Общая микробиология

1. Общая Микробиология.

2. Организация микробиологической лабораторной службы.

3. Правила работы в микробиологической лаборатории

В микробиологической практике
используют, главным образом, чистые
культуры микроорганизмов, т. е. популяции
микроорганизмов одного вида, часто
являющихся потомством одной клетки.
При исследованиях с не
идентифицированными микроорганизмами,
при их выделении из объектов окружающей
среды и техногенных потоков, могут быть
выделены патогенные и условно
патогенные микроорганизмы.

4.

5. По внешнему виду различают кокковые (шаровидные), палочковидные и спиралевидно-извитые формы бактерий

Кокковые бактерии в зависимости от расположения отдельных
клеток относительно друг друга разделяют на группы:
1)микрококки - имеют одиночное и беспорядочное
расположение клеток;
2) диплококки - представляют сцепление двух кокков;
3) стрептококки - располагаются цепочками различной длины ;
4) тетракокки - отдельные кокки, сцепленные по четыре.
5) стафилококки -скопление кокков, напоминающие грозди
винограда;
6) сарцины - выглядят в виде пакетов или тюков, по 8-16 кокков
в каждом.

6.

1
4
2
5
3
6

7. Палочковидные

Палочковидные (цилиндрические) формы
бактерий могут быть короткие и длинные,
толстые и тонкие, прямые и изогнутые, с
наостренными, округленными или прямыми
концами. Они бывают спорообразующими
(бациллы) и неспорообразующими
(бактерии). По взаимному расположению
клеток относительно друг друга их делят па
одиночные, диплобактерии и динлобациллы,
стрептобактерии и стрептобациллы.

8. Палочковидные

9. Спиралевидно-извитые

Спиралевидно-извитые бактерии по длине, числу и
размеру витков разделяют на:
1)вибрионы - короткие слегка изогнутые бактерии,
имеющие вид запятой;
2)спириллы - более длинные бактерии с несколькими (56 крупными завитками);
3)спирохеты - тонкие длинные бактерии со многими
мелкими завитками в виде штопора.
1
2
3

10.

11. Питательные среды

ПИТАТЕЛЬНЫЙ АГАР используют для выращивания бактерий,
содержит гидролиза кильки, экстракт дрожжей, агар, хлорид натрия и
дистиллированную воду. Растворяют ингредиенты, кипятят, фильтруют,
стерилизуют (120 гр. С 20 минут). Затем разливают в стерильные
пробирки или чашки Петри. На чашке с агаром видны разнообразные
колонии микробов, выросшие в при посеве воздуха.

12.

13.

Форма колоний:
а - круглая; б - круглая с фестончатым краем; в - круглая с валиком по краям; г, д ризоидные; е - круглая с ризоидным краем; ж - амебовидная; з - нитевидная; и складчатая; к - неправильная; л - концентрическая; м - сложная

14.

КРОВЯНОЙ АГАР питательная среда для выявления
гемолитических свойств бактерий. К расплавленному остуженному
(до 45-50 гр С) питательному агару асептически добавляют 5-10%
дефибринированной крови, хорошо перемешивают и сразу же
разливают в чашки Петри. Вокруг выросших колоний отчетливо
видны прозрачные зоны гемолиза

15.

ЖЕЛТОЧНО-СОЛЕВОЙ АГАР ЧИСТОВИЧА - селективная среда,
предназначенная для культивирования стафилококков. Содержит
питательный агар, желток куриного яйца, повышенные
концентрации хлорида натрия (8-10%), которые не препятствуют
размножению стафилококков и обеспечивают элективность среды
для данных микробов. Среда позволяет дифференцировать
лецитиназопозитивные стафилококки, вокруг колоний которых
образуются зоны помутнения с перламутровым оттенком.

16.

СРЕДА ЭНДО предназначена для выделения энтеробактерий,
обнаружения эшерихий. Состоит из питательного агара, 1% лактозы и
индикатора – основного фуксина, обесцвеченного сульфитом натрия.
Свежеприготовленная среда бесцветна или имеет бледно-розовую окраску.
При росте лактозоположительных бактерий их колонии окрашиваются в
темно-красный цвет с металлическим блеском; лактозоотрицательные
кишечные палочки образуют бесцветные колонии

17. Фазы роста

Рост периодической культуры бактерий, выращиваемых на
жидкой питательной среде, подразделяют на несколько фаз:
1. лаг-фаза — период между посевом бактерий и началом
размножения. Продолжительность лаг-фазы в среднем 4—5 ч.
Бактерии при этом увеличиваются в размерах и готовятся к
делению; нарастает количество нуклеиновых кислот, белка и
других компонентов.
2. фаза логарифмического роста является периодом
интенсивного деления бактерий. Продолжительность ее около 5—
6 ч. При оптимальных условиях роста бактерии могут делиться
каждые 20—40 мин.
3. фаза стационарного роста, или максимальной концентрации
бактерий;( количество жизнеспособных клеток остается без
изменений, составляя максимальный уровень (М-концентрация)).
4. фаза гибели бактерий (характеризуюется отмиранием
бактерий в условиях истощения источников питательной среды и
накопления в ней продуктов метаболизма бактерий)

18.

19. Размножение бактерий в жидкой питательной среде

Бактерии, засеянные в определенный, не
изменяющийся объем питательной среды,
размножаясь, потребляют питательные элементы,
что приводит в дальнейшем к истощению
питательной среды и прекращению роста бактерий.
Культивирование бактерий в такой системе называют
периодическим культивированием, а культуру —
периодической. Если же условия культивирования
поддерживаются путем непрерывной подачи свежей
питательной среды и оттока такого же объема
культуральной жидкости, то такое культивирование
называется непрерывным, а культура —
непрерывной.
При выращивании бактерий на жидкой питательной
среде наблюдается придонный, диффузный или
поверхностный (в виде пленки) рост культуры.

20.

21. Стерилизация.

Стерилиза́ ция — полное освобождение какого-либо предмета от
всех видов микроорганизмов, включая бактерии и их споры,
грибы,вирионы, а также от прионного белка, находящихся на
поверхностях, оборудовании, в пищевых продуктах и лекарствах.
Тепловая стерилизация основана на чувствительности микробов
к высокой температуре. При +60оС и наличии воды происходит
денатурация белков, в том числе ферментов, вследствие чего
вегетативные формы микробов погибают.
Стерилизация сухим жаром происходит в сухожаровых шкафах,
или печах Пастера. Обеззараживание материала в нем
происходит при 160-170°C в течение 60-120 мин. Недостаток:
высокую температуру выдерживают только некоторые
стерилизуемые предметы(лабораторное стекло)

22.

а - печь Пастера; б - кипятильник Коха

23.

1 - воронка, через которую автоклав заправляют водой; 2 - предохранительный клапан; 3 манометр; 4 - крышка автоклава; 5 - водопаровая камера; 6 - кран для выпуска воздуха; 7отверстие, через которое пар поступает в стерилизационную камеру; 8 стерилизационная камера; 9 - подставка для размещения стерилизуемых материалов

24. Паровая стерилизация

Осуществляется подачей
насыщенного водяного
пара под давлением в
паровых стерилизаторах
(автоклавах).
Стерилизуют перевязочный
материал, белье, инструменты,
питательные среды, растворы,
инфекционный материал.

25. Режимы паровой стерилизации

132 °C — 2 атмосферы(2 кгс/см2) — 20
минут — основной режим. Стерилизуют все
изделия (стекло, металл, текстиль, КРОМЕ
РЕЗИНОВЫХ).
120 °C — 1,1 атмосфера(1,1 кгс/см2) — 45
минут — щадящий режим (стекло, металл,
резиновые изделия, полимерные изделия —
согласно паспорту, текстиль)
110 °C — 0,5 атмосферы(0,5 кгс/см2) — 180
мин — особо щадящий режим (нестойкие
препараты, питательные среды)

26. Дезинфекция

Дезинфекция - это обеззараживание объектов
окружающей среды с помощью химических веществ,
обладающих антимикробным действием.
Цель дезинфекции – предупредить передачу
возбудителей от инфицированного организма
неинфицированному.
Химическую дезинфекцию проводят с
помощью различных дезинфицирующих
веществ.

27. В микробиологический лаборатории используют:

1. хлорную известь (0,1 – 10% раствор);
2. хлорамин (0.5 -5% раствор), для
дезинфекции рук 0,25 – 0,5% раствор,
для дезинфекции предметов ухода за
больными при кишечных и воздушнокапельных инфекциях 1-3% раствор,
при туберкулезе – 5% раствор;
3. фенол (карболовая кислота) в виде 3 –
5% раствора для дезинфекции
помещений;
4. лизол (3 – 5% раствор);
5. биглюконат хлоргексидина (гибитан),
для дезинфекции рук 0,5% раствор, для
дезинфекции помещений 0,1% раствор;
6. дихлорид ртути (сулема) – иногда
используют для дезинфекции предмете
ухода за больными. Препарат
высокотоксичен, всасывается через
кожу.

28.

Тепловая дезинфекция включает воздействие горячей
водой и насыщенным паром: при 80°C – 10 мин; при 85°C
– 3 мин; при 90°C – 1 мин. При этом режиме погибают все
вегетативные формы бактерий и большинство вирусов.
Ультрафиолетовое облучение происходят с помощью
специальных бактерицидных ламп (настенных,
потолочных, передвижных) для обеззараживания
воздуха, различных поверхностей.

29. Утилизация отходов.

отходы подразделяются на классы в
зависимости от степени их опасности:
Класс А – Неопасные отходы;
Класс Б – Опасные отходы;
Класс В – Чрезвычайно опасные отходы;
Класс Г – Близкие по составу к промышленным;

30.

31.

32.

33. Вирусология

Вирусология — раздел микробиологии, изучающий вирусы (от латинского
слова virus — яд).
Вирусы обладают уникальными свойствами, которые позволяют выделить
их из общей массы микроорганизмов:
Наличие только одного из двух видов нуклеиновых кислот.
Отсутствие собственной белок-синтезируемых систем.
Они представляют собой генетических паразитов.
Вирусы не растут, а только репродуцируются (размножаются).
Впервые существование
вируса (как нового типа
возбудителя болезней)
доказал в 1892 году русский
учёный Д. И. Ивановский.

34. Лабораторная диагностика вирусных инфекций

Для лабораторной диагностики вирусных инфекций используются
различные методы.
Вирусологическое исследование (световая микроскопия) позволяет
обнаружить характерные вирусные включения, а электронная
микроскопия - сами вирионы, и по особенностям их строения
диагностировать соответствующую инфекцию (например,
ротавирусную).
Вирусологическое исследование
направлено на выделение вируса и
его идентификацию. Для выделения
вирусов используют заражение
лабораторных животных, куриных
эмбрионов или культуры тканей.

35. Первичную идентификацию выделенного вируса до уровня семейства можно провести с помощью:

- определения типа нуклеиновой кислоты (проба с
бромдезоксиуридоном),
- особенностей ее строения (электронная микроскопия),
- размером вириона (фильтрование через мембранные
фильтры с порами диаметром 50 и 100 нм),
- наличия суперкапсидной оболочки (проба с эфиром),
- гемагглютининов (реакция гемагглютинации),
- типа симметрии нуклеокапсида (электронная микроскопия).

36. Вирусологическое исследование

Вирусологическое исследование - это "золотой стандарт" вирусологии
и должно проводится в специализированной вирусологической
лаборатории. В настоящее время оно используется практически только в
условиях возникновения эпидемической вспышки того или иного вирусного
инфекционного заболевания.
Для диагностики вирусных инфекций широкое применение нашли методы
иммунодиагностики (серодиагностики и иммуноиндикации). Они
реализуются в самых разнообразных реакциях иммунитета:
радиоизотопный иммунный анализ (РИА),
иммуноферментный анализ (ИФА),
реакция иммунофлюоресценции (РИФ),
реакция связывания комплемента (РСК),
реакция пассивной гемагглютинации (РПГА),
реакции торможения гемагглютинации (РТГА) и другие.