Микробиология. Задание №5

1.

4.1. В одной из московских гостиниц заболел турист, накануне
прилетевший из Индии. У больного повысилась температура, появились
рвота, боли в животе, частый жидкий стул. Больной госпитализирован с
подозрением на холеру. Для проведения противоэпидемических
мероприятий необходимо срочно подтвердить диагноз
микробиологически. Как провести экспресс-диагностику заболевания?
На рисунке представлен РИФ. Исследуемый материал-рвота, жидкий
стул. Методы экспресс диагностики:
1-макроагглютинация:
-после подращивания на пептонной воде (среда обогащения). Время
ожидания 4 часа.
-иммобилизация(теряется подвижность) вибрионов после добавления
сыворотки. Сыворотка к О антигенам(о1 о139) время несколько
минут.
Реакция иммунофлюоресценции (то что на рисунке)- суть: готовят
мазок из АГ и добавляют сыворотку больного если есть антитела то
образуется комплекс антиген-антитело, далее добавляют
люминесцентную сыворотку меченный флюорохромом. Далее помещают
в люминесцентный микроскоп. Время 2 часа

2.

4.2 Больной Н., 20 лет, поступил в инфекционное отделение с жалобами
на головную боль, повышенную температуру, частый стул с
прожилками крови, тенезмы. Врач поставил диагноз "дизентерия".
Какие возбудители могут быть причиной бактериальной дизентерии?
Какие правила необходимо соблюдать, забирая материал для
исследования? Какие среды нужно использовать для выделения
чистой культуры возбудителя?
На рисунке РПГА с О сывороточными антителами к Шигеллам
Возбудители дизентерии являются шигеллы.
Основные правила при диагностике: 1-правильное взятие
испражнений, с помощью ректальных трубок затем помещая в посуду
ошпаренной кипятком, так как нельзя обрабатывать без растворами
– у данных микробов есть чувствительность. 2-забор производится
натощак. 3-посев производится одновременно селективную и среды
обогащения 4- после инкубирования посев на лактоза содержащие
среды
Основной метод – бактериологический и идентификация реакцией
агглютинации. Первый этап: выделение чистой культуры – сначала
посев на среду Плоскирева инкубация 37 °C на 24ч далее рост
бесцветных лактозонегативных или окрашенных лактозоположительных
колоний- пересев лак- на среду Ресселя. Инкубация и получение
чистой культуры. Второй этап идентификация с помощью
биохимических свойств, антигенных структур(РА- использование
поливалентной о-аг для определение родовой принадлежности,

3.

4.3. В инфекционное отделение поступил больной в тяжелом
состоянии: сознание спутано, температура 40С, сильная головная
боль. На коже туловища и живота - единичные мелкие розовые
пятна (розеолы). Врач поставил клинический диагноз: "брюшной
тиф". Какие микробиологические исследования нужно провести,
чтобы подтвердить диагноз?
На фото - Реакция агглютинации (развернутая по Видалю) для подтверждения диагноза брюшного
тифа и паратифов А и В.
Возбудитель тифозно– паратифозной инфекции: Salmonella typhi, S. paratyphi A и В.
Изучаемый материал копокультура, рвотные массы, пищевые продукты.
Основной метод – бактериологический (первый этап получения чистый
культуры: на среде накопления Рапорта производим посев- инкубация- мне
среды и изменения индикатора с образованием газов- пересев на среды Эндо
Пласкирева и Левина- получение лак- бесцветных колоний пересев на
лактозной среду(ср Расселя)- инкубация – чистая культура. Второй этап и
идентификация – реакция развёрнутой агглютинации(по Видалю)-используем
сыворотку больного и полученную чистую культуру (необходимо найти
определённое АТ к антигену) определяем титр антител (минимальная
концентрация Ат при котором мы видим агглютинацию)

4.

4.4. Больному, поступившему в терапевтическое отделение по поводу
обострения хронического колита, на 14-й день болезни был поставлен
клинический диагноз "дизентерия". Какие микробиологические исследования
нужно провести для подтверждения диагноза?
На фото - Лак- колонии Shigella spp. и лак+ E.coli на среде
Плоскирева.
Возбудители дизентерии являются шигеллы.
Основные правила при диагностике: 1-правильное взятие
испражнений, с помощью ректальных трубок затем помещая в посуду
ошпаренной кипятком, так как нельзя обрабатывать без растворами
– у данных микробов есть чувствительность. 2-забор производится
натощак. 3-посев производится одновременно селективную и среды
обогащения 4- после инкубирования посев на лактоза содержащие
среды
Основной метод – бактериологический и идентификация реакцией
агглютинации. Первый этап: выделение чистой культуры – сначала
посев на среду Плоскирева инкубация 37 °C на 24ч далее рост
бесцветных лактозонегативных или окрашенных лактозоположительных
колоний- пересев лак- на среду Ресселя. Инкубация и получение
чистой культуры. Второй этап идентификация с помощью

5.

4.5. У детей младшей группы детского сада несколько часов после
завтрака появились боли в животе, тошнота, рвота, диарея. Установлено,
что на завтрак дети ели творог. Врачи поставили клинический диагноз
"пищевая токсикоинфекция". Какие микробы могут быть возбудителями
данной токсикоинфекции? Какие микробиологические методы позволят
поставить диагноз? Какой материал следует взять у больных?
На фото - Лак+ колонии энтеротоксигенной E.coli на среде Эндо.
Возбудителями пищевых токсикоинфекций являются различные условнопатогенные бактерии – Escherichia coli, Clostridium perfringens, Bacillus cereus,
некоторые виды протея, клебсиелл, вибрионов, энтерококков и др.; к
возбудителям интоксикаций относятся Clostridium botulinum, стафилококки,
некоторые грибы
Материалом для исследования является рвота промывные воды желудка,
испражнения, кровь слизь.
Основной метод бактериологический с РА на стекле: посев на среду эндо или
левина- инкубация- макроскопическая характеристика: лак + колонии на среде
эндо- крупные и красные, на среде Левина- тёмно-синие. Также могут
образоваться лак – колонии- отбор лак + и пересев на скошенный агар- инкубацияидентификация по биохимическим свойствам(ГЛЮ ЛАК цвет меняется и
выделяется индол) по антигенным свойствам РА на стекле.

6.

4.6. Больному ребенку был поставлен диагноз "ангина". Материал из
носоглотки был направлен в бактериологическую лабораторию. При
посеве на среде Клауберга появился рост мелких черных блестящих
колоний. Какие микробы могут дать такой рост? Какой метод следует
использовать для окрашивания выделенного возбудителя?
На фото - Коринебактерии дифтерии. Окраска по Нейссеру.
(бактериоскопия)
Ангина вызывает корникобактерии дифтерии. Окрашивается по Нейссеру(синька 2-3
мин- люголь 10 – 30 сек- промывка водой – везувин 1 мин) тело бактерии
окрашивается бледным цветом. Зерна волютина- чернеет.
Также может производиться посев на питательную среду содержащую телуриат калияпроисходит восстановление металлического теллура и бактерии окрашивается в
чёрный цвет
Характеристика дифтерии: грамм +, неподвижные, не спорообразующие бактерии
булововидной формы. Биохимические свойства цистиназа и уреаза + (положительные)
Основной метод диагностики является преципитация на агаре (исследуем дифтерийный
токсин)

7.

4.7. При осмотре зева больного ребенка были обнаружены грязно-белые пленки
на миндалинах, переходящие на дужки миндалин. Врач заподозрил дифтерию, и
ребенок был госпитализирован. Какие микробиологические исследования
необходимо провести для подтверждения диагноза? Как идентифицировать
возбудителя? Какие препараты следует использовать для этиотропного лечения?
Какие исследования необходимо провести перед выпиской выздоровевшего
ребенка из больницы?
На фото - Положительная проба Пизу (цистиназа+) для дифференциации
коринебактерий дифтерии от дифтероидов
Для бактериологического исследования берут налёт из зева, с миндалин, фибринозные пленки,
носоглоточная слизь, экссудат при кожной форме. Затем высевают на какую-нибудь среду: кровянотеллуритовый агар или среду Клауберга II, на которых смотрят разные биовары(Gravis mitis intermedius).
1. Метод преципитации в агаре(на агар помещается пропитанная сывороткой бумага на расстоянии от
бумаги на 0,5см делается посев АГ в виде бляшки, одна из них контрольная)- если образуется белая
полоска- призошло связывание ат с аг.
2. Проба Пизу (на фото): определяем фермент цистиназу- в столбик питательного агарас цистином уколом
добавляем культуру- если обр черная тучка- это дифтерия
3. Проба Закса- для определении уреазы- раствор мочевины ифенолового красного смешиваем 1:9разливаем по пробирка методам двойного разведения и добавляем Аг – если произошло расщепление
мочевины – раствор краснеет
вакцинопрофилактика - дифтерийный анатоксин; для лечения - антитоксическая противодифтерийная
сыворотка
Перед выпиской необходимо получение двукратного отрицательного результата бактериологического
обследования, проведенного с интервалом в 1-2 дня и не ранее, чем через 3 дня после отмены

8.

4.8. При обследовании детей ясельной группы, имевших контакт с
больным дифтерией, выявлены носители коринеформных
бактерий (в мазке с небных дужек и миндалин). На какие
морфологические и тинкториальные особенности микробов
следует обратить внимание? Какой метод микробиологической
диагностики является основным и как определить биовар и
токсигенность возбудителя? Назовите тесты, на основании
которых можно дифференцировать возбудителей дифтерии и
представителей резидентной флоры.
На фото - Проба на токсигенность дифтерийной палочки - реакция
преципитации в агаре. (на агар помещается пропитанная сывороткой бумага на расстоянии от бумаги на
0,5см делается посев АГ в виде бляшки, одна из них контрольная)- если образуется белая полоскапризошло связывание ат с аг.
Характеристика дифтерии: грамм +, неподвижные, не спорообразующие бактерии
булововидной формы. Биохимические свойства цистиназа и уреаза + (положительные)
Биовары- Gravis(крупные, сухие, плоские, серо-чёрные колонии имеют неровные края и радиальные
исчерченности) mitis(мелкие гладкие блестящие чёрные колонии ровными краями) intermedius(мелкие
сухие серо-чёрные колонии с прозрачной периферии и неровными краями)
1. Проба Пизу - определяем фермент цистиназу- в столбик питательного агарас цистином уколом
добавляем культуру- если обр черная тучка- это дифтерия
2. Проба Закса- для определении уреазы- раствор мочевины ифенолового красного смешиваем 1:9разливаем по пробирка методам двойного разведения и добавляем Аг – если произошло
расщепление мочевины – раствор краснеет

9.

4.9. При лабораторном исследовании мокроты больного в
микропрепарате, приготовленном по методу Прайса и окрашенном по
Цилю-Нильсену, обнаружены тонкие, длинные, слегка изогнутые красные
палочки, располагающиеся в виде жгутов ("кос"). Назовите
преполагаемого возбудителя. В чем сущность метода Прайса? Какой
фактор вызвал образование микроколоний в виде жгутов ("кос")?
1. Микобактерии туберкулёза
2. Метод Прайса- на предметном стекле на носим толстый мазок далее высушиваем.
Обрабатываем серной кислотой несколько минут- опускаем во флаконы с разведённой
гемолизрованной цитратной кровью. Помещаем в термостат на несколько суток(7-14)
далее окрашиваем по Цилью- Нельсону(вирулентные штаммы- содержащие корд фактор
образуют микроколонии жгутов кос)
3. Корд-фактор гликолипид на поверхности микобактерии является фактором
антигенности, так как прикрепляется к клетке нарушается метохондрипльное дыхание

10.

4.10. При медицинском обследовании учащихся 1-го класса поставлена
проба Манту. С какой целью была поставлена проба Манту? Какие
препараты используются для ее постановки? Как и когда оценить
результаты пробы Манту? Объясните механизмы, лежащие в основе
реакции манту.
Показания к проведению пробы Манту:
Своевременная диагностика туберкулеза и
инфицированности у детей и подростков
Отбор контингента для ревакцинации ВСG
3 вида реакций:
Дифференциальная диагностика туберкулеза со
1. Местная - в месте введения(гиперемия и папула)
сходными заболеваниями
2. Общая реакция- ухудшение самочувствия,
Изучение уровня инфицированности населения
недомоганием, повышением температуры и тд.
Для проведения пробы Манту нужен туберкулин
3. Очаговая реакция
Реакция на туберкулин протекает по типу местной
Отрицательная - на месте введения туберкулина
кожной ГЗТ(При встрече с микобактериями
только уколочная реакция
(инфицирование или вакцинация БЦЖ) организм
Сомнительная - только гиперемия или папула
отвечает определенной иммунологической реакцией и
диаметром от 2 до 4 мм
становится чувствительным к последующему
Положительная - папула диаметром 5 мм и более
введению антигенов из микобактерий, т.е.
сенсибилизированным к ним. Эта чувствительность,
которая носит замедленный характер, т.е.
специфическая реакция проявляется спустя
определенное время (24-72 ч))

11.

4.11. При массовой гибели сусликов в отпечатках
из органов сусликов обнаружены интенсивно
окрашенные грамотрицательные палочки
овоидной формы с биополярной окраской. Какой
метод можно применить для быстрой
идентификации возбудителя?
4.14. На противочумную станцию доставлен
мумифицированный труп крысы. Какой метод
диагностики следует использовать при
подозрении на чуму?
4.15. У больного, прибывшего из эндемического по
чуме очага - пневмония. Какой материал взять на
исследование, предполагаемые возбудители и
методы экспресс диагностики?
Возбудитель - Yersinia pestis.
Материал на исследование - пунктат бубона, мокроту,
отделяемое карбункулов и язв, кровь, мочу, рвотные
массы, трупный материал.
Экспресс-диагностика - РИФ(уже через 2 ч)
микроскопический по Граму - биполярная окраска
овоидных палочек.

12.

4.12. У больного карбункул на руке, при бактериологическом исследовании
установлено:
Морфология возбудителя - крупные грамположительные палочки,
расположенные цепочкой; наличие центрально расположенных спор и
капсул. Рост на агаре - крупные плоские колонии с зернистой поверхностью
и бахромчатыми краями. Дать заключение.
Сибирская язва - bacillus anthracis. Для диагностики используют: содержимое
везикул, пустул, отделяемое карбункул и язв, тканевый выпот, кровь, мокроту,
фекалии, шерсть/кожа/мех животных.
крупные грамположительные палочки, расположенные цепочкой; наличие
центрально расположенных спор и капсул
4.13. Из трупа погибшей овцы выделена культура грамположительных
спорообразующих палочек, расположенных цепочками. Предполагаемый
диагноз? Какие тесты нужно выполнить? Какие мероприятия провести в очаге
инфекции?
реакция термопреципитации по Асколи (определение антигена- Для приготовления
экстракта материал заливают физиологическим раствором, кипятят 10–45 минут и
фильтруют. Преципитирующей сыворотки используется 0,2–0,3 м) и Кожно-аллергическую пробу с
антраксином
В очаге проводят дезинфекцию. Трупы людей, умерших от сибирской язвы, когда диагноз подтвержден
лабораторно, вскрытию не подвергаются. Захоронение проводят в пластиковых пакетах Вскрытие проводят в
случаях крайней необходимости с обязательной дезинфекцией помещения, всех предметов, инструментария,
халатов, перчаток, обуви При захоронении трупа, подвергшегося вскрытию, под целлофановую пленку на дно
гроба насыпают сухую хлорную известь• Захоронение проводят на обычных кладбищах.

13.

4.16. Мужчина, 35 лет, с признаками конъюктива обратился к окулисту.
При микроскопическом исследовании соскоба с конъюктивы в
эпителиальных клетках, окрашенных по Романовскому, обнаружены
цитоплазмические включения фиолетового цвета с оранжевым центром.
Какое заболевание должен заподозрить врач? Почему? Какова природа
обнаруженных включений? Какие еще исследования необходимо
провести для подтверждения диагноза?
Острый хламидийный конъюктивит - трахома. Они именно так окрашиваются по
Романовскому-Гимзе+ есть биовар трахома у Chlamiydia trachomatis, который
вызывает инфекционный конъюктивит. При окраске на разных стадиях развития
способность воспринимать окраску у хламидий меняется:
- “Элементарные тельца” (инфекционные частицы) окрашиваются краской Гимза
в пурпурный цвет.
- “Ретикулярные тельца” (неинфекционные частицы) окрашиваются по Гимза в
синий цвет.
+ еще можно провести: биологический метод - заражаем культуру клеток или
куриный эмбрион; РИФ/ИФА

14.

4.17. В инфекционную больницу поступил больной, 75 лет, с
предварительным диагнозом "сыпной тиф". При осмотре обнаружена
сыпь. Педикулеза нет. Из анамнеза известно, что в 40-е годы больной
перенес сыпной тиф. О каком заболевании можно думать в данном
случае? Какие методы микробиологической диагностики необходимо
применить для подтверждения или исключения этого заболевания? Как с
помощью этих методов провести дифференциальную диагностику с
другими риккетсиозами?
болезнь Бриля (рецидив эпидемического сыпного
тифа).
1- Для подтверждения диагноза врачи могут провести иммунофлуоресцентный анализ, для которого
используется образец сыпи(биопсия). Или же они могут использовать метод полимеразной цепной
реакции (ПЦР) для быстрого обнаружения бактерий. (Дифференциальная диагностика сыпного тифа
от болезни Брилла основана на феномене иммунологической памяти: при сыпном тифе происходит
формирование сначала Ig M, а затем Ig G при болезни Брилла - сразу Ig G)
3. ИФА, который используют для идентификации возбудителя, определения его антигенов и
специфических антител. (Возбудителем заболевания является грамотрицательная риккетсия
Провачека. Она характеризуется неподвижностью, не образует споры и капсулы, может внедряться в
эндотелиальные клетки сосудов, храниться годы при низких температурах.)

15.

4.18. Врач-дерматовенеролог поставил больному
диагноз "сифилис, первичная стадия". Какими
лабораторными методами можно подтвердить
диагноз?
микроскопические методы — темнопольная и фазово-контрастная
микроскопия. Также возможно приготовление гистологических
препаратов, серебром по Морозову (трепонемы выглядят как чёрные спирали). Реакция
Вассермана.
Традиционные осадочные реакции преципитации
РИФ И ПЦР ТОЧНЫЕ РЕАКЦИИ
4.19. При темнопольной микроскопии мазка из
отделяемого твёрдого шанкра обнаружены
подвижные спиралевидные клетки с 8-12
равномерными завитками. Какой диагноз может
быть поставлен? Какие тесты можно еще сделать
для подтверждения диагноза?
Сифилис - treponema pallidum

16.

4.20. После купания в загрязнённом водоёме,
спустя неделю, у больного поднялась
температура, развилась желтуха. Какой диагноз
можно поставить и как его подтвердить
лабораторными методами?
Это лептоспирозный или вирусный гепатит - Leptospira
interrogans.
ИФА РСК, реакция микроагглютинации. Для
исследования берут парные сыворотки (первая до 5–7го дня болезни, вторая — через 7–10 дней).
Положительными считаются титры 1:10–1:20 и выше
Можно обнаружить лептоспиры в биоптатах
икроножных мышц (окраска методом серебрения).

17.

4.21. При поступлении на работу в пищеблок
необходимо пройти обследование в кожновенерологическом диспансере. Какими методами
проводится экспресс-диагностика?
РПГА
ИФА-быстрое выявление антител к сифилису в крови, результат за
15–30 минут.
Иммунохроматографический анализ крови или слюны, результат за
10–20 минут.
ПЦР (экспресс-вариант)- обнаружение ДНК/РНК возбудителей
(гонорея, хламидиоз) в мазках, результат за 1–2 часа.
Микроскопия мазков-быстрый анализ выделений для выявления
трихомониаза или гонореи, результат за 10–20 минут.
Иммунохроматографические тесты- полоски для выявления антител
или антигенов (например, сифилис, хламидиоз), результат за 5–
15 минут

18.

4.22. Через месяц после приезда из Карелии, куда
пациент ездил порыбачить в лесных озёрах, у него
началась лихорадка, миалгия и на коже шеи
появилась кольцевая эритема. Она постоянно
увеличивалась в размерах? Что это? Какими
лабораторными методами можно подтвердить
диагноз?
Это Borrelia - возбудитель эпидемического возвратного тифа и болезни Лайма.
Материалом для исследования служат биоптаты кожи, синовиальная жидкость суставов, ликвор,
сыворотка крови. Используются бактериоскопический, серологический методы и ПЦР в зависимости от
стадии заболевания.
На 1-й стадии заболевания проводится бактериологическое исследование биоптатов кожи из эритемы.
Начиная со 2-й стадии заболевания осуществляется серологическое исследование определением IgM
или нарастания титра igG ИФА или РИФ.
Реакция непрямой иммунофлюресценции с корпускулярными АГ из боррелий

19.

4.23. В ожоговый центр поступил больной с ожогами II-III степени 15%
поверхности тела. После 2-х недель пребывания в стационаре у него начался
сепсис. Посев крови больного на сахарный бульон дал придонный рост, при
микроскопии которого обнаружили короткие цепочки грамположительных
кокков. Назовите предположительно вид выделенного микроба и какие
дополнительные исследования необходимо провести, чтобы уточнить вид
выделенного
Стрептококкимикроба.
(грамположительные кокки).
Методы экспресс-диагностики. Посев на кровяной агар- определение типа
гемолиза. α-гемолиз (зеленящие): Неполный гемолиз, зеленый пигмент
(биливердин), напр., S. pneumoniae, S. viridans. β-гемолиз: Полный
гемолиз, напр., S. pyogenes. γ-гемолиз: Отсутствие гемолиза.
Тест на каталазную активность(На стекло капают перекись водорода,
добавляют материал (стафилококк/стрептококк). Положительный (шипение,
пузырьки): Стафилококк (каталаза+). Отрицательный: Стрептококк
(каталаза-).
•Тест на чувствительность к оптохину. S. pneumoniae (зона подавления
роста). Резистентность: S. viridans (рост не подавляется).
Биохимическая идентификация:
•Биохимические тесты- определение гликолитических свойств
(ферментация углеводов).
•Серологические тесты- выявление специфических антигенов.
•ПЦР- точная идентификация вида по ДНК.

20.

4.24. В инфекционную больницу поступила
молодая женщина с жалобами на профузную
диарею и неоднократную рвоту. Из анамнеза
известно, что накануне она была в гостях, где ела
торт с кремом. Что взять на исследование? Какие
методы микробиологической диагностики следует
применить?
Стафилококковая инфекция (пищевой токсикоинфекции)
Биоматериал- гной, кровь, моча, мокрота, испражнения (для пищевой
токсикоинфекции).
Бактериологический (культуральный) метод- посев на кровяной агаропределяет гемолитическую активность(β-гемолиз (полный гемолиз) характерен для S.
aureus) Посев на желточно-солевой агар- определяет лецитиназную активность. Посев
на цитратную плазму-фермент плазмокоагулазу(свертывание плазмы)
Тест на метициллинрезистентность (дисковый метод). Определяет устойчивость к
метициллину (MRSA). Зона подавления роста вокруг диска с антибиотиком указывает на
чувствительность; отсутствие зоны — на резистентность.

21.

4.25. В детское отделение инфекционной
больницы поступил ребенок с клиническим
диагнозом "менингит". Какие микроорганизмы
могут быть причиной этой болезни, какие
материалы необходимо взять у больного, какие
микробиологические методы необходимо
использовать для уточнения клинического
диагноза?
это менингококк в спинно-мозговой жидкости,
возбудитель - Neisseriameningialis (отличительный
признак - фермент оксидаза). Берем ликвор, он имеет
мутный вид из-за большого содержания лейкоцитов и
вытекает под давлением каплями; слизь из носоглотки
и кровь при подозрении на менингококцемию.
1) Экспресс-диагностика
менингококка− реакция латекс-агглютинации с
использованием ликвора;
и др. серологические методы (ИФА, РА) 2) Тест на
оксидазную
активность. 3)Бактериоскопический метод. 4) По
способности к
ферментации глюкозы и мальтозы N.meningitidis

22.

4.26. В терапевтическое отделение поступила
больная с жалобами на боли в суставах. Из
анамнеза известно, что больная страдает часто
повторяющимися ангинами. Ваш
предположительный клинический диагноз, какой
микроб может быть причиной этой болезни, и
какими свойствами это микроб обладает?
Ревматизм. Бета-гемолитический стрептококк (S. pyogenes)Орофарингеальная флора (не на коже).
Факторы патогенности. Структурные: Капсула- гиалуроновая кислота,
маскирует от иммунитета. М-белок- антифагоцитарный, адгезия,
типоспецифичность, суперантиген.
М-подобные белки- связывают иммуноглобулины.
• F-белок- адгезия к эпителию.
•Ферменты агрессии:
• Стрептокиназа- растворяет фибрин.
• С5а-пептидаза- расщепляет компонент комплемента, снижает хемотаксис
фагоцитов.
• ДНК-аза- разрушает ДНК.
•Экзотоксины:
• Эритрогенины- пирогенная активность, вызывает сыпь.
• Стрептолизин S- гемолиз в присутствии кислорода.
• Стрептолизин О- гемолиз в анаэробных условиях, лизис лейкоцитов.
• Цитотоксины- пептиды, повреждают почечную ткань.
Диагностика (культуральный метод). Посев на кровяной агар- колонии

23.

4.27. В родильном доме последние 4 месяца участились случаи гнойновоспалительных осложнений после родов. Районная СЭС провела
микробиологическое обследование стационара: были сделаны смывы с
предметов больничной обстановки, сделаны посевы от больных и от персонала.
От 3-х больных и от кастелянши роддома был высеян стафилококк. Задание:
определить вид стафилококка и провести внутривидовое типирование. Дайте
заключение об идентичности или отсутствии таковой у выделенных штаммов
стафилококка.
Коагулазопозитивный staphylococcus aureus - его маркером является белок А,
который можно выявить с помощью реакций преципитации и латексагглютинации. Он обеспечивает протективное действие - связывается с
фибронектином, Fc-фрагментом IgG,препятствует фагоцитозу).
У коагулазнонегативных стафилококков его нет, зато есть типоспецифический
белок В.

24.

4.28. У ребенка, посещающего детсад, повысилась температура до
38С, появилась сыпь, ангина. Педиатр поставил диагноз
"скарлатина". Как его микробиологически подтвердить и можно ли
установить наличие антитоксического иммунитета у
контактировавших детей?
На фото Стрептококк в исследуемом материале. Проба дика.
Скарлатину вызвал стрептококк бета-гемолитический
1. - Бактериологический метод производится путём посева
бактериального материала (мазок из зева/сыворотка крови/ кровь) на
кровяной агар, в результате чего наблюдается обильный рост
возбудителя, с разрушением эритроцитов около себя (зона гемолиза).
- Определение нарастания титра антител с помощью ИФА
2. Необходима проба Дика. У неболевших людей или пациентов в первые
дни после заражения реакция Дика положительна, а через две недели
после заражения и после окончания заболевания — отрицательная.
Организм переболевших скарлатиной людей формирует защитную
реакцию к данной болезни

25.

4.29. В клинику челюстно-лицевой хирургии поступил больной с флегмоной
дна полости рта, которая развилась после постановки временной пломбы на
кариозный зуб. На 4-5 сутки после лечения пациент почувствовал резкое
ухудшение состояния: поднялась температура, появились боли при еде и
глотании, инфильтрат дна ротовой полости. Стоматолог назначил
гентамицин. Какую этиологию заболевания можно предположить? Какие
методы следует применить для постановки диагноза? Как следует
скорректировать антимикробную химиотерапию?
Бактероидно-фузо-спирохетозная ассоциация(анаэробная) Возбудители- фузобактерии
продуцируют масляную кислоту и индол (гнилостный запах). Есть устойчивость к
ванкомицинам Бактероиды (Prevotella melaninogenica)анаэробы.
Пептострептококки (Peptostreptococcus)а наэробы.
Методы диагностики. Микроскопия- фузобактерии и бактероиды- по Граму
(грамотрицательные палочки). Спирохеты- Темнопольная/фазово-контрастная микроскопия.
Гистологические препараты (по Морозову/Левадити — чёрные спирали).
Бактериологический метод-гной, посев в анаэробных условиях ПЦР- выявление ДНК
анаэробов
Реакция Вассермана, осадочные реакции преципитации
Коррекция терапии отменить гентамицин (неэффективен против анаэробов). Назначитьамоксициллин или цефтриаксон (1–2 г в/в 1 раз/сут) + метронидазол.

26.

4.30. У больного с одонтогенной флегмоной челюстно-лицевой области при
операции был взят на исследование гной с резким зловонным запахом,
однако при посеве на кровяной агар роста не обнаружено. Какие правила
следовало соблюдать при заборе, транспортировке и исследовании
материала? Как следует поступить врач-бактериологу в данной ситуации?
Необходимо защитить анаэробы от молекулярного кислорода.
Питательные среды используются свежеприготовленные (в течение 2 часов, чтобы избежать
насыщения кислородом)- Китта-Тароцци (МПБ + 0,5% глюкозы + ткани + вазелиновое
масло). Анаэробный кровяной агар (на основе эритрит-агара или агара Д). +
Транспортные среды- перенос материала без размножения/гибели микробов.

27.

4.31. В клинику челюстно-лицевой хирургии доставлен больной с
одонтогенной флегмоной челюстно-лицевой области. При вскрытии
флегмоны - гной с резким зловонным запахом. Хирурги заподозрили
анаэробную этиологию заболевания. Какой материал следует взять на
исследование для микробиологического подтверждения диагноза? Какие
методы микробиологической диагностики следует применить? Как быстро
врач может получить ответ? Какие методы можно использовать для
экспресс-диагностики?
На исследование возьмем гнойное содержимое(скорее всего, там будут
преобладать бактероиды, также можно встретить пептострептококков,
фузобактерии и др.). Основной метод - бактериологический метод
(культуральный).
Врач сможет получить ответ через 5 суток, если все правила (см. пред) будут
соблюдены.
Экспресс диагностика - газовая хроматография, кассетная антибиотикограмма.

28.

4.32. В травмпункт обратились следующие пациенты:
1) родители привели ребенка 5 лет, который, играя во дворе, наступил на ржавый гвоздь и
проткнул стопу насквозь;
2) женщина, 80 лет, со скальпированной раной левой кисти, полученной при работе в саду.
Профилактику каких инфекций врач должен провести наряд у с хирургическим лечением?
Какие препараты следует использовать в каждом из случаев? Объясните тактику врача.
Столбняк (вызывается Clostridium tetani)- ржавая поверхность гвоздя и
глубокая колотая рана создают анаэробные условия, благоприятные для
столбняка.
Хирургическое лечение- промывание раны антисептиком (3% перекись водорода
или хлоргексидин). Иссечение некротизированных тканей, ревизия раны.
Ввести противостолбнячный человеческий иммуноглобулин (250-500 МЕ в/м) или
противостолбнячную сыворотку(анатоксин)
Антибактериальная профилактика- амоксициллин, цефтриаксон
Тактика: Срочная обработка раны для предотвращения размножения в
анаэробных условий.Оценка прививочного статуса и введение
противостолбнячной профилактики.Назначение антибиотиков для предотвращения
гнойной инфекции.Наблюдение.

29.

4.33. В травмпункт обратился мужчина, 20 лет, который получил травму на
строительстве дома. У рабочего при осмотре выявлено: перелом бедра,
размозжение мягких тканей бедра, травматический шок и алкогольное
опьянение. Из анамнеза известно, что пациент полгода демобилизован из
вооруженных сил. Профилактику каких инфекций врач травмпункта обязан
провести вместе с хирургическим лечением? Какие препараты нужно
использовать?
Столбняк (Clostridium tetani) Газовая гангрена (Clostridium
perfringens)- размозжение тканей и анаэробные условия повышают
риск заражения - применить поливалентную антитоксическую сыворотку.
Тщательная обработка ран, удаление поврежденных тканей и применение
противомикробных препаратов.

30.

4.34. К участковому терапевту обратился пациент К. с жалобами на диплопию
и нарушение глотания. Из анамнеза известно, что больной четверо суток
назад употреблял в пищу мясные консервы из бомбажной банки. О каком
заболевании может идти речь? Какие лабораторные исследования
необходимо провести для подтверждения клинического диагноза?
Ботулизм - clostridium botulinum. Для подтверждения диагноза проводят
опредление токсина в сыворотке, желудочном содержимом, рвотных массах,
промывных водах желудка, экстрактах из пищевых продуктов. Для этой цели
проводят биологический метод диагностики реакции нейтрализации экзотоксина
антитоксином типоспецифической сыворотки на белых мышах - им вводят
материал и смесь материала с сыворотками. По гибели животных
устанавливают наличие токсина и его тип. Для обнаружения в сыворотке крови
используют РПГА с антительным эритроцитарным диагностикумом.
Хар-ка: гр + палочка с заостренным концом , образует субтерминальные споры
является строгим анаэробом. На агаре чаще есть зона гемолиза выделяет
нейротоксин и гемолизин(экзотоксины)

31.

4.35. Среди учащихся 1-3 классов средней школы населенного пункта С.
появились случаи заболевания желтухой. При обследовании очага инфекции
установлено, что за 15-45 дней до появления признаков болезни все
заболевшие дети пили воду из источника, вода которого не обеззараживалась.
Учитывая данные эпидемиологического обследования, назовите возможных
возбудителей заболевания. Какие лабораторные исследования нужно провести
для дифференциации предполагаемых возбудителей и уточнения диагноза?
Лептоспира - leptospira interrogans. Может быть еще вирус гепатита А.
Для дифференциации определяют антитела к предполагаемым возбудителям с
помощью РПГА и ИФА.
4.36. Беременной женщине, страдающей половым
герпесом, было предложено родоразрешение кесаревым
сечением. Какой вирус вызывает половой герпес? Почему
роженице предложено искусственное родоразрешение?
Семейство Herpesviridae включает Род Simplexvirus и следующие подсемейства:
1) a-herpesviruses (I и II типов(вот второй вызывает генитальный герпес, реже 1), герпесзостер);
2) b-herpesviruses;
3) g-aherpesviruses.
ВПГ-1 и ВПГ-2 передаются преимущественно контактным путем (с везикулярной
жидкостью, со слюной, половых контактах), через предметы обихода, реже — воздушнокапельным путем, через плаценту, при рождении ребенка. Поэтому мы его обезопасим и

32.

4.37. В инфекционную больницу поступил подросток, 14 лет. Клиническая
картина характеризовалась общей интоксикацией организма, симптомами
поражения печени, желтушностью склер, слизистых оболочек и кожных
покровов. Назовите гепатогенные вирусы. Какие исследования
необходимо провести для установления вида гепатотропного вируса?
Вирусы, обладающие тропностью к гепатоцитам и вызывающие гепатит,
различаются видом генома (ДНК- и РНК-содержащие) и механизмом передачи
(энтеральный и парентеральный). Группа вирусов гепатита, объединенных
парентеральной передачей, включает вирусы гепатита B, C, G, D; энтеральной —
вирусы гепатита A, E.
РПГА, ИФА, ПЦР

33.

4.38. Мужчина, 25 лет, обратился к врачу с жалобами на повышение
температуры (в течение недели), частый жидкий стул, потерю веса,
ночную потливость. Увеличились лимфатические узлы
(лимфоаденопатия). Врач заподозрил у больного ВИЧ-инфекцию
(СПИД). Каким образом можно подтвердить предварительный диагноз?
Какие препараты нужно назначить, если диагноз подтвердился?
Определение количества CD-4лимфоцитов хелперов, ИФА и РПГА с антигенами
ВИЧ, ПЦР.
Препараты: ингибиторы обратной транскриптазы, ингибиторы ВИЧ-протеазы,
ингибиторы репликации, комбинированные анти-ВИЧ препараты (комбивир),
цитокины, препараты интерферона, иммуномодуляторы и интерфероногены.
Самые
мощные напоступившего
данный моментв -отделение
первые двакардиореанимации,
+ иммуномодуляторы.
4.39. У больного,
при посеве крови
на получение гмеокультуры выделены полупрозрачные колонии с приподнятым
центром и мелко-фестончатым краем, образующие ареол буро-зеленого цвета.
Оцените визуально наличие и характер гемолиза. Предположение о виде
возбудителя и диагнозе заболевания. Какие микробиологические исследования
нужно предпринять для подтверждения вашего предположения?
это альфа-зеленящий стрептококк при септическом эндокардите. Характер
гемолиза - неполный с частичным разложением гемоглобина до биливердина.
Для подтверждения применим бактериологический метод - на разных средах,
окончательная идентификация - по биохимическим и серологическим свойствам
+ ПЦР

34.

4.40. У больного, которому два года назад удалили зуб мудрости,
наблюдаются признаки хронического воспалительного процесса в области
угла нижней челюсти с переходом на щечную, поднижнечелюстную области
и шею. Видны выходы свищевых ходов с незначительным гнойным
отделяемым. Сделайте предположение об этиологии процесса и
предполагаемом диагнозе заболевания. Какие микробиологические
исследования необходимо предпринять для подтверждения вашего
предположения? Обоснуйте тактику лечения с учетом этиологии патогенеза
заболевания.
Актиномикоз- бактерии Actinomyces (israelii, naeslundii, viscosus). Это
анаэробные (или частично анаэробные) бактерии, которые вызывают хроническую
инфекцию с гнойниками.
1.Микроскопия. Окраска по Граму- идны нитевидные формы бактерий. Окраска
фуксином (по Цилю)-булавовидные формы. Посев на специальные среды: щелочной
агар, картофельно-сывороточную, агар Сабуро. в термостат на 2 недели (в
условиях с минимумом кислорода или без него).
2.Анализ крови. Ищем антитела (преципитины, агглютинины, комплементсвязывающие).
Лечение долгое, с высокими дозами антибиотиков, даже после исчезновения
симптомов
Антибиотики- пенициллин. Тетрациклин, эритромицин, миноциклин, клиндамицин.
Иногда подойдут цефалоспорины 1-го поколения.

35.

4.41. К врачу обратился мужчина, 38 лет, с жалобами на язву, развившуюся
на коже полового члена. При пальпации - края язвы уплотнены,
практически безболезненны. Визуально гнойных выделений и налета нет.
Ваше предположение об этиологии заболевания. Какие
микробиологические исследования необходимо предпринять для
подтверждения вашего предположения? Обоснуйте тактику лечения с
учетом этиологии и патогенеза заболевания.
1. Передающаяся половым путём инфекция – Сифилис
2. микроскопические методы — темнопольная и фазово-контрастная
микроскопия. Также возможно приготовление гистологических
препаратов, импрегнированных серебром по Морозову или Левадити
(трепонемы выглядят как чёрные спирали). Реакция Вассермана.
Традиционные осадочные реакции преципитации.
3. Основными для лечения сифилиса являются антибиотики препараты
висмута (бийохинол, бисмоверол, пентабисмол).

36.

4.42. К стоматологу обратилась девочка 15 лет по поводу неприятного запаха
изо рта, болезненности и кровоточивости десен. При осмотре - шейки зубов
оголены, десневой край гиперемирован, отечен и отстает от поверхности
зуба, при зондировании - выделение гноя и крови. Часть зубов высоко
подвижна. Предположительный диагноз? Какие лабораторные исследования
необходимо провести для выявления этиологии заболевания и назначения
этиотропной терапии?
Генерализованный пародонтит. Нужно провести культуральный метод
(бактериальный) +ПЦР-диагностика. После определения возбудителей нужно
провести определение чувствительности анаэробных возбудителей к
антибактериальным препаратам.

37.

4.43. Мужчина 30 лет обратился к врачу по поводу
сливного герпеса на губах и лице. Вирусы какого
типа обычно вызывают герпес на губах? Какие
методы лабораторного исследования
целесообразно предпринять с учетом тяжести
процесса у данного пациента?
Это вирус герпеса 1 типа.
Серологический метод. Серологический метод с IgM не позволяет различить антитела к HSV1 и HSV-2 типам вирусов. Тем не менее, новый иммуноточечный гликопротеин G-специфичный
HSV-тест даёт более чем 98 % специфичность и позволяет, таким образом, различить HSV-1 и
HSV-2 типы герпеса. Некоторые зарубежные клиницисты считают, что в скором времени тест с
IgM будет вытеснен новым.
Цитологический метод. В соскобе поражённого участка эпителия, окрашенного по
Романовскому — Гимзе, обнаруживают многоядерные клетки с внутриклеточными
включениями.
Вирусологический метод. Заражают культуры клеток и выявляют цитопатологическое
действие (ЦПД) в виде гигантских многоядерных клеток с включениями, которые разрушаются.
Идентификацию осуществляют в реакции нейтрализации ЦПД, РИФ с моноклональными
антителами. На хорионаллантоисной мембране куриных эмбрионов через 2—3 суток
образуются белые бляшки.
Биологический метод. При нанесении вирусного материала на скарификацию роговицы
кролика возникает кератит, а в мозгу новорождённых мышат — энцефалит.

38.

4.44. Женщина 30 лет обратилась к врачу по поводу жжения и зуда в области
гениталий, выделений из влагалища беловатого цвета. При микроскопическом
исследовании отделяемого при окраске по Граму выявлено обилие крупных, грамположительных, полиморфных клеток округлой формы и нитевидных элементов.
Предполагаемый диагноз? Какие лабораторные исследования необходимо
предпринять для подтверждения вашего предположения и назначения
этиотропной терапии?
Кандидозный вагинит вызывает гриб Candida albicans. Для диагностики
поверхностного кандидоза в мазках (гной, выделения) под микроскопом ищут
псевдомицелий, а для подтверждения выделяют чистую культуру на хромогенном
агаре. При висцеральном кандидозе используют серологические реакции
(агглютинация и РСК) и кожную пробу с кандида-аллергеном. Биохимические
исследования (общий ипрямой билирубин, общий белок и его фракции, уровень трансаминаз - АЛТ, АСТ,
щелочная фосфатаза, тимоловая проба, мочевина, креатинин).
Лечение всех форм кандидоза проводят флюкостатом по специальным схемам, а
также применяют нистатин, леворин, амфоглюкамин, амфотерицин B, флуцитозин
или низорал
Чтобы предотвратить кандидоз, особенно вагинальный, избегайте случайных
половых связей. Нормализуйте вес, ешьте больше фруктов, овощей и
кисломолочных продуктов, но сократите сахар и рафинированные углеводы, так
как они питают грибы. Если есть чувствительность к дрожжевым или плесневым
грибам, исключите хлеб, сладкую выпечку и плесневые сыры. Носите хлопковое
бельё, так как синтетика удерживает тепло и влагу, создавая условия для
инфекции. Принимайте антибиотики только по назначению врача, предупреждая о

39.

4.45. К врачу-стоматологу обратилась женщина 60 лет с жалобами на сухость
во рту, жжение языка и слизистой оболочки полости рта. При осмотре слизистая покрыта очаговым налетом сметанообразной консистенции,
который легко снимается, обнажая эрозии. На спинке языка - признаки
атрофии сосочков и трещины. При посеве на хромогенную среду для
дифференциации рода Candida выделены округлые колонии малахитовозеленого цвета, мягкие, гладкие с характерным дрожжевым запахом.
Предполагаемый диагноз? Что ожидаете увидеть при микроскопии? Что
необходимо назначить для этиотропной терапии?
1. Кандидоз 2. Существует несколько вариантов строения C. Albicans:
гифальная и псевдомицеллярная форма. Некоторые исследователи
выделяют еще одну – дрожжеподобную, другие же объединяют эту форму
с псевдомицеллярной. 3. На протяжении последних 30 лет для лечения
кандида альбиканс (кандидозной инфекции) использовались такие
антимикотические средства, как нистатин, клотримазол, миконазол,
амфотерицин В.
На фото - Колонии Candida albicans на хромогенном аrape M1456 для
дифференциации грибов (Himedia).

40.

4.46. К врачу обратился больной с диагнозом "актиномикоз". Из анамнеза
известно , что пациент перенес несколько пластических операций в связи с
развитием рубцовых процессов и неоднократно получал лечение
антибиотиками за последние полгода. Сделан посев экссудата свищевого
хода для определения чувствительности флоры к антибиотикам по
способу дисков. При анализе антибиотикограммы у больного
актиномикозом получена следующая картина ( на фоточке чашка петри с
бежевыми дисками). Сделайте заключение. Какие лабораторные
исследования для подтверждения и этиотропная терапия?
На фото - Колонии Candida двух видов на чашке с
антибиотикограммой.
1. Реакции агглютинации.
2. Реакции преципитации.
3. Реакция связывания комплемента.
4. ИФА, в том числе и твердофазный.
К прочим видам лабораторной диагностики кандидоза
относятся
аллергопробы, ПЦР (выявление ДНК Candida albicans) и др

41.

4.47. Как провести исследование чувствительности к антибиотикам
чистой культуры, выделенной от больного пациента?
Постановка антибиотикограммы дискодиффузионным
методом с
использованием автоматического диспенсера.
Нужно провести проверку методом дисков, или
микрокассетным
методом.

42.

4.48. В каких исследуемых материалах и как можно
идентифицировать вирус гриппа?
РТГА с антителами к основным серотипам вируса гриппа.
1. Материалы для исследования при гриппе — смывы и мазки из
носоглотки, мазки-отпечатки из носовой полости и кровь.
2. Типовую принадлежность вирусов идентифицируют в РСК; подтип
гемагглютинина — в РТГА (вирусы гриппа агглютинируют эритроциты
человека и различных животных); подтип нейраминидазы — в реакции
ингибирования активности фермента. Циркулирующие AT выявляют с
помощью РТГА, РСК, РН, ИФА в парных сыворотках с интервалом 8-14
сут.

43.

Вирус гепатита В (HBV) — ДНК-содержащий вирус с вирионами, называемыми частицами
Дейна, обнаруживаемыми в сыворотке больных и носителей. Имеет сферическую форму и
суперкапсид.
•Геном полуторацепочечный: минус-цепь — полная плюс-цепь — неполная,
короче.Связан с ферментом ДНК-полимераза.
Антигены
1.HBsAg ("австралийский")- первый маркер заражения, указывает на интегративную
инфекцию (риск рака печени).
2.HBcAg (сердцевинный)- только в ядрах гепатоцитов.
3.HBeAg- маркер инфекционности, активная репликация; через 2 мес — хронизация.
4.HBxAg- связан с раком печени, мало изучен.
Диагностик- ИФА: Антигены (HBsAg, HBeAg) и антитела.ПЦР: ДНК вируса, активная
репликация.
Вакцина (Энджерикс-В)
1.Удаляют ДНК вируса. Выделяют ген HBsAg. Встраивают ген в дрожжевые