ТЕМА
Вопросы лекции
Пути использования кислорода в клетке
Биологическая роль свободнорадикального окисления
ОКСИДАЗЫ
Инактивация биогенных аминов
ОКСИГЕНАЗЫ
Микросомальное окисление (МСО)
Стадии микросомального окисления
СВОБОДНЫЕ РАДИКАЛЫ
Источники электронов
Источники АФК
ПЕРЕКИСНОЕ ОКИСЛЕНИЕ ЛИПИДОВ (ПОЛ)
Защита от активных форм кислорода
Каталаза
Глутатионпероксидаза
Реакции, обеспечивающие антиоксидантную защиту в эритроцитах
Защита
Неферментативные антиоксиданты
Превентивные антиоксиданты
АНТИОКСИДАНТЫ
Низкомолекулярные антиоксиданты
Антиоксиданты
ПРОДУКЫ C АНТИОКСИДАНТНЫМИ КОМПОНЕНТАМИ
СЛЕДУЮЩАЯ ТЕМА: ОБМЕН УГЛЕВОДОВ
2.06M
Category: chemistrychemistry

Свободное окисление и микросомальное окисление

1. ТЕМА

СВОБОДНОЕ ОКИСЛЕНИЕ
МИКРОСОМАЛЬНОЕ
ОКИСЛЕНИЕ

2. Вопросы лекции


Свободное окисление
Оксидазные и оксигеназные реакции
Микросомальное окисление
Активные формы кислорода
Перекисное окисление липидов
Прооксиданты, антиоксиданты,
их клиническое значение

3. Пути использования кислорода в клетке

СРО активные формы О2
ЦТД
СВОБОДНОЕ ОКИСЛЕНИЕ
оксидазы оксигеназы
НАДФН + Н +
МАО
(ФАД)
диоксигеназы
монооксигеназы
Цитохром Р450 (редуктаза)
МСО
(гепатоциты)
ПОЛ
R+O2=RO2
Цитохром Р450
(гидроксилирование ААК)

4.

Свободное окисление - это кислородзависимые процессы, которые не
связаны с образованием АТФ.
В реакциях свободного окисления
участвуют оксидазы и оксигеназы,
которые используют кислород как
субстрат:
ОКСИДАЗЫ –забирают водород от
субстрата и передают его на кислород
ОКСИГЕНАЗЫ (моно- и диоксигеназы)
внедряют кислород в молекулу субстрата

5. Биологическая роль свободнорадикального окисления

Свободнорадикальным окислением инициируются
процессы обновления белков, фосфолипидов
мембран, нуклеиновых кислот и фагоцитоз.

6. ОКСИДАЗЫ

Примером оксидазы может служить
НАДФН-оксидаза плазматической
мембраны фагоцитирующих
лейкоцитов:
НАДФН + Н+ + О2 → НАДФ+ + Н2О2 ,
субстратом является НАДФН, а
продуктом - пероксид водорода, который
используется лейкоцитом для
уничтожения поглощенных бактерий.

7.

Флавинсодержащие моноаминооксидазы (МАО) –
окислительное дезаминирование биогенных
аминов (Ко-фермент – ФАД).
Реакция протекает в 2 стадии:
1. Дегидрирование амина с восстановлением
простетической группы фермента (Е-ФАД) и
образование имина
2. Имин реагирует с водой и превращается в
альдегид, а восстановленный фермент
окисляется кислородом с образованием Н2О2
R-CH2-NH2 + O2 + H2O → R-CHO + NH3 + H2O2
защита организма от избытка нейромедиаторных
моноаминов

8. Инактивация биогенных аминов

Чаще всего осуществляется окислением
ферментами моноаминооксидазы (МАО),
коферментом которых является ФАД.
Таким пу

9. ОКСИГЕНАЗЫ

К ним относятся система цитохрома Р-450 и
Монооксигеназы - гидролизуют
ароматические аминокислоты (Три, Фен, Тир),
дофамин, остатки пролина и лизина при
созревании коллагена.
Диоксигеназы - включение двух атомов
кислорода в молекулу субстрата R + O2 → RO2
Обычно окисление молекул, содержащих
бензольное кольцо (окисление
гомогентизиновой кислоты (распад тирозина),
разделение молекулы β-каротина на две
молекулы ретиналя

10. Микросомальное окисление (МСО)

Это сложный биохимический процесс, в
котором участвуют мультиферментные
комплексы печени и в некоторой степени
ферменты других органов – легких, почек,
кожи и ЖКТ, которые также обеспечивают
поддержание, регулирование и осуществление
этого процесса.
К группе микросомальных ферментов относят
специфические оксидазы, различные
гидролазы и ферменты конъюгации.

11.

Процесс микросомального окисления
необходим для окисления ксенобиотиков, к
числу которых относятся лекарственные
средства, пестициды, канцерогены и др.
Окисление осуществляется в мембранах ЭПР
гепатоцитов клеток печени, где активна цепь
свободного окисления, включающая НАДФНцитохром Р450-редуктазу и цитохром Р450.
Процесс идет в несколько стадий химической
модификации вещества, в результате чего
ксенобиотик становится более гидрофильным.
При этом возрастает его растворимость в воде,
что облегчает их выведение из организма.

12.

13. Стадии микросомального окисления

Гидрофобный субстрат (R-H) связывается с молекулой
кислорода в активном центре цитохрома P450 , повышая
таким образом активность фермента.
2. NADP окисляется NADP-цитохром P450 редуктазой ,
акцептором 2 электронов будет один из атомов
кислорода, который переходит в форму супероксида O2-.
Второй атом кислорода включается в R-H, образуя
гидроксильную группу R-OH.
Суммарное уравнение реакции гидроксилирования:
1.
RH + O2 + NADФH + H+ → ROH + H2O + NADФ
Индуцировать цитохром Р450 способны барбитурат,
фенобарбитал

14.

15.

16.

17.

18.

19. СВОБОДНЫЕ РАДИКАЛЫ

Свободные радикалы отличаются от обычных
молекул тем, что у них на внешней
электронной оболочке имеется неспаренный
(одиночный) электрон. Это делает радикалы
химически активными, поскольку радикал
стремится вернуть себе недостающий
электрон, отняв его от окружающих молекул
и тем самым их повреждая.
Например, радикал гидроксила обозначают
.
как HO , радикал перекиси водорода как
HOO., радикал супероксида как O2.-.

20.

Из первичного радикала – супероксида, а также
в результате других реакций в организме могут
образоваться весьма активные молекулярные
соединения: перекись водорода, гипохлорит и
гидроперекиси липидов.
Под действием ионов металлов переменной
валентности, в первую очередь – ионов Fe2+ , из
этих веществ образуются вторичные свободные
радикалы, такие как радикал гидроксила и
радикалы липидов, которые оказывают
разрушительное действие на клеточные
структуры

21.

22.

Образование активных форм кислорода:
кислород участвует в образовании перекисей и
активных радикалов, которые необходимы в
пероксисомах для внутриклеточного
пищеварения, разрушения макрофагами
бактерий, вирусов, регуляции метаболизма и т.д.
Перекиси и активные формы кислорода
(кислородные радикалы) оказывают также
повреждающее воздействие на структуры
клеток и тканей, активируя ПОЛ. Разрушение
перекисей и инактивация свободных радикалов
осуществляется с помощью ферментативной и
неферментативной антиокидантной системы

23.

.-
О2 → О2 → О2
2-
→ Н2О2
→OH-
.
+ ОН-
супер- пер- пергидрококсид оксид оксид сильный
радикал анион
радикал
Синглетный кислород:
ОCl- + Н2О2 →Cl- + 1О2

24.

25. Источники электронов

Главный источник свободных радикалов –
дыхательная цепь. Утечка электронов
происходит из комплексов I и II в
реакциях с убихиноном. Неполное
использование кислорода приводит к
образованию свободных супероксидных
радикалов.
Ионы меди Сu2+ и Fe2+ катализируют
образование опасных гидроксильных
радикалов .-ОН из пероксида водорода.

26.

27. Источники АФК

УФ
ПОЛ
Гипоксия
.
-
Реакция
Фентона
Радиация
НАДФН
-оксидаза
3+
2
Fe+
Ксантиноксидаза
_
+
.
Разрушают
АМК в
белках,
нуклеотиы
в ДНК,
ВЖК в
мембранах
н
е
к
р
о
з
а
п
о
п
т
о
з
гибель клетк

28. ПЕРЕКИСНОЕ ОКИСЛЕНИЕ ЛИПИДОВ (ПОЛ)

Реакция цепного окисления липидов играет важную
роль в клеточной патологии. Она протекает в несколько
стадий: инициирование, продолжение, разветвление и
обрыв цепи. Инициирование цепной реакции
начинается с того, что в липидный слой мембран или
липопротеинов внедряется свободный радикал. Чаще
всего это радикал гидроксила ОН.. Будучи небольшой
по размеру незаряженной частицей, он способен
проникать в толщу гидрофобного липидного слоя и
вступать в химическое взаимодействие с
полиненасыщенными жирными кислотами (которые
принято обозначать как RH), входящими в состав
биологических мембран и липопротеинов плазмы
крови. При этом образуются липидные радикалы.

29.

30.

Активные формы кислорода оказывают
повреждающее воздействие на структуры клеток и
тканей, активируя процесс перекисного окисления
липидов (ПОЛ).
ПОЛ – это цепная реакция расширенного
воспроизводства свободных радикалов, когда
каждый свободный радикал обеспечивает
образование нового свободного радикала

31.

32.

OН· + RH > H2O + R·
Липидный радикал (R·) вступает в реакцию с
растворенным в среде молекулярным кислородом; при
этом образуется новый свободный радикал – радикал
липоперекиси (ROO·):
R· + O-2 > ROO·
Этот радикал атакует одну из соседних молекул
фосфолипида с образованием гидроперекиси липида
ROOH и нового радикала R·:
ROO· + RH. > ROOH + R·
Чередование двух последних реакций как раз и
представляет собой цепную реакцию перекисного
окисления липидов.

33.

Конечные продукты перекисного
окисления полиеновых кислот это
малоновый диальдегид и гидропероксид
кислоты

34.

Активные формы кислорода повреждают структуру
ДНК, белков и различные мембранные структуры
клеток. В мембране образуются гидропероксиды
жирных кислот. В клетки начинает проникать вода,
ионы натрия, кальция. Это приводит к набуханию
клеток, органелл и их разрушению. Активация
перекисного окисления приводит к ряду
заболеваний: дистрофия мышц, болезнь Паркинсона
(разрушение нервных клеток), развитие опухолей.
Перекисное окисление приводит к спазму
коронарных артерий, образованию тромба в сосуде,
питающего миокард. С возрастом благодаря ПОЛ на
коже появляются пигментные пятна (пигмент
липофусцин – смесь липидов и денатурированных
белков с продуктами ПОЛ).

35.

36. Защита от активных форм кислорода

Защита клетки обеспечивается благодаря работе
антиоксидантной системы (АОС), которая может
осуществляться энзиматическим и неэнзиматическим путем.
Основным способом защиты от АФК является их
инактивация. Это достигается работой высокомолекулярных
соединений, таких как ферменты: супероксиддисмутаза,
каталаза и глутатионпероксидаза (расщепляют перекись).
Супероксиддисмутаза (СОД) — фермент, который широко
распространен в природе. В активном центре цитозольной
СОД содержатся ионы металлов (меди, железа, марганца,
цинка). СОД присутствует во всех аэробных организмах и
служит для эффективного удаления супероксидных
радикалов.
СОД катализирует реакцию превращения двух анионрадикалов в перекись водорода (Н202 ) и молекулярный
кислород:
202- + 2Н+ -> Н202 + 02

37.

Каталаза расщепляет пероксид водорода с
образованием воды и молекулярного кислорода:
2Н2О2 → 2Н2О + О2
Глутатионпероксидаза использует восстановленный
глутатион для восстановления пероксида водорода и
гидропероксиды жирных кислот:
Эта реакция служит для предотвращения
гемолиза при образовании пероксида
водорода (Н2О2 ) и гидропероксидов
жирных кислот ( ROOH ) в мембране
эритроцитов.

38. Каталаза

расщепляет перекись водорода с
образованием воды и молекулярного
кислорода, а пероксидазы восстанавливают
перекись до воды специальными
субстратами, например, глютатионом.
Глютатиону принадлежит особая роль, что
связано со способностью восстанавливать
перекись водорода, гидропероксиды ROOH, а
также обезвреживать вторичные метаболиты
2Н2О2 + каталаза → 2Н2О + О2

39. Глутатионпероксидаза

Используется восстановленный глутатион для
утилизации пероксида водорода:
Н2О2 + 2GSH → GS-SG + 2H2O
Эта реакция служит для предотвращения
гемолиза эритроцитов при образовании
пероксида водорода Н2О2

40. Реакции, обеспечивающие антиоксидантную защиту в эритроцитах

2 G-SH + 2 H2O2
Глутатионпероксидаза
Глутатион
восстановленный
G-S-S-G + 2 H2O
Глутатион
окисленный
Глутатионредуктаза
НАДФ+
Глюкозо-6-фосфат
НАДФН + Н
Глюкозо-6-фосфатдегидрогеназа
+
6-фосфоглюконолактон

41. Защита

Природные антиоксиданты
Белки, связывающие железо: трансферрины и ферритин
3 фермента:
.
Н2О + О2
1.
Супероксид
дисмутаза
Не проходит
через мембрану
Выход
ит из
клетки
Н2О
2 молекулы
глутатиона
2 Гл- SH
3.
Глутатионпероксидаза
(Se – зависимая)

42. Неферментативные антиоксиданты

• Ионы металлов способны образовывать
активные формы кислорода. В связанном с
белком состоянии эти металлы неактивны.
Транспорт ионов металлов с переменной
валентностью в плазме крови осуществляют
специальные белки-переносчики:
Церулоплазмин транспортирует медь,
Трансферрин – железо,
Альбумин связывает ион меди,
Металлотионеины связывают ионы цинка, меди,
кадмия, ртути

43.

44. Превентивные антиоксиданты

Источником электронов для образования
активных форм кислорода служат металлы с
переменной валентностью:
Fe, Cu, Zn. В связанном с белком состоянии эти
металлы неактивны.
Транспорт ионов металлов с переменной
валентностью в плазме крови осуществляют
специальные белки-переносчики:
- Церулоплазмин транспортирует медь,
- Трансферрин – железо,
- Альбумин связывает ион меди,
Металлотионеины (цитоплазматические белки
богатые цистеином) связывают ионы цинка, меди,
кадмия, ртути

45. АНТИОКСИДАНТЫ

Действие ферментных антиоксидантов
дополняется в целостном организме
естественными антиоксидантами, в частности,
витаминами группы Е, стероидными гормонами,
серусодержащими аминокислотами,
аскорбиновой кислотой, витаминами K и P, βкаротином, убихиноном, пептидами,
производными гаммааминомасляной кислоты,
фосфолипидами, продуктами метаболизма
эйкозаноидов, а также тиолами, в частности,
эрготионеином, содержащимся в эритроцитах
печени, мозге.

46.

47. Низкомолекулярные антиоксиданты

• Витамин С: Аскорбат инактивирует
практически все активные формы
кислорода
• Глутатион – перехватчик гидроксильных
радикалов и синглетного кислорода
• Мочевая кислота – мощный перехватчик
синглетного кислорода, пероксильных и
гироксильных радикалов,
• Витамин Е – α-токоферол реагирует с .ОНрадикалами и способен защищать
мембраны от синглетного кислорода

48.

Антиоксидантным эффектом обладают
витамины Е и К, убихиноны, триптофан и
фенилаланин, а также большинство
растительных и животных пигментов, в
частности, каротиноиды, флавоноиды,
фенокарбоксильные кислоты.
Cамый эффективный из антиоксидантов,
принимаемых с пищей можно отнести
витамин Е. Недостаток витамина Е
способствует деструкции мембран.

49.

Витамин Е чаще всего принимается вместе с
витамином С. Аскорбиновая кислота может
выступать в качестве донора и акцептора
ионов водорода благодаря наличию в
структуре двух фенольных групп, ее
антиоксидантные свойства характеризуются
широким спектром инактивирующего
действия на различные свободные радикалы.
Аскорбиновая кислота превосходит другие
антиоксиданты плазмы крови в защите
липидов мембран от перекисного окисления.

50. Антиоксиданты

В
мембранах:
• Токоферолы (разрывают цепь,
образуя малоактивные
радикалы)
• Каротины
• Билирубин
В
цитоплазме:
В крови:
Витамин С
Мочевая кислота
Таурин
Карнозин
Ансерин (в мышцах)
• Билирубин
• Мочевая кислота

51. ПРОДУКЫ C АНТИОКСИДАНТНЫМИ КОМПОНЕНТАМИ

Ягоды и фрукты:
Клюква
Черника (дикорос)
Чёрная слива
Синяя слива
Черника (культивируемая)

52. СЛЕДУЮЩАЯ ТЕМА: ОБМЕН УГЛЕВОДОВ

English     Русский Rules