Гибридизация соматических клнток

1.

Тема:
Гибридизация соматических
клеток: Метод, изменивший
генетику
Студент 3 курса 1 группы
Цих Никита Сергеевич

2.

Что такое гибридизация соматических клеток?
Искусственное слияние соматических (неполовых) клеток. Образование
гибрида с объединенным генетическим материалом. Возможность
межвидовой гибридизации (человек + мышь).
Цель: изучение функционирования генома.
Клетка А + Клетка В → Гибридная клетка АВ
Если просто, это технология «клеточного скрещивания». Мы берем две клетки, заставляем их
слиться и получаем одну новую, в которой есть гены и от первого, и от второго «родителя»

3.

Историческая справка
Как это открыли?
Ключевой прорыв:
использование
инактивированного вируса
Сендай для слияния.
1960 г. – Жорж Барски:
первые наблюдения.
1960-е – Генри Харрис,
Джон Литтлфилд:
активное развитие.
Метод не возник на пустом месте. Его становление – это работа многих ученых, но
именно использование вируса как «молекулярного клея» стало переломным
моментом

4.

Как это работает?
Этап 1: Слияние клеток
Фьюзогенные агенты («агенты слияния»):**
Инактивированный вирус Сендай (исторически).
Полиэтиленгликоль (ПЭГ) – химический метод.
Электрослияние – современный физический
Представьте, что мы хотим склеить два мыльных
пузыря. Для этого нужен специальный клей. В нашем
случае его роль играют эти агенты, которые
«растворяют» границы между клетками".

5.

Как это работает?
Этап 2: Селекция гибридов
Проблема: в смеси есть исходные и гибридные
клетки.
* Решение: **Система HAT-селекции**.
* Принцип: Используются клетки-мутанты
(например, без фермента ТК).
* В среде HAT выживают только гибриды,
получившие недостающий ген от второй клетки.
Мышиные клетки (TK⁻) + Человеческие клетки (TK⁺) → Слияние → Посев в среду HAT
→ Мышиные клетки погибают, человеческие стареют → Выживают только ГИБРИДЫ`
Это гениальная уловка. Мы создаем такие условия, где выживает только тот, кто прошел «брак»
— то есть гибридная клетка. Все остальные просто погибают".

6.

Главное применение: Картирование генов
В гибридных клетках хромосомы человека
случайно теряются.
* Создается панель клонов с разными наборами
хромосом
Если ген есть только когда присутствует
определенная хромосома → ген картирован на эту
хромосому!
Это похоже на детективную работу. Мы смотрим: в каких клонах есть наш ген, а в каких
нет, и ищем общую хромосому. Это и есть место преступления — адрес гена в геноме

7.

Другие важные применения
Изучение рака: Открытие генов-супрессоров опухолей.
* Генетические болезни: Локализация генов, ответственных за заболевания.
* Регуляция генов: Почему в гибриде «молчат» гены одного из видов?
* Биотехнология: Создание гибридом для производства моноклональных антител.
Универсальность метода поражает. От
фундаментальных вопросов «как работает ген?» до
прикладных — «как создать лекарство?»".

8.

Преимущества и недостатки
Плюсы и Минусы
Преимущества:
* Высокая разрешающая способность.
* Не требует знания функции гена.
* Работа с любыми генами.
Недостатки:
* Долго и трудоемко.
* Случайная утрата хромосом.
* Вытеснено молекулярными методами
(NGS).
Как и любой инструмент, метод неидеален. Он был революционным для
своего времени, но сегодня там, где нужно быстро и точно, его заменяют
методы секвенирования".

9.

Спасибо за внимание!