Стандартизация и применение расторопши пятнистой

1. Стандартизация и применение расторопши пятнистой

Подготовила студентка 4 курса, 42 группы, фармацевтического
факультета Курилович Марина Николаевна

2. Цель работы:

Фармакогностический анализ лекарственного растения расторопша
пятнистая.
Задачи:
● привести сведения о морфологии растения, изучить информацию о
ареале его произрастания, общих принципах заготовки и сушки,
указать химический состав, показатели доброкачественности;
● провести сравнительную характеристику методов качественного и
количественного определения лекарственного растительного сырья
«Расторопши плоды», предложенных в различных фармакопеях;
● изучить фармакологические эффекты лекарственных биологически
активных веществ расторопши и механизм их действия;
● изучить ассортимент лекарственный средств, изготовленных на основе
расторопши пятнистой и зарегистрированных в Республике Беларусь.

3. Ботаническая характеристика расторопши пятнистой

SILYBUM MARIANUM (L.) GAERTNER
FAMILIAE ASTERACEAE
● Однолетнее или двулетнее травянистое растение.
● Стебель прямостоячий, массивный, бороздчатый,
неразветвленный или малоразветвленный, 100-150 см
высотой.
● Листья крупные с желтоватыми колючками по краю
листа и по жилкам снизу, пластинка листа зеленая с
белыми пятнами, блестящая. Прикорневые листья
крупные, сильно морщинистые, перистые, голые на
черешках, стеблевые листья очередные, сидячие.
● Цветки трубчатые, обоеполые, пурпурно-красного
цвета, собраны в крупные, одиночные корзинки.
Соцветия
расположены на верхушках стебля и его
боковых ветвей. Ложе соцветия мясистое, покрыто
волосками.
● Плоды — темно-коричневые семянки с хохолком.

4. Ареал распространения, места обитания

● Родина расторопши пятнистой – Средиземноморье. Как одичавшее растение в
России она встречается в Европейской части, на Кавказе и в Западной Сибири; на
Украине – почти по всей территории;
● Растет в садах, огородах, на заброшенных полях, пустошах, вдоль дорог.
Заготовка, сушка, хранение
● Сбор плодов производят в конце августасентябре, в период засыхания оберток на
большинстве боковых корзинок. Уборку
сырья
расторопши
пятнистой
можно
проводить двумя способами: раздельным и
прямым комбайнированием.
● После предварительной очистки зерно
высушивают активным вентилированием или
расстилают на току тонким слоем (8–10 см) и
периодически перелопачивают.
● Плоды расторопши хранят в защищенном
от влаги и света месте при температуре от
15°С до 25°С.
● Срок годности 3 года.

5. Химический состав

● Плоды расторопши содержат немногочисленную новую группу природных
соединений - флаволигнаны. Это флавоноиды, содержащие в своем составе
фенилпропаноидный
фрагмент (-С6-С3-), что дает основание относить
флаволигнаны к фенилпропаноидам.
Силимарин – общее название химически связанных изомеров флавонолигнана из
плодов расторопши. Основными биофлавоноидами в силимарине являются:
силибинин, силидианин, силикристин, изосилибинин, среди которых силибинин
обладает наибольшей биологической активностью.
силибинин
силидианин
силикристин
изосилибинин

6. Химический состав

● Важным классом БАВ плодов расторопши пятнистой является жирное масло,
содержание которого достигает 20–30 %. Состав жирного масла расторопши
пятнистой характеризуется наличием: линолевой - 56,57 %, олеиновой - 20,73
%, пальмитиновой - 8,01 %, стеариновой - 4,79 %,арахиновой - 2,70 %, бегеновой
- 2,09 %, нонадециловой - 1,11 %, лигноцериновой - 0,69 %,миристиновой 0,09% жирных кислот.
● В состав плодов расторопши пятнистой входят флавоноиды классов
флавонолы (кемпферол) дигидрофлавонолы (таксифолин) и дегидрокемпферол.
кемпферол
таксифолин

7. Химический состав

Плоды расторопши содержат также:
● макроэлементы (мг/г): К- 9,20; Са-16,60; Mg-4,20; Fe-0,08;
●микроэлементы: Mn-0,10; Cu- 1,16; Zn- 0,71; Cr- 0,15; Al- 0,02; V- 0,01; Se22,90; Ni-0,20; Sr-0,08; Pb-0,08; I-0,09; B-22,40.
● до 0,1 % эфирного масла,
● органические кислоты,
● горечи
● смолы
● слизи
● сахара
● сапонины и др.
● В листьях расторопши пятнистой содержатся флавоноиды (апигенин,
лютеолин, кемпферол и их гликозиды), β-ситостерол и его гликозиды.

8. Стандартизация лекарственного растительного сырья

Нормируемое количество БАВ
ГФ РБ
БАВ не менее 1,5 %
силимарина в пересчете
на силибинин в сухом
сырье или не менее 2,7 %
суммы флаволигнанов в
пересчете на силимарин в
сухом сырье
-
-
ГФ РФ
ГГФ
БФ
не менее 2,4%
суммы
флаволигнанов в
пересчете на
силибин
не менее 1%
силимарина
в пересчете
на
силибинин
не менее
1,5%
силимарина
в пересчете
на
силибинин
не менее 15%
жирного масла
не менее 4%
экстрактивных
веществ,
извлекаемых
спиртом 80%
-
-
-
-

9. Стандартизация лекарственного растительного сырья

Подлинность ЛРС
Макроскопические диагностические признаки
● Плоды — семянки яйцевидной формы, слегка
сплюснутые с боков, длиной от 5 мм до 8 мм,
шириной от 2 мм до 4 мм.
● Верхушка косоусеченная с выступающим тупым
толстым
остатком
столбика
и
островершинным валиком вокруг него или
без остатка столбика.
● Основание семянки тупое; плодовый
рубчик щелевидный или округлый, слегка
смещенный в бок.
● Поверхность гладкая, иногда продольноморщинистая, блестящая или матовая, часто
пятнистая.
● Цвет — от черного до светло-коричневого,
иногда с розовато-фиолетовым оттенком,
валик более светлый.
●Запах отсутствует.

10. Стандартизация лекарственного растительного сырья

Подлинность ЛРС
Микроскопические диагностические признаки
Для микроскопической диагностики плодов расторопши в ГФ РБ, ГФ РФ и ГГФ
используют поперечный срез плода.
А - продольный срез, Б – Кожура
семянки, В – Поперечный срез
1 – Кутикула, 2 – Палисадоподобно
вытянутые клетки эпидермиса, 3 –
Пигментный слой, 4 – Волокнистые
клетки, 5 – Склереиды, 6 – Спавшиеся
клетки паренхимы плода, 7 – Спавшиеся
клетки паренхимы семенной кожуры, 8
– Остаток эндосперма

11. Стандартизация лекарственного растительного сырья

Подлинность ЛРС
Микроскопические диагностические признаки
Для микроскопической диагностики плодов расторопши в БФ используют
порошок плодов расторопши, сырье исследуют под микроскопом с
использованием хлоралгидрата.
Порошок имеет коричнево-желтоватый цвет с темными пятнами. Для него
характерны следующие диагностические признаки :
● частицы эпикарпия, состоящие из бесцветных клеток, имеющих многоугольную
форму с большой или маленькой полостью в зависимости от ориентации;
● группы паренхиматозных клеток пигментного слоя, которые содержат красящее
вещество, проявляющееся в виде ярко-красного цвета;
● большую группу склереид с ярко-желтыми утолщенными стенками и узкой
плоскостью;
● фрагменты мелкоклеточной паренхимы с перфорированными стенками;
паренхиматозные клетки семядолей, содержащие частицы масла и отдельные
скопления кристаллов оксалата кальция.

12. Стандартизация лекарственного растительного сырья

Качественный химический анализ
По ГФ РБ, ГФ РФ, ГГФ и БФ
качественный
химический
анализ
проводится
методом
тонкослойной
хроматографии (ТСХ).
Результаты ТСХ согласно ГФ РБ и
БН. Последовательность зон адсорбции
указана на рисунке. На хроматограмме
испытуемого
раствора
могут
обнаруживаться
другие
флуоресцирующие зоны оранжевого и
желтовато-зеленого цвета между зонами
силибинина и таксифолина

13. Стандартизация лекарственного растительного сырья

Качественный химический анализ
Результаты ТСХ согласно ГГФ: Хроматограмма испытуемого раствора
имеет желто-красное пятно гиперозида в нижней трети, желто-красное пятно
кверцетина в средней трети, и блестящее фиолетово-синее пятно скополетина в
верхней трети.
Согласно немецкой фармакопее определение подлинности плодов расторопши
осуществляется еще и с помощью качественных реакций.
Результаты ТСХ согласно ГФ РФ: На хроматограмме испытуемого раствора
обнаруживается зона адсорбции фиолетового цвета на уровне зоны адсорбции
стандартного раствора силибина, допускается обнаружение других зон адсорбции.

14. Стандартизация лекарственного растительного сырья

Показатели доброкачественности
Др
Орг
Мин
части примес приме
расте и
си
ния
Потер Свеже
и в m сть
при
выс
ГФ
РБ
< 2%
<2%
<1%
<12 %
ГФ
РФ
<2%
<0,5 %
<0,5%
-
ГГФ
<1%
<1%
<1 %
<8%
БФ
-
-
-
< 8%
Суль
фатн
ая
зола
Влаж
ность
-
-
-
-
-
< 12
%
Без
<6%
прогор
клого
запаха
или
вкуса
-
-
Обща Зола
я зола нер в
HCl
< 6%
<4%
-
-
-
-
<8%
-

15. Стандартизация лекарственного растительного сырья

Методы количественного определения действующих веществ
Жидкостная хроматография в соответствии с ГФ РБ и БФ.
Определяют площади пиков, соответствующих силикристину, силидианину,
силибинину А, силибинину В, изосилибинину А и изосилибинину В.
Содержание силимарина в пересчете на силибинин в процентах рассчитывают
по формуле:
( А1 А2 А3 А4 А5 А6 ) m1 P 1000
( A7 A8 ) m2 (100 W )
где А1, А2, А3, А4, А5, А6 — площади пиков соответствующих силикристину,
силидианину, силибинину А, силибинину В, изосилибинину А и изосилибинину В
соответственно на хроматограмме испытуемого раствора;
А7 и А8 — площади пиков соответствующих силибинину А и силибинину В
соответственно на хроматограмме раствора сравнения;
m1 — масса навески ФСО сухого экстракта расторопши стандартизованного, взятого для
приготовления раствора сравнения, г;
m2 — масса навески испытуемого сырья, г;
P — суммарное содержание силибинина А и силибинина В в ФСО сухого экстракта
расторопши стандартизованного, %;
W — потеря в массе при высушивании испытуемого сырья, %.

16. Стандартизация лекарственного растительного сырья

Методы количественного определения действующих веществ
Прямая спектрофотометрия в соответствии с ГФ РБ
Измеряют оптическую плотность испытуемого раствора при 289 нм.
Содержание суммы флаволигнанов в процентах рассчитывают по формуле:
A 1250
m 444
где 444 — удельный показатель поглощения силимарина;
A— оптическая плотность испытуемого раствора;
m— масса навески испытуемого сырья, г.
Спектрофотометрия в соответствии с ГГФ
Измеряют оптическую плотность раствора при длине волны 490 нм.
Определяют концентрацию в процентах силимарина, используя формулу:
Е 490
46,56
W
где W - масса препарата, г.

17. Стандартизация лекарственного растительного сырья

Методы количественного определения действующих веществ
Спектрофотометрия в соответствии с ГФ РФ
Содержание суммы флаволигнанов в пересчете на силибин в абсолютно сухом
сырье в процентах вычисляют по формуле:
А а 0 25 200 1 100 100 Р
А0 а 25 1 100 (100 W ) 100
где
А – оптическая плотность раствора Б испытуемого раствора;
А0 - оптическая плотность раствора Б СО силибина;
а- навеска сырья, г;
а0 – навеска СО силибина, г;
Р – содержание основного вещества в СО силибина, %;
W – влажность сырья, %.

18. Стандартизация лекарственного растительного сырья

Методы количественного определения действующих веществ
Количественное определение жирного масла в соответствии с ГФ РФ
Содержание жирного масла в процентах вычисляют по формуле:
где а - масса сырья до экстракции, г;
а1- масса сырья с пакетом до экстракции, г;
а2- масса сырья с пакетом после экстракции, г.
W – влажность сырья, %.
Количественное определение экстрактивных веществ в соответствии с ГФ РФ
Содержание экстрактивных веществ в абсолютно сухом лекарственном
растительном сырье в процентах вычисляют по формуле:
где m- масса сухого остатка,г;
a - навеска лекарственного растительного сырья, г;
V – объем экстрагента, используемый при однократной обработке ЛРС, мл;
W – влажность сырья, %.

19. Применение лекарственного растительного сырья

Фармакологическая активность

20. Применение лекарственного растительного сырья

Фармакологическая активность
Кроме вышеописанного силимарин также
● модулирует состояние внутриклеточной серин/треониновой киназы, что
сопровождается угнетением развития клеток гепатомы.
● регулирует функциональное состояние стенок капилляров, уменьшает их
ломкость, улучшает микроциркуляцию во внутренних органах.
● снижает синтез холестерина в печени и его экскрецию с желчью, не влияя на
пул желчных кислот.
● обладает антибактериальным и антивирусным действиями (в отношении
Грам+ бактерий без гемолитической активности и вируса гепатита С).
● снижает уровень гликемии натощак, содержание гликозилированного
гемоглобина в крови при сахарном диабете 1 типа на фоне цирроза печени.
● оказывает противоаллергический эффект (оказывает ингибиторный эффект
на высвобождение гистамина из базофильных гранулоцитов).
● оказывает иммуномодулирующий эффект
● оказывает генопротекторную активность.
● доказано, что гепатопротектор силимарин в сочетании с янтарной кислотой
(гораздо больше, чем по отдельности) обладает церебропротекторным
действием.

21. Применение лекарственного растительного сырья

Преимущества фитогепатопрепаратов
● сводят к минимуму “экзотоксические” воздействия. Метаболизм синтетических
препаратов в печени зачастую нарушает метаболизм не только синтетического
гепатопротектора, но и параллельно назначаемых ЛС. Фитогепатопротекторы
более близки человеческому организму, поэтому обеспечивают максимальное
щажение печени.
● обладают большей биодоступностью, в связи с чем случаи передозировки,
непереносимости, побочных эффектов относительно редки. В то же время
максимальное накопление действующих веществ именно в гепатоцитах позволяет
максимально реализовывать терапевтические эффекты этих препаратов.
● “мягкость” действия, безопасность, хорошая переносимость позволяют
назначать фитогепатопротекторы в амбулаторных условиях, детям, пожилым
пациентам.
● биологически активные вещества в растительных препаратах содержатся в
оптимальных количествах и соотношениях, потенцируя друг друга, легко
усваиваются организмом, обладают не одним, а рядом фармакологических свойств.
● лечебный эффект при назначении фитогепатопротекторов отличается
устойчивостью, хотя и достигается в течение более длительного времени.

22. Применение лекарственного растительного сырья

Лекарственные средства на основе расторопши пятнистой
Показания к применению. Состояния при хронически интоксикациях печени
токсическими факторами, например, токсическими средствами защиты растений,
тяжелыми металлами и др.; поражения печени лекарственного генеза (в частности,
некоторыми психотропными средствами, пероральными контрацептивами,
парацетамолом, некоторыми антибиотиками, средствами для наркоза); при
хронически гепатитах, цирроза печени различной этиологии, тем более, в числе
вирусных, лекарственное средство должно назначаться в комплексной терапии;
поражения печени при алкоголизме; в целях профилактики при длительном приеме
лекарств, алкоголя, при хронических интоксикациях ( в т.ч. профессиональных).
Противопоказания.
Повышенная
чувствительность к компонентам
лекарственного средства. Детский возраст до 12 лет.

23. Применение лекарственного растительного сырья

Лекарственные средства на основе расторопши пятнистой
Капсулы Легалон 70мг
№20, №30, №60
Капсулы Легалон 140 мг
№20, №30, №60
Мадаус Гмбх, Германия
Драже Карсил 35 мг №80
Капсулы Карсил форте 90мг №30
АО «СОФАРМА» Болгария

24. Применение лекарственного растительного сырья

Лекарственные препараты на основе расторопши пятнистой
Таблетки п/о Гепсил-Рн 35
мг №30, №50, №90, №120
ООО «Рубикон», Республика
Беларусь
Капсулы Гепарсил 70 мг
№120
ООО «Стиролбиофарм»
Украина

25. Применение лекарственного растительного сырья

Лекарственные препараты на основе расторопши пятнистой
Капсулы Ливосилум 140 мг
№30
Аконитум ЗАО,
Литовская Республика,
упаковано АКАДЕМФАРМ,
Республика Беларусь
Таблетки Силиверин 70 мг
№30, №60, №90
АФЛОФАРМ Фабрика
Лекарственных Средств Лтд
Польша
Таблетки п/о Силибор 35
мг №30
ООО «Фармацевтическая
компания «Здоровье»
Украина

26. Применение лекарственного растительного сырья

Лекарственные препараты на основе расторопши пятнистой
Таблетки п/о Силимарол
70 мг №30
Познаньский завод
лекарственных трав
«Гербапол»
Польша
Капсулы Хепкарсил 45 мг №40
Капсулы Хепкарсил форте 90 мг №40
МЕДИКА АД, Болгария

27. Заключение

● Расторопша пятнистая – культивируемое и дикорастущее, неприхотливое
лекарственное растение. Распространено преимущественно в странах
Средиземноморья, Восточной Европы, Средней Азии и на Кавказе. Не требует
особых условий заготовки, сушки и хранения.
● Химический состав плодов расторопши очень разнообразен, особенностью
является то, что они еще содержат немногочисленную новую группу БАВ –
флаволигнаны. Основные из них: силибинин, силидианин, силикристин,
изосилибинин имеют общее название – силимарин.
● Стандартизацию плодов расторопши пятнистой проводят по силимарину в
пересчете на силибинин в соответствии с ГФ РБ, ГФ РФ, ГГФ, БФ. ГФ РФ
дополнительно нормирует количество жирного масла и экстрактивных веществ.
● По ГФ РБ, ГФ РФ, ГГФ и БФ качественный химический анализ проводится
методом ТСХ. Согласно немецкой фармакопее определение подлинности плодов
расторопши осуществляется еще и с помощью качественных реакций.
● Для количественного определения биологически активных веществ
расторопши плодов в ГФ РБ приведено два метода: жидкостная хроматография и
спектрофотометрия. Предложенный метод жидкостной хроматографии, является
единым для ГФ РБ и БФ, в ГГФ и ГФ РФ указан метод спектрофотометрии. Также
в ГФ РФ приведены методики количественно определения жирного масла и
экстрактивных веществ.

28. Заключение

● Силимарин проявляет очень разностороннюю фармакологическую активность.
Основные эффекты: мембраностабилизирующий,
антиоксидантный,
регенеративный, противовоспалительный и антифибротический. Кроме того
доказана низкая токсичность силимарина и высокая степень биологической
безопасности.
● На фармацевтическом рынке Республики Беларусь на данный момент
представлено 9 препаратов, изготовленных на основе расторопши, следует
отметить, что только один из них белорусского производства - «Гепсил».
● Основные показания к применению: токсические поражения печени,
хронические воспалительные заболевания печени, противопоказания –
повышенная чувствительность к компонентам и детский возраст

29. Спасибо за внимание!