Влияние температурного режима культивирования на молокосвертывающую активность штамма А-дон-02 гриба irpex lacteus fr

1. ВЛИЯНИЕ ТЕМПЕРАТУРНОГО РЕЖИМА КУЛЬТИВИРОВАНИЯ НА МОЛОКОСВЕРТЫВАЮЩУЮ АКТИВНОСТЬ ШТАММА А-Дон-02 ГРИБА IRPEX LACTEUS FR.

Работу выполнила: студентка ІІІ курса
Хараян Татьяна
Научный руководитель:
ст. преп. кафедры физиологии растений ДонНУ
Загнитко Ю.П.

2. Актуальность исследований обусловлена возрастающим интересом к изучению условий биосинтеза протеолитических ферментов молокосвертываю

Актуальность исследований обусловлена возрастающим интересом к
изучению
условий
биосинтеза
протеолитических
ферментов
молокосвертывающего, тромболитического и фибринолитического действия.
Разработка технологии выращивания перспективных продуцентов таких
ферментов и их препаратов имеет огромное значение для сыроварения и
медицины. В качестве продуцентов выше перечисленных ферментов в
промышленности
обычно
используют
бактерии,
актиномицеты,
микроскопические грибы, а в последнее время и высшие грибы. Имеется
достаточное количество работ и предложений по получению заменителей
сычужного фермента на основе глубинных культур микроорганизмов. Но
учитывая некоторые особенности микробных заменителей сычужного
фермента, их рекомендуют использовать для получения лишь отдельных
сортов сыра только для частичной замены сычужного фермента. Поэтому
несовершенство микробных препаратов и дефицит животного сырья
стимулировали интерес к базидиальным грибам как продуцентам ферментов
молокосвертывающего действия.

3. Цель работы - исследование по подбору температурного режима культивирования для максимального выхода протеиназ молокосвертывающего дейс

Цель работы - исследование по подбору
температурного режима культивирования
для максимального выхода протеиназ
молокосвертывающего действия штамма адон-02 irpex lacteus fr.
Задачи:
-подобрать для штамма А-Дон-02 Irpex lacteus Fr.
оптимальный температурный режим для роста и биосинтеза
молокосвертывающих ферментов в условиях глубинного
культивирования;
-провести анализ культуральной жидкости продуцента на
содержание ферментов молокосвертывающего действия и
оценить соотношение показателей молокосвертывающей
активности к общему содержанию белка.

4. Объектом исследования служил штамм а-дон-02 сапротрофного дереворазрушающего гриба Irpex lacteus Fr.

Предмет исследования
- молокосвертывающая активность штамма А-Дон-02 I. lacteus.

5. Методы исследования:

физиолого-биохимические –
изучение молокосвертывающей
активности, динамики накопления
биомассы, кислотности питательной
среды, содержания белка в
культуральной жидкости;
математико-статистические – для
обработки и оценки достоверности
полученных результатов.

6.

Полученные экспериментальные данные свидетельствуют, что
оптимальной температурой для синтеза ферментов
молокосвертывающего действия штаммом А-Дон-02 I. lacteus с целью
дальнейшего получения ферментного препарата является 26оС.
Рис. 3.1. Влияние температурного режима культивирования на МСА штамма В-04 I. lacteus

7.

Показано,
что
в
процессе
культивирования
происходит
незначительное подщелачивание исходной среды на начальных и
конечных
этапах
эксперимента
независимо
от
температуры
культивирования. Изменения рН происходили в допустимых пределах
для
максимального
синтеза
молокосвертывающих
ферментов
исследуемым штаммом.
Сутки
Температура культивирования
24
26
28
30
32
35
5
4,53±0,05
4,6±0,02
4,51±0,02
4,69±0,07
4,72±0,02
4,78±0,04
10
4,38±0,04
4,7±0,03
4,77±0,03
4,67±0,02
4,7±0,08
4,69±0,03
15
4,2±0,04
4,43±0,03
4,54±0,01
4,65±0,02
4,7±0,03
4,7±0,05
20
4,65±0,04
4,42±0,01
4,61±0,05
4,47±0,04
4,69±0,01
4,88±0,02
25
4,33±0,03
4,55±0,06
4,55±0,03
4,52±0,01
4,66±0,01
4,74±0,01

8.

В нестрессовых условиях культивирования максимальный уровень
накопления белка отмечен на 20 сутки культивирования при температуре
32оС. Следует отметить, что максимальная концентрация белка для всех
исследуемых температур приходилась на 20 сутки культивирования, что
связано с выходом клеточных белковых структур в культуральную
жидкость в процессе автолиза.
Рис. 3.2. Влияние температурного режима культивирования на накопление белка штаммом
04 I. lacteus
В-

9.

Максимальный прирост сухой массы мицелия наблюдался в диапазоне
температур от 26 до 35оС (зона оптимума). При культивировании штамма А-Дон02 I. lacteus при 24 и 28оС наблюдались низкие значения накопления сухой массы.
Таким образом, можно сказать, что данные температуры угнетают ростовые
процессы исследуемого нами штамма и находятся в зоне пессимума.
Рис. 3.3. Влияние температурного режима культивирования на накопление биомассы штаммом А-Дон-02 I.
lacteus

10.

ВЫВОДЫ:
-оптимальной температурой для синтеза ферментов молокосвертывающего
действия штаммом А-Дон-02 I. lacteus с целью получения ферментного
препарата является 26оС.
-температура 35оС является критической для исследуемого штамма и
ингибирует его ростовые процессы, поэтому не может быть рекомендована для
культивирования штамма А-Дон-02 I. lacteus.
-максимальный прирост сухой массы мицелия штамма А-Дон-02 I. lacteus
наблюдался в диапазоне температур от 26 до 35 оС. При культивировании
штамма при 24 и 28оС наблюдались низкие значения накопления сухой массы.
-показано, что в процессе культивирования происходит незначительное
подщелачивание штаммом исходной среды на начальных и конечных этапах
эксперимента независимо от температуры культивирования.
-максимальный уровень накопления белка исследуемым штаммом отмечен на
20 сутки культивирования при температуре 32оС.
-максимальная концентрация белка для всех исследуемых температур
приходилась на 20 сутки культивирования (фаза старения культуры).

11.

По результатам проведенных исследований можно
сказать, что штамм А-Дон-02 I. lacteus является
перспективным
продуцентом
протеиназ
молокосвертывающего
действия.
Поэтому
дальнейшая работа по подбору оптимальных
условий культивирования данного штамма с
целью дальнейшего получения ферментного
препарата молокосвертывающего действия
является перспективной.

12. СПАСИБО ЗА ВНИМАНИЕ