Питательные среды, применяемые для культивирования клеточных линий млекопитающих: от лабораторных до промышленных масштабов

1.

Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение
высшего образования
ВЯТСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ
Институт биологии и биотехнологии
Кафедра биотехнологии
Питательные среды, применяемые для
культивирования клеточных линий
млекопитающих: от лабораторных до
промышленных масштабов
Цаплина Ксения
БТб 3102-03-00
1

2.

Этапы получения клеточной культуры
1.
Механическое измельчение.
2.
Промывание ткани от биологических загрязнений.
3.
Центрифугирование при 1000-1500 об/мин в течение 10 минут.
4.
Подсчет начального количества полученных клеток.
5.
Внесение клеток в питательную среду. На этом этапе важно
подобрать правильную питательную среду и внести правильное количество
необходимых добавок в соответствии с результатами подсчета.
6.
Инкубирование клеточной взвеси в термостате 24-48 ч.
2

3.

Условия питательной среды, необходимые для клеток
млекопитающих
● Аминокислоты, пурины и пиримидины, глюкоза в качестве источника
углерода и энергии.
● Витамины и минеральные соли добавляются для поддержания
осмотического давления и постоянного рН, близкого к 7,2.
● Антибиотики для подавления роста бактерий вызывающих
контаминации.
● Факторы роста в виде сыворотки из крови человека или из плода
крупного рогатого скота.
● Температура около 37 ºС
3

4.

Классификация
Классификация по назначению:
Ростовые
Поддерживающие
Транспортные
Дифференцировочные
Классификация по происхождению:
Природные
Искусственные
Классификация по составу компонентов, добавленных в процессе приготовления:
среды, содержащие сыворотку;
serum-free media − бессывороточные среды;
protein-free media − безбелковые среды;
химически неопределенные среды;
chemically defined media − химически определенные среды.
4

5.

Обязательные компоненты в составе среды
Буферные системы;
Индикатор кислотности;
Неорганические соли;
Углеводы;
Аминокислоты;
Витамины;
Сыворотка животных;
Антибиотики.
5

6.

Готовые питательные среды
Среда ЕМЕМ
Среда DMEM
Среда RPMI-1640
Комплексные среды F-10, F-12 Хэма
Среда IMDM
Среда 199
6

7.

Выбор питательной среды для культивирования клеток
млекопитающих в лабораторных и производственных
условиях
7

8.

Заключение
От выбора питательной среды зависит исход проведённого
культивирования клеточной культуры. Сам выбор зависит от
потребностей клеток в питательных веществах, от условий, аппаратного
обеспечения, целей и объёмов производства. Все эти факторы позволят
получить стабильно растущие клетки, качественный конечный продукт
и удачный результат эксперимента или производства. В настоящее
время разработана целая индустрия производства и
совершенствования питательных сред для увеличения продуктивности
культур клеток, что в разы упрощает процесс культивирования.
8

9.

Спасибо за внимание!
9