и концентрацией для ингаляционной доставки;
2) провести качественный и количественный анализ левофлоксацина методом
ВЭЖХ в биологическом материале;
3) определить
фармакокинетические
ингаляционной доставке мышам.
параметры
левофлоксацина
при
Слайд 3

4.

Методика эксперимента: генерация аэрозоля
Слайд 4

5.

Ультразвуковая генерация аэрозоля
микропузырьки
рост пузыря
Захлопывание пузыря
Слайд 5

6.

Способ обнаружения аэрозоля и устройство для
измерения размера частиц и концентрации
Оптический спектрометр аэрозоля (ОСА)
Эффект Тиндаля в газовом
коллоидной растворе
Слайд 6

7.

Ингаляционная камера для
мышей
Ингаляционная камера типа “Nose Only”
Слайд 7

8.

Пробоподготовка
Мышь
кровь
лёгкие
Центрифугирование
Гомогенизация
Осаждение белков
хлорной кислотой
(1:5)
Центрифугирование
Заморозка/оттаивание
Осаждение белков
хлорной кислотой
(1:5)
Сыворотка крови
Заморозка/оттаивание
Гомогенат лёгких
Анализ ВЭЖХ
Слайд 8

9.

Спектрофотометрический анализ
1,0
0,35
0,9
0,8
Abs, е.о.п.
0,7
Abs
0,30
0,6
0,5
0,4
0,3
0,25
0,2
0,1
0,0
0,20
320
330
340
λ, нм
Зеленый цвет - в HClO4,
Коричневый цвет - в H2O (бидист),
Фиолетовый цвет - CF3COOH
350
200
250
300
350
400
450
, нм
«Левофлоксацин в H₂O (бидист)»
Слайд 9

10.

Оценка стабильности левофлоксацина на спектрофотометре
0h
4.5h
Спад Оптической плотности с 0,2390 до 0,2380 за 4,5 часа
0,2392
0,8
0,7
0,2388
0,6
0,2386
0,5
Abs
0,2390
Abs, е.о.п.
0,2384
0,4
0,3
0,2382
0,2
0,2380
0,1
0,2378
0,0
0,2376
240
270
300
330
360
390
, нм
0,2374
0,2372
0,2370
0,2368
329,6
329,8
330,0
330,2
Длина волны, нм
330,4
330,6
330,8
Слайд 10

11.

ВЭЖХ анализ
VWD1 A, Wavelenght=330 nm (Levofloxacin)
Отклик детектора, е.о.п.
3.0
2.5
2.0
1.5
1.0
0.5
0.0
-0.5
0
1
2
3
4
Время, мин.
“Левофлоксацин, стандарт 1 мкг/мл в HClO4, объем
инжекции 10 мкл”
Слайд 11

12.

Хроматограммы в биологическом материале
Интанктные легкие
Легкие с добавкой левофлоксацина
С добавкой левофлоксацина
Интанктная сыворотка
7
Отклик детектора, е.о.п.
8
6
5
6
4
4
3
2
2
1
0
0
0
2
4
Время, мин.
Сыворотка крови
6
0
1
2
3
4
5
Время, мин.
Гомогенат лёгких
Слайд 12

13.

700
y=11,836x-0,2929
60
HClO4
y=15,198x-0,6409
600
Площадь пика (е.о.п.)
50
Площадь пика (е.о.п.)
Сыворотка
крови
0,999
R^2
0,999
R^2
40
30
20
500
400
300
200
100
10
0
0
0
1
2
3
4
5
0
10
Концентрация мкг/мл
40
1
80
100
гомогенат
лёгких
y=14,403x-0,2694
y=17,92x+0,0541
70
80
60
Площадь пика, е.о.п.
Площадь пика (е.о.п.)
H2O
(бидист)
30
Концентрация мкг/мл
R^2
0,999
R^2
20
60
40
50
40
30
20
20
10
0
0
0
1
2
3
Концентрация мкг/мл
4
5
0
1
2
3
Концентрация, мкг/мл
4
5
Слайд 13

14.

Расчет дозировки при ингаляции