Серологические методы исследования (serum-сыворотка). Сероидентификация. Реакция агглютинации

1.

Серологические методы
исследования
(serum-сыворотка)
Сероидентификация.
Реакция агглютинации

2.

Контрольные вопросы
1.Что такое антигены и их классификация
2. Антигены микробной клетки:
а) О, К и Н Аг. (рисунок)
3. Понятие о иммуногенности и иммуногенезе
4. Специфичность Аг
5. Что такое антитела?
6. Строение Ат. Их специфичность, валентность.
7. Рисунок Ат.
8. Нарисовать иммунный комплекс
9. Перечислить корпускулярные Аг.
10. Теория решетки: рисунок
11. Что такое Сероидентификация?

3.

Подтемы для теста
• Инфекция
1. Инфекционный процесс
2. Формы инфекции
3. Периоды заболевания
4. Факторы вирулентности
5. Источники инфекции
6. Входные ворота
7. Виды инфекции по распространению в организме

4.

Подтемы для теста
• Иммунитет
1. Виды иммунитета
2. Факторы иммунитета
3. Фагоцитоз. Стадии.
4. Неспецифические гуморальные факторы иммунитета
(лизоцим, комплемент)
5. Специфические гуморальные факторы иммунитета
(антитела. Классы!)
6. Иммунная система организма (центральные и
периферические органы)
7. Механизм иммунного ответа.
8. Аллергия.

5.

Антиген. Антитело
• АГ - ГЕНЕТИЧЕСКИ ЧУЖЕРОДНЫЕ ДЛЯ
ОРГАНИЗМА ВЕЩЕСТВА,НА ВВЕДЕНИЕ
КОТОРЫХ ОРГАНИЗМ ОТВЕЧАЕТ РАЗВИТИЕМ
ИММУНОЛОГИЧЕСКИХ РЕАКЦИЙ
• АТ = Иммуноглобулины – специфические
белки крови. АТ вырабатываются в
организме в ответ на внедрение АГ, потом
они специфически взаимодействуют .
Отличаются от обычных глобулинов наличием активного
центра.

6.

7.

Свойства антигена
1.Иммуногенность – способность вызывать в организме
иммунный ответ ,т.е выработку антител и
чувствительных лимфоцитов.
• -чужеродность
• -большой молекулярный вес 10 дольтон
• -сложность мол.структуры – белки
• -коллоидное состояние – (сильно раздробленное)
• -должны быть растворимы
2.Специфичность – на каждый антиген вырабатывается
специфичные антитела или иммунные лимфоциты.
• -определяется наличием эпитопа на поверхности
молекулы антигена
Полноценный антиген = иммуногенность + специфичность

8.

Антигены микробной клетки

9.

• «О» антиген – соматический –
липополисахарид – термостабилен
• «К» антиген –полисахаридный- капсульныйтермолабилен
• «Н» антиген – белковый-жгутиковый –
термолабилен
• «Vi» антиген – вирулентности – белковый термолабильный
Микробные антигены = белки, полисахариды, липоиды.
Экзотоксины и ферменты.

10.

Строение АТ
Мономеры иммуноглобулинов состоят из двух тяжелых
(Н-цепи) и двух легких (L-цепи) полипептидных цепей,
связанных дисульфидной связью.
Эти цепи имеют константные (С) и вариабельные (V)
участки.
Активный центр антител = паратоп- антигенсвязывающий
участок иммуноглобулина, образованный гипервариабельными
участками Н- и L-цепей, связывает эпитопы антигена.

11.

Свойства антитела
1. Специфичность антител обусловлена
активными центрами (паратопами), то есть
участками молекулы иммуноглобулина,
которые соединяются с детерминантными
группами (эпитопами) антигена.
2. Число активных центров называют
валентностью антител.

12.

• Часть гипервариабельной области антитела, которая
контактирует с антигеном –паратоп.
• Часть антигена , которая взаимодействует с паратопомэпитоп.
• Доминантные эпитопы – участки антигена, в которых
особенно часто происходит взаимодействие с антителами.
Пространственная комплементарность = взаимное
соответствие = гомологичность

13.

Механизм взаимодействия АТ и АГ
• Теория Маррека = теория «решетки»
• Маррек полагает, что при соединении АТ с
АГ их молекулы располагаются в
чередующимся порядке, образуя
решетчатые агломераты.

14.

Серологические реакции
• Процесс взаимодействия
АГ и АТ называется
иммунной реакцией ( в организме)
• Иммунная реакция смодулированная в
лаборатории называется СЕРОЛОГИЧЕСКОЙ.
• Если активный центр АТ соответствует
детерминанте АГ ,то они ГОМОЛОГИЧНЫ . В
результате взаимодействия образуется ИММУННЫЙ
КОМПЛЕКС.

15.

• Серологические реакции являются результатом
взаимодействия (соединения) антигена с соответствующим
антителом, которое может проявиться как в условиях
плотной среды (агаровый гель), так и жидкой.
Они протекают в две фазы:
• 1) специфическая невидимая — непосредственное
соединение антигена с антителом,
• 2) неспецифическая видимая — конечный результат
реакции. Реакции проявляются в присутствии электролитов
(0,85% раствор NaCl) при t° 37° или другие факторы.

16.

Виды антител
1. Агглютинины : соединяются с
корпускулярными АГ и выводят их в осадок
2. Преципитины : осаждают растворенные АГ
3. Лизины : разрушают корпускулярные АГ
• лизис Er – гемолиз – АТ- гемолизины;
• лизис бактерий – АТ -бактериолизины

17.

Название реакций
Реакция агглютинации (РА)
Реакция преципитации (РП)
Реакция пассивной (непрямой)
гемагглютинации ( РПГА ;РНГА)
Реакция связывания комплемента РСК
Реакция нейтрализации токсинов

18.

Серологические реакции ставятся с
целью :
Сероидентификации
Идентификация
выделенной чистой
культуры по АГ
свойствамССе
(определение рода ,
вида , серовара )
Составная часть бак.
метода.бак.
лаборатория.
Серодиагностики
Определение
специфических АТ в
сыворотки крови
больного( в
Сс
зависимости от
выявленных
специфических АТ
ставится диагноз)
Иммунологические
лаборатории.

19.

Требование к серологическим реакциям :
1.Все реакции ставятся по утвержденным прописями
2.Используются только те компоненты которые
указывают в методике
3.Компоненты подготавливают к постановке реакции
а)Рабочие разведения из нативных препаратов
б)Рабочие дозы препарата в соответствии с прописью
4.Для постановки реакции сыворотку титруют (искл. РП
реакции преципитации, там раститровывают Ag)
5.Реакция ставится с контролем компонентов.
6.Учет реакции всегда с контролей, если контроли не
соответствуют прописи, такие р-ции не подлежат
учету!!!
7.Компоненты добавляются в строгой очередности в
соответствии с методикой.