Оспа

1.

Лекция:
ОСПА

2.

1. Характеристика Семейство вирусов Оспы.
2. Определение болезни.
3. Основные эпизоотические данные.
4. Устойчивость к физическим и химическим
факторам
5. культивирование вирусов в лабораторных
условиях
6.Методы диагностики.
7. Профилактика и меры борьбы с инфекцией.
8. Иммунитет и специфическая профилактика.
9.Оспа крупного рогатого скота.
10. Оспа кур.

3.

1. Характеристика Семейство вирусов Оспы.
• ДНК-СОДЕРЖАЩИЕ ВИРУСЫ.
• Семейство вирусов Оспы (Family Poxviridae)
• Семейство вирусов Оспы (от англ. рox –
пустула, язва) включает в себя большую
группу вирусов, поражающих позвоночных и
насекомых,
разделенных
на
два
подсемейства:
• Chordopoxvirinae – вирусы оспы позвоночных
• Entomopoxvirinae – вирусы оспы насекомых.

4.

• В подсемейство Chordopoxvirinae входит
8 родов:
• - род Orthopoxvirus (от греч. orthos –
прямой, правильный):вирусы вакцины и
натуральной оспы мышей, кроликов,
коров, грызунов, буйволов, верблюдов,
лошадей, обезьян;
• - род Parapoxvirus (от греч. para – около):
вирусы
контагиозного
пустулёзного
дерматита овец и коз, папулёзного
стоматита крупного рогатого скота,
язвенного дерматита овец;

5.

• род Avipoxvirus (от лат. avis – птица):
вирусы оспы кур,голубей, канареек,
перепёлок и др.;
• - род Capripoxvirus (от лат. capri – коза):
вирусы оспы овец и коз, нодулярного
дерматита крупного рогатого скота;
• - род Leporipoxvirus (от лат. leporis –
заяц): вирусы миксомы и фибромы
кроликов, зайцев, белок;

6.

• -род Suipoxvirus (от лат. suis – свинья):
вирус оспы свиней;
• - род Molluscipoxvirus (от лат. molluskum
– моллюск): вирус контагиозного
моллюска;
• - род Yatapoxvirus: вирусы, патогенные
для обезьян и человека, вызывают
образование опухолей.

7.

• Морфология и химический состав
вирусов.
• Все
вирусы
семейства
имеют
кирпичеобразную форму, размеры 250300 нм (до 390 нм) и видимы при
специальной
окраске
в
обычном
световом микроскопе. Вирион состоит из
нуклеоида,
имеющего
форму
двояковогнутого диска и содержащего
ДНК. По обе стороны от нуклеоида
расположены овальные структуры –
боковые тела.

8.

• Липопротеидная оболочка вируса имеет
трехслойное строение толщиной около
22
нм
и
покрыта
беспорядочно
расположенными
ворсинками
с
трубчатым строением.
• ДНК
вируса
имеет
однолинейную
двунитчатую структуру.
• Вирусы оспы содержат около 89% белка,
5-7% ДНК, 2-4% липидов и 1-3%
углеводов.

9.

Рис. 1. Схематическое изображение структуры вирусов оспы

10.

11.

Рис. 2. Вирус Orf, ультратонкий срез, х 400 000 (а);
негативное контрастирование, х 400 000 (в)

12.

• Антигенные свойства.
• В структуре вирусов установлено 4 антигена:
растворимые L и S (часто в комплексе LS),
нуклеопротеидный NP и Х – гемагглютинин.
• Антигены L и S являются неинфекционными,
располагаются на поверхности вириона, обладают
преципитирующей
и
комплементсвязывающей активностью, L –
термолабилен.
• Антиген NP – белок нуклеокапсида, индуцирует
вируснейтрализующие
антитела.
Гемагглютинин
является
гликопротеидом,
относится к растворимым антигенам и
выявляется в реакции гемагглютинации.

13.

2. Определение болезни
Оспа (Variola) – инфекционная контагиозная болезнь,
характеризующаяся лихорадкой и папулезнопустулезной сыпью на коже и слизистых оболочках.
Инфекционную природу оспы установил Буржеля в
1766 г. Оспу коров впервые описал Э. Дженнер,
предложивший в 1896 г. вакцину (коровью оспу) для
прививки людей.
• Вирусную этиологию оспы овец установил в 1903 г.
французский исследователь А. Боррель. Оспа свиней,
коз, лошадей, верблюдов и кур описана в конце ХIХ
века.

14.

• 3. Основные эпизоотологические данные.
• Источником
возбудителя
служат
больные
животные
и
птицы
и
вирусоносители
в
инкубационном периоде. Вирус выделяется из
организма с истечениями из носа, глаз, со слюной,
оспенными корочками.
• Факторами передачи являются предметы ухода,
корма.
Возможна
передача
кровососущими
насекомыми,
а
также
через
молоко
и
трансплацентарно. Основные способы передачи
возбудителя - через дыхательные пути (респираторно)
и наружные покровы. Оспа возникает в любое время
года в виде эпизоотии, поражает животных всех
возрастов. Заболеваемость может достигать 100%.

15.

• Вирусы, входящие в состав каждого рода,
иммунологически
близки.
Репродукция
вируса оспы происходит в цитоплазме
клеток и сопровождается образованием
телец-включений.
• Многие
вирусы
оспы
обладают
гемагглютинирующими свойствами.
• Однако гемагглютинин в структуру
вириона не входит, являясь, очевидно,
побочным продуктом репродукции вируса.

16.

• Вирусы оспы поражают человека, домашних
и диких млекопитающих и птиц чаще в форме
генерализованных инфекций, реже - с
образованием везикулопустулезной сыпи.
• У одних видов домашних животных кожные
поражения претерпевают все стадии развития
оспенного процесса (розеола, папула, везикула,
пустула, струп), у других - везикулы или
пустулы не образуются (у свиней, овец, коз).

17.

• Особенностью патологических изменений
при оспе является их стадийность: розеола
(локальное покраснение участка кожи),
папула (уплотнение участка кожи за счет
клеточной
инфильтрации),
везикула
(наполнение его везикулярной серозной
жидкостью), пустула (переход серозного
воспаления в гнойное) и круста (появление
корочек на месте поражения). У птиц,
кроме того, выделяют дифтеритическую
форму с фибринозным поражением
слизистой оболочки носовой и ротовой
полостей.

18.

• Всего
насчитывают
около
25
разновидностей вирусов оспы, которые могут
вызывать
заболевания
у
домашних
млекопитающих (коровы, овцы, кролики,
верблюды, лошади, буйволы, свиньи, козы) и
птиц (куры, голуби, индейки, канарейки). У
каждого вида животных болезнь вызывает
свой вирус, а у крупного рогатого скота, овец и
кроликов по 2-3 разных оспенных вируса
вызывают по 2-3 болезни (например, у
кроликов оспу, миксому и фиброму).

19.

• Все оспенные вирусы родственны между
собою и поэтому способны заражать не
только «свой» вид животных, но и
родственные (оспой голубей можно
заразить кур, а оспой коров - человека),
создавая перекрестный иммунитет.

20.

• Течение и симптомы. Инкубационный
период -3-14 дней. Болезнь начинается
угнетением, анорексией, лихорадкой (41-42.С).
Появляются отеки кожи век, серозно-слизистые
или серозно-гнойные истечения из носа и глаз.
Дыхание затрудненное, пульс учащенный.
Оспенную сыпь обнаруживают в коже области
глаз, внутренней поверхности грудных и
тазовых конечностей, головы, губ, крыльев
носа. Вначале сыпь имеет вид округлых
красных пятен-розеол, которые через 1-2 дня
превращаются в плотные узелки-папулы,
окруженные красным ободком.

21.

• Папулы достигают размеров 12-15 мм,
через 1-3 дня они размягчаются и в них
появляется серозная жидкость. Наступает
коагуляционный
некроз
кожи,
покрывающий папулу, образуются струпья,
которые отпадают через 5-6 дней. При
тяжелом течении отмечают пневмонию,
энтерит, кератит, артриты. В большинстве
случаев животное погибает от сепсиса.

22.

4. Устойчивость к физическим и химическим
факторам
• Вирус
оспы
является
сравнительно
устойчивым. Он устойчив к эфиру, большинству
дезинфекционных средств, к высыханию и
может храниться в высохших экссудатах в
течение многих месяцев при комнатной
температуре, а в жидкости везикул на холоду —
в течение нескольких лет. В 50% растворе
глицерина вирус сохраняет инфекционную
активность при 4° С в течение нескольких лет.

23.

• 5. Культивирование вирусов в
лабораторных условиях
Культивирование удается на овцах по методу
Борреля.
• Некоторые штаммы, адаптируясь в ХАО
куриного эмбриона, утрачивали патогенные и
иммуногенные свойства.
• Вирус культивируется в первичной и
субкультуре клеток почек и тестикулов ягнят,
козлят и телят, вызывая цитопатические
изменения через 48-96 ч.

24.

• Репродукция.
• Вирус проникает в цитоплазму клетки посредством
эндоцитоза.
• «Раздевание» вирионов и освобождение генома
происходит в две стадии. В первой стадии
протеолитические
ферменты
клетки
разрушают
наружную оболочку вирионов, происходит частичная
транскрипция генома с образованием сверхранних
иРНК и последующим синтезом раздевающего белка,
затем наступает вторая стадия раздевания, в результате
которой разрушаются оболочки нуклеоида и вирусная
ДНК начинает полностью функционировать. Затем
начинается синтез ранних иРНК, которые считываются
с других участков ДНК, ставших теперь доступными.
Дочерние молекулы ДНК являются матрицами для
синтеза поздних иРНК, которые транслируются с
образованием около 80 структурных и неструктурных
вирусных белков.

25.

• Все процессы происходят в цитоплазме в так
называемых фабриках, которые представляют
своеобразные
клеточные
структуры,
модифицированные вирусом.
• Репродукция вирусов оспы заканчивается через 6—7
ч.
• Зрелые
вирионы
через
аппарат
Гольджи
доставляются к клеточной поверхности и выходят из
клеток путем экзоцитоза.
• Включения в цитоплазме (в околоядерной области)
зараженных клеток являются либо «фабриками» в
стадии их функционирования, либо их остатками
вместе
с
неиспользованными
продуктами
вирусиндуцированного синтеза. Эти включения
называются «тельца Гварниери», они имеют
диагностическое значение при оспе.

26.

27.

Гемагглютинирующие и гемадсорбирующие
свойства не установлены.

28.

• 6. Методы диагностики
• Диагноз
ставят
с
учетом
эпизоотологических данных, результатов
клинического обследования, биопробы и
вирусоскопии мазков из свежеразвившихся
первичных очагов поражения или мест
инокуляции
вируса
при
постановке
биопробы.

29.

• В лабораторию для вирусологического
исследования направляют
содержимое
папул
или
формирующихся
везикул.
Материал культивируют в развивающихся
куриных эмбрионах или в культурах клеток,
выделяют и идентифицируют возбудитель.
Для гистологических исследований готовят
тонкий мазок с поверхности срезанной
папулы, подсушивают его на воздухе и
окрашивают по Морозову.

30.

• Обнаружение элементарных телец
(тельца
Гварниери, тельца Пашена)
в окрашенных
препаратах имеет диагностическое значение, а их
отсутствие не служит основанием для исключения
оспы.
• В этом случае испытуемым материалом заражают
кроликов в роговицу (проба Пауля). При
гистологическом
исследовании
пораженных
участков
роговицы
обнаруживают
тельцавключения Гварньери. В качестве экспрессдиагностики применяют РДП на предметном стекле
с использованием содержимого оспенной сыпи и
иммунной антивакцинальной кроличьей сыворотки.

31.

• Обнаружение
элементарных
частиц
вируса в оспинах и телец Гварньери в
пораженных
участках
роговицы
экспериментально зараженных кроликов
подтверждает диагноз на оспу коров.
• При дифференциальной диагностике
необходимо исключить ящур.

32.

• Профилактика и меры борьбы с инфекцией.
• Лечение. Больных животных изолируют в
сухие, теплые помещения и обеспечивают
полноценным, легко усваиваемым кормом.
В питьевую воду добавляют йодистый
калий. Применяют химиотерапевтические
• препараты
и
антибиотики
для
предупреждения
и
ликвидации
осложнений, вызываемых секундарной
микрофлорой. Тяжелобольных животных
убивают.

33.

• 8.
Иммунитет
и
специфическая
профилактика.
Естественно
переболевшие
животные приобретают иммунитет не менее чем на
2 года. С 1944 года используют ГОАформолвакцину,
а
также
поливалентную
концентрированную вакцину, предохраняющую
овец от оспы, брадзота и энтеротоксемии. С 1978
года
применяют
живую
культуральную
противооспенную вакцину, приготовленную из
аттенуированного штамма. Овцы приобретают
невосприимчивость
к
экспериментальному
заражению уже через 3-5 дней после вакцинации и
сохраняют иммунитет в течение 9-12 мес.

34.

9. Вирус оспы коров
• Оспа коров (Variola vaccina) – контагиозная вирусная
болезнь крупного рогатого скота и многих других видов
млекопитающих, характеризующаяся лихорадкой и
папулезно-пустулезной сыпью на коже и слизистых
оболочках. Болезнь впервые описал в 1796 г. Э. Дженнер
(Англия).
• В естественных условиях, кроме коров, к вирусу
восприимчивы лошади, мулы, буйволы, ослы, верблюды,
кролики и человек. Они болеют оспой, вызванной
вирусами натуральной оспы коров и осповакцины. Оспу у
свиней вызывают натуральный свиной вирус и вирус
осповакцины. Овцы и козы восприимчивы к натуральным
вирусам оспы этих видов. Поэтому при конкретной
вспышке болезни в эпизоотический процесс вовлекаются
• лишь соответствующие восприимчивые виды животных.

35.

• Источники возбудителя оспы – больные
животные и вирусоносители в инкубационном
периоде и после клинического выздоровления.
• Основные пути заражения животных –
контактный, алиментарный и респираторный.
• Болезнь особенно быстро распространяется
при совместном содержании больных и
здоровых животных, заболеваемость может
достигать 100%.
• Животные заболевают независимо от времени
года и природно-климатических условий, но
чаще оспа возникает и тяжело протекает зимой
и ранней весной.

36.

• Инкубационный период оспы продолжается 8-9 дней, а
болезнь у различных видов проявляется абортивной,
сливной и геморрагической формами. При абортивной
форме на теле животного появляются розеолы, а через 2-3
дня – папулы и везикулы, превращающиеся в круглые и
продолговатые пустулы с красноватым ободком и
углублением в середине. Через 10-12 дней они
вскрываются и образуются коричневатые корочки (струпья).
• Нарушения общего состояния и лихорадка выражены
незначительно. Нередко оспины, не претерпевая всех
стадий, быстро исчезают. При сливной форме отдельные
везикулы сливаются между собой и образуют большие
пузыри. В дальнейшем появляются таких же размеров
струпья, под которыми скапливается гной. При этом
наблюдаются лихорадка и сильное ухудшение общего
состояния. Для геморрагической (черной) формы оспы
характерны множественные кровоизлияния внутри пустул и
в коже, кровотечения из носа, кровавая рвота и понос с
примесью крови в фекалиях. Животные быстро худеют и
погибают.

37.

• Устойчивость вируса.
• При +4°С вирус сохраняется до 1,5 лет, при
+20°С – 6 мес., замораживание консервирует
его.
• Вирус быстро гибнет в загнивающей ткани,
чувствителен к действию солнечных лучей и
кислот; при кипячении погибает за 2-3 мин., при
+70°С – за 5, при +60°С – за 10, при +55°С – за
20 мин., ультрафиолетовые лучи инактивируют
его за 4 ч, при рН 3,0-3,6 – в течение 1 ч.
• Из химических веществ наиболее губительно
действуют на вирус 2,5-5%-ная серная,
соляная и карболовая кислоты, 1-4%-ный
хлорамин, 5%-ный лизол и перманганат калия.

38.

• Антигенные свойства вируса.
• В антигенном отношении вирус оспы
коров сходен с вирусом вакцины, но
отличается от него в РСК, РДП и РГАд.
В сыворотке крови реконвалесцентов
обнаруживают
вируснейтрализующие,комплементсвяз
ывающие, преципитирующие и
задерживающие гемагглютинацию
антитела.

39.

• Экспериментальную инфекцию удаётся
воспроизвести у телят, кроликов,
морских свинок и обезьян при втирании
вируссодержащего
материала
в
скарифицированную кожу.
• Мышей
можно
заразить
интраперитонеально или подкожно.
• При
подкожном
заражении
они
погибают через 5-7 сут.

40.

• Локализация и выделение вируса.
• Вирус размножается в эпителиальных клетках кожи и
слизистых оболочках с образованием полостей,
заполненных лимфой. Он выделяется при вскрытии
полостей с лимфой, отпадающими струпьями, молоком
при тяжёлом поражении вымени.
• Гемагглютинирующие свойства. Вирус агглютинирует
эритроциты кур при +37°С.
• Культивирование вируса осуществляют на ХАО куриного
• эмбриона с образованием диффузных и геморрагических
оспин, а также в культуре клеток почки крупного рогатого
скота и куриного эмбриона (мутные бляшки).
• Большие заражающие дозы летальны для эмбрионов.

41.

• Лабораторная диагностика.
• Для исследования направляют оспенные
поражения,
лимфу,
а
также
участки
поражённой кожи.
• Материал используют для вирусоскопии,
гистологических исследований, постановки
биопробы и серологических реакций (РДП).
• Для специфической профилактики используют
медицинскую осповакцину, которую наносят на
свежескарифицированную кожу в области
промежности или внутренней поверхности уш• ной
раковины.
После
естественного
переболевания
иммунитет
сохраняется
пожизненно.

42.

• 10. Оспа кур (Variola avium)
• – контагиозная вирусная болезнь кур, впервые
описана в конце ХIХ века, а возбудитель выделен
Марксом и Штикером в 1902 г.
• В естественных условиях вспышки оспы среди
птиц чаще возникают при неудовлетворительном
кормлении и содержании, после прививок и др.
Особенно
повышается
восприимчивость
у
линяющей птицы, а также у птиц с высокой
яйценоскостью.
Болезнь
обычно
вызывает
оригинальный вирус оспы кур. Она проявляется в
виде
эпизоотической
вспышки
продолжительностью
около
6
нед.
Распространению
оспы
способствуют
переуплотненное содержание птицы и недостаток
в рационе витамина А.
• Летальность достигает 50-70%.

43.

• Инкубационный период длится 7-20 дней.
• Болезнь обычно протекает остро, проявляется кожной
(оспенной), дифтеритической, смешанной и катаральной
формами.
• При кожной форме на гребешке, лапках и возле клюва
возникают оспины в виде очажков величиной с просяное зерно
белого цвета, затем они темнеют от кровоизлияний. Оспины
подсыхают и превращаются в корочки. В отдельных случаях
процесс переходит на оперенные участки тела, что приводит к
гибели птицы.
• При дифтеритической форме поражаются слизистые оболочки
верхних дыхательных путей и ротовой полости. Здесь
образуются желто-белые напоминающие сыр наложения,
глубоко проникающие в слизистые оболочки. Эта форма часто
осложняется секундарной микрофлорой, что приводит к
истощению птицы и гибели.
• При смешанной форме на коже появляются оспины, а на
слизистых оболочках ротовой полости – дифтеритические
наложения.
• Катаральная форма оспы характеризуется воспалением
конъюнктивы, слизистой оболочки носовой полости и
подглазничных синусов.

44.

• Патологоанатомические
изменения
характеризуются наличием на коже трупа
птицы
эпителиом
в
виде
струпа,
слизистые оболочки трахеи, пищевода и
зоба дифтеритически воспалены.
• При поражении слезного канала и
подглазничного
синуса
находят
катарально-фибринозный
экссудат
и
атрофию глазного яблока. В тяжелых
случаях
желудок,
кишечник
и
паренхиматозные органы воспалены. При
осложнениях
отмечают
поражения
воздухоносных мешков.

45.

• Устойчивость вируса.
• Вирус
чувствителен
к
высокой
температуре. Высушивание и холод
консервируют его. В оспенных корочках
при +15°С выживает до 2 лет и более.
• В лиофилизированном виде при
хранении под вакуумом оспенный
материал остается вирулентным до 8
лет. Чувствителен к этиловому спирту,
быстро погибает в гниющем субстрате.

46.

• Антигенные свойства вируса.
• В составе очищенного вируса обнаружено
29 полипептидов с молекулярной массой
14-138 кД.
• Между вирусами оспы кур и других видов
птиц (голуби, индейки) установлено
родство. Антигенных вариантов у него не
обнаружено. В сыворотке крови больных и
экспериментально
зараженных
кур
накапливаются антигемагглютинирующие,
вируснейтрализующие
и
преципитирующие антитела.

47.

• Экспериментальная инфекция легко
воспроизводится на курах и цыплятах.
• У кур материал втирают в перьевые
фолликулы, скарифицированную кожу
гребня, бородки и сережек, где
развивается
доброкачественный
фолликулит. Некоторыми штаммами
можно вызвать заражение ворон, уток,
ястребов и канареек.

48.

• Локализация и выделение вируса.
• У больной птицы вирус локализуется в
оспинах. При генерализации процесса его
можно обнаружить в крови, почках, яичниках,
селезенке и других органах. Однако чаще вирус
выявляется в бесперьевых участках кожи,
головы и на слизистой оболочке глотки, гортани
и трахеи. В органах и тканях переболевших кур
он обнаруживается в течение 487 дней (срок
наблюдения). Во внешнюю среду вирус
выделяется с корочками.
• Гемагглютинирующие
свойства
вируса
наиболее выражены в отношении эритроцитов
кур пород белой русской и леггорн, а также
морской свинки, овец, коз и лошадей.

49.

Для культивирования вируса используют куриные эмбрионы,
у которых он поражает ХАО и обнаруживается в тканях и органах зародыша. Кроме того, применяют культуры клеток куриных фибробластов, где вирус вызывает округление, вакуолизацию и образование гигантских клеток с 5-7 ядрами. Вирус хорошо репродуцируется в перевиваемой линии клеток QT-35.
Лабораторная диагностика. Для лабораторных исследований
направляют голову, пораженные участки кожи, внутренних органов и используют вирусоскопию на наличие элементарных
телец, заражение птиц или куриных эмбрионов и постановку
серологических реакций (РНГА, РДП, РИФ).

50.

• Специфическая
профилактика
предусматривает применение живых
вакцин 2 типов: из гетерологичного
штамма вируса оспы голубей (НД) или
ослабленного вируса оспы кур 27-АШ.
Вакцины
втирают
в
перьевые
фолликулы кожи бедра, иммунитет
наступает
через
15-20
дней
и
сохраняется у молодняка до 4, а у
взрослой птицы – до 9-10 мес.