Изучение антистрессорных свойств этилметилгидроксипиридина сукцината при пероральном способе введения на моделях у крыс SD

1.

МИНИСТЕРСТВО НАУКИ И ВЫСШЕГО ОБРАЗОВАНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
Федеральное государственное бюджетное
образовательное учреждение высшего образования
«Пущинский государственный естественно-научный институт»
Факультет БиоМедФармТехнологический
ВЫПУСКНАЯ КВАЛИФИКАЦИОННАЯ РАБОТА
Павлов Владимир Михайлович
«Изучение антистрессорных свойств этилметилгидроксипиридина сукцината при пероральном способе
введения на моделях хронического состояния стресса у крыс SD»
Научный руководитель: Профессор, д.б.н., Мурашев А.Н.
.
Пущино, 2023 г.

2.

Актуальность
Стресс — это обычная психофизиологическая реакция, генерируемая организмом из-за
нежелательных, сложных и трудных обстоятельств или стрессорных факторов.
Окислительный стресс один из возможных патофизиологических механизмов возникновения
стресса. Относительная выработка активных форм кислорода, характеризующаяся повышенным
уровнем перекисного окисления липидов и нитритов, значительно увеличивается в условиях
хронического стресса.
Активация свободнорадикального окисления липидов, приводит к синдрому пероксидации, что
включает повреждение мембран, инактивацию мембранных ферментов, нарушение процессов
деления и дифференцировки клеток, накопление инертных биополимеров.
2

3.

Этилметилгидроксипиридина сукцинат
Этилметилгидроксипиридина сукцинат представляет собой
производное витамина B6 и относится к анксиолитикам,
антигипоксантам и антиоксидантам.
Этилметилгидроксипиридина сукцинат ингибирует перекисное
окисление липидов, повышает активность супероксиддисмутазы,
повышает соотношение липид-белок, уменьшает вязкость
мембраны, увеличивает ее текучесть.
Структурная формула ЭМГПС
3

4.

Цель исследования: Изучить антистрессорные свойства
этилметилгидроксипиридина сукцината при пероральном способе введения
на моделях хронического состояния стресса у крыс SD.
Задачи исследования:
• Моделирование хронического состояния стресса у крыс аутбредного стока
SD
• Оценить антистрессорную активность «этилметилгидроксипиридина
сукцината» на моделях хронического состояния стресса при хроническом
введении с помощью функциональных тестов.
• Сравнить антистрессорный эффект исследуемого препарата с контрольным
веществом (Очищенная вода)
• Провести сравнительный анализ экспериментальных данных.
4

5.

Материалы и методы
• Все эксперименты проводились на базе
лаборатории биологических испытаний ИБХ РАН
г. Пущино.
• В исследовании использовались крысы SpragueDawley (150-200 граммов, возраст 8-9 недель).
• В исследовании принимало участие 40 животных
(по 10 животных в группе).
Крыса линии Sprague-Dawley
5

6.

Моделирование стресса
Для моделирования хронического состояния стресса использовали
сочетание различных стрессоров:
• Лишение воды на 21-24 часа(На 1, 11, 21 и 31 дни)
• Лишение корма на 21-24 часа (На 2, 12, 22 и 32 дни)
• Плавание в холодной воде в течении 5 минут (3, 13, 23 и 33 дни)
• Помещение в термостат при температуре 45 °С на 5 минут (3, 13, 23 и 33
дни)
• Содержание на мокром подстиле в течении 21-24 часов (5, 15, 25 и 35
дни)
• Содержание без подстила в течении 21-24 часов (6, 16, 26 и 36 дни )
• Содержание в комнате с дополнительным освещением в течении 3 часов
(7, 17, 27 и 37 дни)
• Содержание в клетках под наклоном 45 ° в течении 21-24 часов (8, 18, 28
и 38 )
• Содержание в комнате с измененным режимом дня и ночи (9, 19, 29 и 39
дни)
6

7.

Функциональные тесты
1. Тест предпочтения фруктозы (на
10-11, 20-21, 30-31 и 40-41 дни
исследования)
2. Оценка состояния шерсти (на 10,
20, 30 и 40 дни исследования)
3. Разбрызгивание раствора
сахарозы (на 30 и 40 дни
исследования)
4. Локомоторная активность (На 31
и 41 дни исследования)
5. Принудительное плавание (на 31
и 41 дни исследования)
6. Оценка гнездования (На 30-31 и
40-41 дни исследования)
7

8.

Результаты теста предпочтения фруктозы
Потребление фруктозы
14
90
12
80
10
8
Контроль
ЭМГПС 50 мг/кг
6
ЭМГПС 100 мг/кг
ЭМГПС 300 мг/кг
4
2
Потребление фруктозы, г/сут
Потребление воды, г/сут
Потребление воды
70
60
50
Контроль
40
ЭМГПС 50 мг/кг
ЭМГПС 100 мг/кг
30
ЭМГПС 300 мг/кг
20
10
0
0
10
20
30
День исследования
Результаты потребления воды
40
10
20
30
40
День исследования
Результаты потребления фруктозы
Данные представлены как среднее арифметическое ± ошибка
среднего арифметического
Достоверных отличий от контрольной группы среди полученных
результатов не было обнаружено.
8

9.

Результаты теста оценка состояния шерсти
Оценка состояния шерсти
Суммарный балл загрязненности шерсти
7
6
5
4
Контроль
ЭМГПС 50 мг/кг
3
ЭМГПС 100 мг/кг
ЭМГПС 300 мг/кг
2
1
0
10
20
30
40
День исследования
Результаты оценки состояния шерсти
Данные представлены как среднее арифметическое ± ошибка среднего
арифметического
*- p <0,05 по сравнению с контрольной группой;
9

10.

Результаты теста разбрызгивание раствора сахарозы
Разбрызгивание раствора сахарозы
6
60
5
50
4
Контроль
3
ЭМГПС 50 мг/кг
ЭМГПС 100 мг/кг
2
ЭМГПС 300 мг/кг
1
Время груминга, с
Количество актов груминга
Разбрызгивание раствора сахарозы
*
40
*
30
*
*#
*#
Контроль
ЭМГПС 50 мг/кг
ЭМГПС 100 мг/кг
20
ЭМГПС 300 мг/кг
10
0
0
31
41
День исследования
Результаты разбрызгивания раствора сахарозы
по актам груминга
31
41
День исследования
Результаты разбрызгивания раствора сахарозы по времени
груминга.
Данные представлены как среднее арифметическое ± ошибка среднего
арифметического
*- p <0,05 по сравнению с контрольной группой;
# - p <0,05 по сравнению с группой ЭМГПС в дозе 100 мг/кг
10

11.

Результаты теста локомоторной активности
Локомоторная активность
Локомоторная активность
300
30
*
*
*
*
*
*
250
200
Контроль
ЭМГПС 50 мг/кг
150
ЭМГПС 100 мг/кг
100
ЭМГПС 300 мг/кг
50
0
Вертикальная активность, N
Горизонтальная активность, N
350
*
25
*
*
*
*
*
20
Контроль
15
ЭМГПС 50 мг/кг
ЭМГПС 100 мг/кг
10
ЭМГПС 300 мг/кг
5
0
31
41
День исследования
Результаты горизонтальной локомоторной активности.
31
41
День исследования
Результаты вертикальной локомоторной активности
Данные представлены как среднее арифметическое ± ошибка среднего
арифметического
*- p <0,05 по сравнению с контрольной группой
11

12.

Результаты теста принудительное плавание
Принудительное плавание
50
45
Время неподвижности, с
40
35
30
*#
* #
25
Контроль
*
20
*
*
*
15
ЭМГПС 50 мг/кг
ЭМГПС 100 мг/кг
ЭМГПС 300 мг/кг
10
5
0
31
41
День исследования
Результаты теста «Принудительное плавание».
Данные представлены как среднее арифметическое ± ошибка среднего
арифметического
*- p <0,05 по сравнению с контрольной группой
# - p <0,05 по сравнению с группой ЭМГПС в дозе 300 мг/кг
12

13.

Результаты теста оценка гнездования
Оценка гнездования
10
*
*
Общее количество животных
9
*
8
7
6
Контроль
5
ЭМГПС 50 мг/кг
4
ЭМГПС 100 мг/кг
3
ЭМГПС 300 мг/кг
2
1
0
31
41
День исследования
Результаты теста «Принудительное плавание».
Данные представлены как отношение животных с гнездами, к общему
количеству животных в группе
*- p <0,05 по сравнению с контрольной группой
13

14.

Выводы
• Создана адекватная модель хронического состояния стресса
на крысах Sprague-Dawley для изучение антистрессорной
функции препарата ЭМГПС.
• Изучена антистрессорная активность препарата ЭМГПС на
моделях хронического состояния стресса при хроническом
пероральном введении с помощью функциональных тестов.
• Проведено изучение фармакологической эффективности
этилметилгидроксипиридина сукцината по сравнению с
группой контроля. Препарат ЭМГПС во всех дозах оказал
антистрессорный эффект в сравнении с контрольной
группой.
• Препарат ЭМГПС во всех дозах проявил высокую
антистрессорную активность в тесте «открытое поле» при
пероральном введении; Тесте по оценке состояния шерсти;
Тесте принудительное плавание; Тесте по разбрызгиванию
сахарозу на спину животным; Тесте по оценке гнездования.
14

15.

Спасибо за внимание!
Павлов Владимир Михайлович
[email protected]
15