Бактерии – внутриклеточные паразиты. Микоплазмы

1. БАКТЕРИИ – ВНУТРИКЛЕТОЧНЫЕ ПАРАЗИТЫ. МИКОПЛАЗМЫ

Лектор – Леванова Людмила Александровна –
заведующая кафедрой микробиологии,
иммунологии и вирусологии
ГБОУ ВПО КемГМА Минздрава России
Кемерово, 2022

2. Общая характеристика риккетсий: морфология

Грамотрицательные (в составе КС – ДПК)
Полиморфные
Неподвижные;
Химический состав: много липидов, мало
углеводов (как у сложных вирусов);
Есть бактериофаги.

3. Риккетсии: морфологические типы

тип a – коккобактерии (основной
морфологический тип)
тип b – палочковидные двузернистые (1,0-1,5
мкм)
тип c – удлинённые ( или изогнутые)
двузернистые (3-4) мкм, переходный к d
тип d – нитевидные многозернистые формы (~
мицелий из a- и b-клеток)

4. Методы изучения морфологии бактерий

Окраска по Здродовскому - красные
Окраска по Романовскому-Гимзе - синие

5. Общая характеристика риккетсий:

■облигатные внутриклеточные паразиты
■ не способны синтезировать НАД
Соотношение ДНК к РНК – 1:3,5 (как у бактерий);
Делятся бинарно;
Есть метаболизм;
Не способны к росту на питательных средах;
Их биологические свойства связаны с паразитизмом у
членистоногих (клещи, вши, блохи);
Имеют ряд особенностей в строении, размножении,
биохимических, генетических и иммунобиологических
характеристиках;

6. Риккетсии: жизненный цикл

Адсорбция риккетсий на поверхности клеточной
мембраны;
Проникновение в клетку путем эндоцитоза –
риккетсии локализуются внутри вакуоли;
Растворение стенки вакуоли и выход риккетсий в
цитоплазму клетки;

7. Риккетсии: жизненный цикл

Риккетсии
увеличиваются в размерах,
переходят из покоящейся формы в
вегетативную и многократно делятся
поперечным делением;
Размножившиеся
риккетсии
образуют
микрокологии в цитоплазме (Музоровские
клетки);
Риккетсии
превращаются в покоящиеся
формы, клетка-хозяин дегенерирует;

8. Риккетсии: жизненный цикл

■ Гибель клетки приводит к выходу риккетсий в
окружающую среду.
■ Возможен выход риккетсий из клетки путем
«почкования», при котором риккетсии приобретают
оболочку «хозяина».

9. Факторы патогенности риккетсий

Фимбрии и пили;
ЛПС клеточной стенки;
Поверхностные белки;
Фосфолипаза А2.

10. Риккетсии: эпидемиология

Природноочаговые заболевания.
Резервуар и переносчик: клещи, вши и
блохи, человек (при сыпном тифе);
Передаются трансовариально из
поколения в поколение.
Спорадические.

11. Методы культивирования риккетсий

В желточном мешке куриных эмбрионов (6-8-
дневные);
В клеточных культурах (перевиваемые и
первичные);
Пассажи на животных: белых мышах
(заражение интраназально – наиболее удобный
способ), морских свинках, кроликах.
В организме переносчиков – вшей. Позволяет
сохранить вирулентность R. prowazekii.

12. СЫПНОЙ ТИФ

Антропонозный
риккетсиоз
с
циклическим
течением,
характеризующийся
выраженной
интоксикацией организма, лихорадкой,
розеолезно-петехиальной
сыпью,
поражением кровеносных сосудов и
центральной нервной системы.
-

13. Ricketsia prowazekii: свойства

Факторы патогенности:
Адгезины
Инвазины
Токсические субстанции:

14. Ricketsia prowazekii: свойства

1. Термолабильный токсин – выделяется при
гибели риккетсий, экзотоксин белковой природы,
вступает в РН с соответствующей антитоксической
сывороткой.
Механизм действия: нарушает окислительные
процессы в цикле Кребса клеток хозяина.
2. Эндотоксин – ЛПС клеточной стенки риккетсий.
Механизм действия – обладает пирогенностью,
вызывает общую интоксикация организма, поражает
жизненно важные органы и системы.

15. Лабораторная диагностика сыпного тифа и болезни Брилля (рецидивный, спорадический, повторный сыпной тиф)

Серодиагностика: РСК, РНГА, РАР, ИФА
РСК – позволяет выявит комплементсвязывающие Ат, которые
появляются с 6-7 дня болезни (диагностический титр 1:160),
максимальных значений достигают на 12-20 день (1:640 – 1:1280);
остается положительной у переболевших в течение многих лет, что
позволяет использовать ее для ретроспективной диагностики (титр
1:80);
РНГА – позволяет определить суммарный титр Ат и их
принадлежность к разным классам Ig. При эпидемическом сыпном
тифе с 5-7 дня болезни появляются Ат класса IgМ в титре 1:1000 и
выше и достигает максимума к 15-20 дню болезни (1:12800 и
более), а с 20-30 дня начинают преобладать Ат класса IgG. При
болезни Брилля в сыворотке больных выявляются только Ат IgG в
высоких титрах (РСК 1:10240 и более, РНГА 1:64000 и более);
РАР (реакция агглютинации риккетсий) – позволяет определить
динамику инфекционного процесса. Диагностический титр 1:100.

16. Специфическая профилактика сыпного тифа

Живая
вакцина из вакцинного штамма
R.prowazekii штамма Е (Espana).
Химическая
вакцина,
содержащая
поверхностный
термостабильный
антиген
R.prowazekii.
Живая
комбинированная сыпнотифозная
вакцина (ЖКСВ Е), содержащая авирулентный
штамм Е R.prowazekii и химическую вакцину.
Вакцина применяется по эпидемиологическим
показаниям.

17. Хламидии: систематическое положение

Домен Bacteria
Тип Chlamidiae
Класс Chlamidiae
Порядок Chlamidiales
Семейство Chlamidiaceae
Род: Chlamidia
Виды: C. trachomatis
Род: Chlamidophila
Виды: C. psittaci, C. pneumoniae

18. Морфология хламидий

Грамотрицательные;
Полиморфные;
Основной метод выявления по
Романовскому-Гимзе.

19. Хламидии: общая характеристика

►облигатные внутриклеточные паразиты
нет способности синтезировать АТФ «энергетические паразиты»;
Есть метаболизм;
Делятся бинарно.

20. Методы культивирования хламидий

В желточном мешке куриных эмбрионов (6-
8-дневные);
В клеточных культурах (перевиваемые и
первичные);
В организме чувствительных лабораторных
животных.

21. Хламидии: морфология элементарных телец

мелкие (0,15 – 0,2 мкм)
геном = ¼ генома E. coli
полиморфизм, преимущественно – кокки
метаболически малоактивны (адаптированы к
внеклеточному существованию)
подавляют фагосомо-лизосомальное слияние в
клетке-хозяине
По Романовскому-Гимзе окрашиваются в красный
цвет.

22. Хламидии: морфология ретикулярных телец

более крупные (до 1 мкм)
развиваются из элементарных телец в
течение 5 – 6 часов
содержат большее количество
рибосом
генофора
по Романовскому-Гимзе окрашиваются в
голубой или фиолетовый цвет

23. Влияние физических и химических факторов

Инактивируются при нагревании до 600 С в
течение 10 мин.
При температуре -50 - -700 С сохраняются
годами;
При высушивании в воздухе – сохраняются
длительное время;
Инактивируются эфиром (через 30 мин) или
фенолом (0,5% раствор в течение 24 ч).

24. Хламидии: виды и серовары

Clamidia trachomatis (серовары по белкам
наружной мембраны)
A – C трахома и конъюнктивит с
внутриклеточными включениями;
D
– K урогенитальный хламидиоз
(негонококковые уретриты и слизистогнойные
цервициты),
пневмония
и
конъюнктивит у новорожденных (бленнорея с
включениями)
L1 – L3 паховый лимфогранулематоз
(венерическая лимфогранулёма)

25. Хламидии: виды и серовары

Clamidophila psittaci (1 серовар)
орнитоз
Clamidophila pneumoniae (1 серовар)
бронхопневмония
атеросклеротическая бляшка

26. Микробиологическая диагностика хламидийных инфекций

Орнитоз
кровь
(первые 2-3 недели)
белая мышь
желточный мешок
куриного эмбриона
обнаружение и идентификация возбудителя
РИФ
ИФА

27. Микробиологическая диагностика хламидийных инфекций

Орнитоз
serum
Ig
РСК
РТГА
ИФА
кожно-аллергическая проба
ГЗТ

28. Микробиологическая диагностика хламидийных инфекций

Паховый лимфогранулематоз
содержимое (пунктат) nodulus
мазок-отпечаток
культура клеток
обнаружение и идентификация возбудителя
РИФ
ИФА

29. Микробиологическая диагностика хламидийных инфекций

Другие хламидиозы
патологический материал
мазок
включения (C. trachomatis) или возбудитель
окраска
РИФ
ИФА

30. Микоплазмы: систематическое положение

Домен Bacteria
Тип Tenericutes
Класс Mollicutes
Порядок Mycoplasmatales
Семейство Mycoplasmataceae
Род: Mycoplasma
Виды: M. pneumoniae, M. hominis, M.genitalium, M.
fermentans, M. salivarius, M. orale
Род: Ureaplasma
Вид: U. urealiticum

31. Микоплазмы: морфология

полиморфные (включая филаментозную);
Грамотрицательны;
нет клеточной стенки;
ЦПМ содержит стеролы;
минимальный среди прокариот геном (1/6
от генома E. coli).

32. Микоплазмы: культуральные и физиологические свойства

Культивируются на очень сложных
питательных средах (стеролы, нативный
белок);
Колонии – «яичница-глазунья»
АТФ из аргинина (Mycoplasma) или мочевины
( Ureaplasma)
Деление бинарное, сегментация, почкование,
ветвление.

33. Микоплазмы: факторы патогенности

мембранные паразиты
слаботоксические продукты
обмена (ионы аммония, Н2О2 и
др.) – хронизация и медленное
течение инфекционного
процесса
стимуляция пролиферации
окружающих их клеток
макроорганизма
усиление ГЗТ повреждение
тканей
повышение чувствительности
клеток к вирусам

34. ЛЕГИОНЕЛЛЫ

35. Таксономическое положение

Домен Bacteria
Тип Proteobacteria
Класс Gammaproteobacteria
Порядок Legionellales
Семейство: Legionellaceae
Род: Legionella
Виды: род включает в себя 41 вид и 63 серотипа,
ведущую роль в патологии человека играет
L. Pneumophila 1, 4 и 6 серотипы

36. Морфологические свойства

Окраска по Граму
Грамотрицательная
Форма
Тонкая полиморфная палочка с
заостренными концами
Размер
Средний
Эндоспора
Не образует
Макрокапсула
Не образует
Жгутики
Один или два
Расположение в мазке
Беспорядочное

37. Культуральные свойства

Питательные
потребности
Сложные (необходим цистеин и
железо),
для
культивирования
используют:
угольно-дрожжевой
агар
с
тирозином,
желточный
мешок
куриного
эмбриона (т.к. они факультативные
внутриклеточные паразиты)
Оптимальная
температура
37о С

38.

Условия аэрации
Обычные
Скорость роста
3 – 5 дней
Характер роста
Мелкие
колонии
с
коричневым
пигментом
(пигментируется и среда
вокруг колоний); при
облучении УФ светятся
(явление
аутофлюоресценции)

39. Резистентность во внешней среде

►Длительно сохраняются во внешней
среде (в воде, где они вступают в
симбиотические отношения с синезелеными водорослями и амебами,
размножаются в них - экологическая
ниша легионелл).
►Чувствительны
к
обычным
дезинфектантам.

40. ЛЕГИОНЕЛЛЁЗ

41. Эпидемиология

Источник инфекции
Механизм
передачи
До сих пор выявить не
удалось, сапроноз
Аэрогенный

42. Клинические проявления

пневмония (болезнь легионеров),
лихорадка без поражения легких
(лихорадка Понтиак);
Лихорадка с экзантемой
(лихорадка Форт-Братт).

43. Иммунитет

● Мало изучен.
● Заболевание развивается или при
большой дозе заражения или при
снижении резистентности (часто
встречается у ВИЧ-инфицированных).

44. Выделение чистой культуры

внутрибрюшинное заражение морских
свинок (погибают через 3-6 дней, в печени и
селезенке обнаруживают легионеллы с
помощью РИФ);
заражение
куриных
эмбрионов
в
желточный мешок (идентификация с
помощью РИФ);
засев на угольно-дрожжевой агар с
тирозином
(идентификация
по
культуральным и серологическим, в РИФ,
признакам).

45. Профилактика

Неспецифическая
Санитарногигиенические
мероприятия:
промывание
душевых установок
водой, нагретой до
60о С.
Специфическая
Не разработана

46. Этиотропная терапия

Антибиотики
рифампицин
эритромицин

47. Контрольные вопросы:

1.Почему хламидии являются облигатными внутриклеточными паразитами?
2.Описать жизненный цикл хламидий.
3.Каково клиническое значение хламидий?
4.Рассказать порядок проведения культурального исследования при хламидиозе.
5.Свойства микоплазм, обусловленные отсутствием клеточной стенки.
6.Какие методы используются для диагностики микоплазмозов, алгоритм
диагностики?
7.Чем обусловлен паразитизм у риккетсий?
8.Какие существуют морфологические типы риккетсий?
9.Какие модели используют для культивирования риккетсий?
10. Биологические свойства легионелл, эпидемиология, патогенез и лабораторная
диагностика легионеллеза.