Фемофлор. Флороценоз. Андрофлор

1.

Фемофлор
Флороценоз
Андрофлор
ПОДГОТОВИЛИ СТУДЕНТКИ 5ГО КУРСА 537ГР. СУХАНОВА
КРИСТИНА И ТАДТАЕВА ДИАНА.

2.

Фемофлор: назначение
oНабор реагентов для исследования биоценоза урогенитального тракта у
женщин методом ПЦР в режиме реального времени ФЕМОФЛОР
предназначен для исследования состояния биоценоза урогенитального
тракта у женщин методом ПЦР с детекцией результатов в режиме
реального времени.
oНабор реагентов ФЕМОФЛОР предназначен для выявления ДНК условнопатогенных микроорганизмов, ДНК лактобактерий и геномной ДНК
человека (в качестве контроля взятия биологического материала).
oНабор выпускается в трёх вариантах комплектации, в зависимости от
перечня выявляемых условно-патогенных микроорганизмов: Фемофлор 12,
Фемофлор 8 и Фемофлор 4.

3.

o Набор реагентов ФЕМОФЛОР включает: смесь для ПЦР-амплификации, специфичную для
всех бактерий (общая бакмасса), смесь, специфичную для лактобактерий (Lactobacillus
spp.) и смеси, специфичные для условнопатогенных микроорганизмов.
o Одна из пробирок содержит смесь для амплификации геномной ДНК человека (контроль
взятия клинического материала (КВМ)). КВМ используется для исключения ошибок
преаналитического этапа.
o В наборе реагентов ФЕМОФЛОР в одну из пробирок со смесью для амплификации
добавлен внутренний контрольный образец (ВК), предназначенный для оценки
эффективности протекания полимеразной цепной реакции.
o В состав ДНК-зондов, использующихся для детекции продуктов амплификации
фрагментов геномов определяемых микроорганизмов, включена флуоресцентная метка
Fam. В состав ДНК-зондов, использующихся для детекции продуктов амплификации
внутреннего контрольного образца и контроля взятия материала, входит флуоресцентный
краситель Hex.
o В определенные пробирки добавлен олигонуклеотид с флуоресцентной меткой Rox –
«Маркер». Он используется прибором как маркер определения положения стрипа в
плашке.

4.

Фемофлор® 16 предназначен для
проведения 12 тестов,
включая исследование положительных и
отрицательных
контрольных образцов. Набор выявляет 25
показателей,
включая 23 группы микроорганизмов,
контроль взятия материала и общую
бакмассу.

5.

Фемофлор® 8 предназначен для
проведения 24 тестов,
включая исследование положительных
и отрицательных
контрольных образцов. Набор
выявляет 11 показателей,
включая 9 групп микроорганизмов,
контроль взятия материала и общую
бакмассу.

6.

Фемофлор® 4 предназначен для
проведения 48 тестов,
включая исследование положительных
и отрицательных
контрольных образцов. Набор выявляет
7 показателей,
включая 5 групп микроорганизмов,
контроль взятия материала и общую
бакмассу.

7.

Методика забора:
Подготовка биоматериала: Материалом для исследования методом ПЦР-РВ служит соскоб
эпителиальных клеток (уретра, заднебоковой свод влагалища, цервикальный канал шейки
матки).
Забор материала производится в транспортную среду. Клинический материал получают
одноразовым стерильным инструментом типа «Cytobrush».Переносят зонд с
биоматериалом в пробирку типа «эппендорф» с транспортной средой, зонд тщательно
прополаскивают в транспортной среде, затем извлекают и удаляют. Пробирку плотно
закрывают крышкой, маркируют.
Исследуемый материал должен содержать большее количество эпителиальных клеток и
минимальное количество слизи и примеси крови.
При необходимости исследования материала из нескольких биотопов, процедуру
повторяют, каждый раз используя новый стерильный зонд и новую пробирку.

8.

9.

oОсобенности взятия материала из влагалища:
Материал должен быть взят ДО проведения мануального исследования. Зеркало перед
манипуляцией можно смочить горячей водой, применение антисептиков для обработки
зеркала противопоказано. Соскоб берут с бокового или заднего нижнего свода влагалища.
oОсобенности взятия материала из уретры:
Перед взятием биоматериала пациентке рекомендуется воздержаться от мочеиспускания
в течение 1,5-2 часов; непосредственно перед взятием биоматериала наружное отверстие
уретры необходимо обработать тампоном (который можно смочить стерильным
физиологическим раствором); при наличии гнойных выделений соскоб рекомендуется
брать через 15-20 минут после мочеиспускания, при отсутствии выделений необходимо
провести массаж уретры с помощью зонда для взятия биоматериала; в уретру у женщин
зонд вводится на глубину 1-1,5 см.

10.

oОсобенности взятия материала из цервикального канала
перед взятием материала необходимо УДАЛИТЬ ватным тампоном СЛИЗЬ и затем
обработать шейку матки стерильным физиологическим раствором; зонд вводится в
цервикальный канал на глубину 0,5-1,5 см; при извлечении зонда необходимо полностью
исключить его касание стенок влагалища.
oТранспортировка и хранение исследуемого материала:
Время от взятия материала до начала исследования не должно превышать 24 часов.
Транспортировать и хранить образцы до начала исследования при 2-8 °С.

11.

КАК ПРОЧИТАТЬ БЛАНК?
1) обратите внимание на цветовые маркеры около цифровых значений в таблице (желтый и
красный маркеры показывают степень отклонения показателя от нормы) или на подкраску
столбиков гистограммы (цветом выделены клинически значимые отклонения от нормы).
Таблица и гистограмма – это 2 варианта представления результатов исследования, можно
использовать один из них;
2) прочитайте заключение, в нем указан вариант микробиоценоза. В таблице реализована
логика «светофора»: значения нормы – зеленый, отклонение от нормы – желтый,
патологические значения – красный.
В гистограмме значение имеют длина и окраска столбика: низкие значения количества условно
патогенных микроорганизмов, не пересекающие линию отсечки (1% от ОБМ соответствует
норме), выглядят как короткие серые столбики.
Высокие значения количеств УПМ выглядят как длинные столбики, окрашенные в цвет групп
микроорганизмов (например, факультативно-анаэробные или облигатно-анаэробные
микроорганизмы, микоплазмы, дрожжеподобные грибы).

12.

13.

Алгоритм интерпретации результатов
исследования Фемофлор

14.

Флороценоз: назначение
Флороценоз – комплексное исследование по определению видового состава микрофлоры
влагалища и количественного соотношения ее представителей.
Когда рекомендовано исследование:
oПри наличии жалоб: выделения из половых путей, зуд, жжение, дискомфорт
oПосле незащищенного полового контакта с новым/ непостоянным партнером
oПри планировании беременности, при подготовке к ЭКО
oПри планировании гинекологических манипуляций на органах малого таза, оперативного
лечения
oЖенщинам без жалоб для профилактического обследования

15.

Программы исследования:
Флороценоз (Тест, направленный на диагностику нарушений баланса микрофлоры
влагалища у женщин репродуктивного возраста. Определение соотношения ДНК
микроорганизмов в образце.)
Флороценоз и Микроскопия(Программа состоит из комплекса Флороценоз и
микроскопического исследования мазков из цервикального канала и влагалища; позволяет
также выявить наличие воспаления в нижних отделах полового тракта.)
Флороценоз и NCMT( Программа для обследования женщин репродуктивного возраста.
Включает комплекс Флороценоз и исследование для выявления возбудителей инфекций,
передаваемых половым путем (ИППП).
Флороценоз и NCMT и Микроскопия(Расширенная программа для обследования женщин
репродуктивного возраста. Включает комплекс Флороценоз, исследование для выявления
возбудителей инфекций, передаваемых половым путем, и микроскопическое
исследование мазков из влагалища и цервикального канала.)

16.

17.

Какой тест выбрать?
Флороценоз : -Патологические исследования -pH выделения больше 4,5 -Положительный «аминовый тест» Микроскопическое исследования: «Ключевые клетки»-зрелые клетки эпителия, покрытые бактериями;
лейкоциты больше 10 в поле зрения, соотношение Полиморфноядерных лейкоцитов к числу эпителиальных
клеток более чем 1:1 -Ранее выявленные методом ПЦР : Ureaplasma spp., Gardnerella vag.,Candida. -Отсутствие
патогенных микроорганизмов при проведении ПЦР
Флороценоз и микроскопия: -Патологические исследования -pH выделения больше 4,5 -Положительный
«аминовый тест» Микроскопическое исследование не проводилось --Ранее выявленные методом ПЦР :
Ureaplasma spp., Gardnerella vag.,Candida. --Отсутствие патогенных микроорганизмов при проведении ПЦ
Флороценоз и NCMT: Патологические исследования -pH выделения больше 4,5 -Положительный «аминовый
тест» -Микроскопическое исследования: «Ключевые клетки»-зрелые клетки эпителия, покрытые бактериями;
лейкоциты больше 10 в поле зрения, соотношение Полиморфноядерных лейкоцитов к числу эпителиальных
клеток более чем 1:1 -Ранее выявленные методом ПЦР : Ureaplasma spp., Gardnerella vag.,Candida. -Смена
полового партера или незащищенный половой акт
Флороценоз, NCMT и микроскопия -Патологические исследования -pH выделения больше 4,5 -Положительный
«аминовый тест» -Микроскопическое исследование не проводилось -Ранее выявленные методом ПЦР :
Ureaplasma spp., Gardnerella vag.,Candida. -Смена полового партера или незащищенный половой акт

18.

Подготовка и правила забора:
ВАЖНО! Исследование предназначено только для женщин репродуктивного возраста; в течение 3-х недель
перед забором биоматериала пациентка не должна применять системные и местные антибактериальные и
антисептические препараты, делать спринцевания; наличие воспаления на слизистой влагалища не влияет на
эффективность теста (чувствительность и специфичность); можно проводить в любой день менструального
цикла (нежелательно обследования во время менструации).
Следует соблюдать ряд требований перед сдачей гинекологического или урологического мазка:
· минимум за два дня до сдачи исключить половые контакты;
· не принимать ванну за сутки до анализа, ограничиться душем, провести гигиеническую процедуру внешних
половых органов без применения моющих средств.
· в день сдачи анализа не выполняют гигиенические процедуры половых органов.
· за 2-3 часа до взятия мазка не рекомендуется мочиться, так как можно смыть из уретры необходимый для
исследования материал.

19.

Правила взятия биоматериала:
Мазок из цервикального канала( микроскопия):
-Удалить слизь марлевым стерильным тампоном
-Ввести рабочую часть зонда в цервикальный канал на 1-2 см и сделать 2-3 полных оборота
по часовой стрелке
Мазок из влагалища (ПЦР и микроскопия):
-С помощью стерильного зонда (тампона) собрать из заднего и бокового сводов влагалища
и прокатить по предметному стеклу
-С помощью стерильного зонда (тампона) собрать из заднего и боковых сводов влагалища,
его рабочую часть поместить в контейнер с транспортной средой и обломать в область
насечки

20.

Как читать результаты исследования?

21.

22.

Андрофлор: назначение
Андрофлор- способ количественного исследования микрофлоры урогенитального тракта
мужчин методом ПЦР в реальном времени. Позволяет определить качественный и
количественный состав микрофлоры.
Назначается:
oпациентам с наличием жалоб и/или симптомов воспаления нижних и верхних отделов
мочеполовой системы,
oдля диагностики инфекционного фактора при бесплодии, причин рецидивирующих
инфекционно-воспалительных заболеваний мочеполовой системы половых партнеров,
раннего выявления бессимптомных нарушений репродуктивной системы,
oдля профилактического обследования, даже в отсутствии жалоб.

23.

Разница между Андрофлором
и Андрофлором Скрин
АНДРОФЛОР
АНДРОФЛОР СКРИН
Широкая тестовая линейка. Показаниями
являются острые и хронические формы
воспалительных заболеваний полового тракта.
Этот анализ целесообразно использовать в
более сложных клинических случаях, в том
числе для определения возможного влияния
инфекций на фертильность, при подготовке к
процедурам вспомогательных
репродуктивных технологий.
Короткая тестовая линейка. Его
рекомендуется назначать для диагностики
острых форм заболеваний урогенитального
тракта.
При мужском бесплодии целесообразно
исследовать эякулят, при хронических
воспалительных заболеваниях добавочных
половых желез — секрет предстательной
железы, хронических уретритах — соскоб из
уретры.
На исследование может быть направлен
соскоб из уретры, головки полового члена,
первая порция мочи или, в ряде случаев —
эякулят.

24.

Как подготовиться к анализу?
Накануне исследования нельзя применять местные лекарственные препараты и
процедуры.
Накануне исследования в течение 3-ех дней исключить половой акт или пользоваться
барьерными методами контрацепции (презервативом).
При взятии соскоба из уретры не мочиться в течение 1,5-2 часов до процедуры.
Если исследование назначается для контроля излеченности заболевания, то взятие
материала на исследование методом ПЦР возможно не ранее, чем через 28 дней после
окончания приема антибиотиков, на микробиологические исследования не ранее, чем
через 14 дней.

25.

КАКОЙ БИОМАТЕРИАЛ НАПРАВЛЯТЬ НА ИССЛЕДОВАНИЯ?
На анализ можно направлять разные виды биоматериала – соскоб и отделяемое уретры,
секрет простаты и/или эякулят.
oПри хроническом уретрите, баланопостите необходимо брать соскоб из уретры – это
наиболее информативный материал для диагностики данных заболеваний.
oЕсли врач заподозрил эпидидимит или простатит, можно рекомендовать взятие секрета
предстательной железы или эякулята.
oС целью дифференциальной диагностики уретрита от простатита целесообразно взятие
двух образцов – соскоба из уретры и секрета простаты (или эякулята).
oУ пациентов с асимптоматическим течением инфекций, передающихся половым путём,
или у пациентов, которых направил гинеколог в связи с обследованием женщины
относительно невынашивания беременности, бесплодия или прегравидарной подготовки,
можно выполнять анализ эякулята.

26.

КАК ПРОЧИТАТЬ БЛАНК?
Вначале обращаем внимание на верхние строчки – это показатели, которые оценивают
адекватность представленного на исследование материала –геномная ДНК человека
(показывает количество клеток, их должно быть достаточно для прохождения анализа),
общая бактериальная масса (общая обсемененность биотопа) и количество транзиторной
микрофлоры (определяется количество лактобактерий). Тот материал, который
удовлетворяет всем критериям, признается адекватным, а результат исследования
действительно описывает состояние микрофлоры.
Далее нужно смотреть на колонку относительных результатов, там приведены количества
(доли) микроорганизмов по отношению к общей бактериальной массе. Именно эти
величины оцениваются при формировании заключения о состоянии микрофлоры.
Дрожжевые грибы Candida трактуем по абсолютному значению, для патогенов клинически
интерпретируем факт обнаружения.

27.

28.

Спасибо за внимание!