Роль преаналитического этапа в лабораторных исследованиях. Часть 1

1. Роль преаналитического этапа в лабораторных исследованиях. Часть 1

Лекция 5

2.

• В настоящее время в мировой
практике установлено влияние на
лабораторные показатели таких
факторов, как:
• климато-географические условия
проживания,
• погодные условия,
• температура и влажность воздуха,
• атмосферное давление,
магнитное поле,
• циклы солнечной активности,
• лунные приливы,
• экологическая ситуация.

3. Биоритмологическое условное делении суток на три периода:

с 5 до 13 часов
с 13 до 21 часа
ночной
преобладает
влияние
симпатической
нервной системы
активность
симпатической
части понижается
повышен тонус
парасимпатической
нервной системы
усиливается обмен
веществ,
повышается
работоспособность
человека
постепенно
уменьшается
обмен веществ
значительно
снижен обмен
веществ

4. Понятие о биологической вариации

• Результаты лабораторных исследований подвержены
влиянию биологической и аналитической вариации.
• Аналитическая вариация зависит от условий
выполнения теста.
• Общая
биологическая
вариация
исследуемых
показателей обусловлена внутрииндивидуальной
вариацией, которая наблюдается у одного и того же
человека в результате влияния биологических ритмов
(время суток, время года), и межиндивидуальной
вариацией, которая вызвана экзогенными и
эндогенными факторами

5.

6. Факторы, влияющие на биологическую вариацию

7. Двумерный штрих-код в сравнении с одномерным штрих-кодом

Канцелярские ошибки
и пути их устранения
Двумерный штрих-код в сравнении с одномерным штрих-кодом

8.

9. Поток информации о лабораторных тестах в больнице. БИС - больничная информационная система. ЛИС - лабораторная информационная

система

10. Физиологические факторы, влияющие на концентрацию белков плазмы

Возраст
Уровни белков с возрастом изменяются. У новорожденных, в
детстве и в старости они отличаются от таковых v взиослых
людей.
Пол
Мужские и женские половые гормоны влияют на концентрации
многих транспортных белков, таких как
Лекарства
Влияние оказывают оральные контрацептивы, дилан
тин,тестостерон, фенотиазины, эстрогены.
Физическая
нагрузка
Может изменять концентрации многих
белков,например,миоглобина.
Генетические
факторы
Например, фенотипы, связанные с расовыми различиями,
наследственный дефицит отдельных белков.
Питание
Влияет, например, на комплемент, преальбумин, ретинолсвязанный белок.
Беременность
Влияет на транспортные белки.
Сон
Продолжительный сон может изменить концентрацию белков.
Окружающая
среда
Например, у жителей тропических регионов уровень
иммуноглобулинов несколько выше, чем в зонах с более холодным
климатом.

11. Патологические факторы, влияющие на концентрацию белков плазмы

Потери
Патологические потери через поврежденный орган, например,
при нефротическом синдроме, клубочковой и канальцевой
протеинурии, потери через кишечник .
Синтез
Нарушение синтеза возникает при заболеваниях печени и почек,
возможна и фенотипическая недостаточность.
Изменение
объема
циркулирующей
крови
Происходит в результате потерь или обезвоживания.
Катаболизм
Усиливается при воспалении.
Скорость
утилизации
Изменяется при воспалении, заболеваниях почек.
Компенсаторные
механизмы
Возрастание количества высокомолекулярных белков при
нефротическом синдроме.

12. Методологические факторы, влияющие на концентрацию белков плазмы

Хранение
Температурные изменения, многократное использование
образцов, конверсия СЗ- и С4-компонентов комплемента и
липоппотеинов.
Методы
исследования
Чувствительность и специфичность.
Контроль
качества
Обязателен (требования: точность и аккуратность
выполнения).
Способ
получения
образца крови
Имеет значение при длительном венозном застое.

13. Классификация факторов, влияющие на результаты исследований, на преаналитическом этапе

1.
2.
Ошибки идентификации пациента и образца биоматериала
Биологические факторы
а)учитываемые: пол, возраст, этонс, физиологическое состояние (физическая
тренированность, беременность), биоритмы, среда обитания)
б) устранимые: прием пищи, голодание, положение тела, физическая
активность, курение, алкоголь
3.
Ятрогенные факторы
а) диагностические процедуры
б) оперативное вмешательство
в) лечебные процедуры
г) лекарства (принимаемые без назначения врача)
4.
Условия взятия, хранения и транспортировки биоматериала
а) время взятия, срок сбора
б) подготовка участка тела для взятия материала
в) процедура взятия крови, мочи и др.
г) чистота посуды, инструментария
д)температура и газы среды
е) консерванты, антикоагулянты
ж) первичная обработка материала (смешивание, ц\ф, охлаждение,
замораживание)

14.

ВОЗРАСТ
•Число эритроцитов, гемоглобин в крови у новорожденных
выше чем у взрослых
• концентрация мочевой кислоты у новорожденных в течение
нескольких дней после рождения значительно снижена
•Пик активности ЩФ, содержания ЛПНП, ЛПВП
приходится на фазу активного роста

15.

РАСА
•По сравнению с европейцами у чернокожих американцев обоего пола содержан
существенно меньше за счет НГ
• Число моноцитов у европейцев – выше, чем у негров
• 50% индусов имеют повышенную активность амилазы
•Имеются существенные различия в активности КФК у европейцев и негров, не
от массы тела, роста и возраста
• У негров концентрация в крови В12 в 1,35 раза выше, а ЛП – 2 раза, чем у е
(при этом не учащается атеросклероз)

16.

ПОЛ
Как известно, для каждого пола
обнаруживаются различия в
клинико-химических и
гематологических показателях.
Половые различия в
концентрации железа в
сыворотке исчезают у
пациентов старше 65 лет.
Половые различия имеются и в
активности креатинкиназы, и в
концентрации креатинина.
Сывороточная активность и
концентрация зависят от
мышечной массы, которая
обычно более выражена у
мужчин.
Определенная спортивная
тренировка, которая ведет к
увеличению мышечной массы,
может сглаживать эти различия.
Половые различия, отнесенные к
среднему значению у женщин

17.

БЕРЕМЕННОСТЬ
Повышение синтеза
транспортных белков
Увеличение скорости
обменных процессов
Разведение крови
•срок беременности
• возрастание среднего объема плазмы от 2600 мл до 3900 мл
• в первые 10 недель – прирост незначительный,
нарастающее увеличение – к 35 неделе
•Объем мочи увеличивается на 25% и 50%-ное увеличение
скорости клубочковой фильтрации –
физиологически в 3-м триместре
• влияние гормонов беременности на свертывающую систему,
белковый, липидный, ферментный статус, электролиты,
тиреоидные гормоны
• Увеличение СОЭ в 5 раз

18.

Диета и потребление
жидкости
Рекомендуется
производить взятие
образцов после 12частового голодания и при
сниженной физической
активности!
•Холестерин, триглицериды, аммиак, мочевина,
мочевая кислота, глюкоза
•Ранние индикаторы белкового голодания - преальбумины и
ретинол-связывающий белок
•При длительном голоде снижается расход энергии, Т4, Т3,
увеличивается экскреция с мочой аммиака и креатинина,
а снижается - выведение мочевины, кальция, фосфатов

19. Изменения содержания некоторых аналитов после голодания в течение 40-48 ч.

20. Отклонения (%) концентрации аналитов в крови у постоянных курильщиков по сравнению с некурящими, хронические аффекты

21. Остро и хронически возникающие изменения кпинико-химических аналитов при потреблении алкоголя. ПНП -предсердный

натрийуретический пептид

22. Линейные и циклические хронобиопогические влияния

23. Суточные колебания некоторых аналитов (С-сыв.; М-моча)

24. Суточная вариация концентраций кортизола в плазме (затемненные зоны-период сна)

25.

Правила выбора времени взятия проб биоматериалов:
По возможности пробы следует брать между 7 и 9 часами утра.
Взятие проб должно выполняться через 12 часов после
последнего приема пищи.
Взятие проб должно выполняться до проведения
диагностических и лечебных процедур, способных оказать
влияние на результаты теста.
Всегда следует отмечать точное время взятия пробы в
соответствующих документах (журнале, бланке запроса на
анализ)

26.

Время суток при взятии проб крови на исследование – рекомендации
Название теста
8.0–11.00 12.0–17.00
18.0–
08.00
Биохимические тесты
+
+/–
+/–
(экстрен
ные)
Онкомаркеры
Общий анализ крови, коагулология
Общий анализ крови, коагулология
Генетические тесты
Микроэлементы
Тестостерон, ингибин (муж).
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+/–
+
+/–
+/–
+/–
+/–
–

27. Сроки доставки проб в лабораторию (АRUP laboratories, 2002)

Наименование исследования
Микроскопия мочи
Паразитология: - кал на амебиаз
Максимально допустимое
время
(с момента взятия материала)
90 минут
Немедленно
Общеклиническое исследование крови
60 минут
Биохимия:
- глюкоза
ферменты
К, Nа, С1, НСОз
20 минут
30 минут
30 минут
Коагулология
45 минут
Микробиология: - рутинная
бактериологическая культура
тампоны (мазок) со средой
- тампоны (мазок) без среды
90 минут
90 минут
20 минут

28. Взятие венозной крови

В наименьшей степени контролирует лабораторией
Осуществляют одноразовым шприцем или толстой иглой в стеклянную или
пластиковую пробирку или вакуумными системами
Число случаев гемолиза, микросгустков в образце венозной крови
значительно увеличивается при двукратном прохождении крови через
иглу шприца под давлением
При контакте пробы с воздухом возможна ее контаминация
Соблюдение соотношения цельной крови с подходящим антикоагулянтом
с учетом гематокрита!
Изменения (%) концентрации в
сыворотке различных аналитов после
наложения жгута в течение 6 мин

29. Получение сыворотки

Для получения сыворотки используются активаторы
свертывания (в пластике кровь сворачивается плохо) и
сепарационные гранулы
Кровь должна отстоятся 20-30 мин. при комнатной
температуре
Центрифугирование 10 мин.
Четкое разделение сгустка и сыворотки
Сыворотка Биохимия, серология, специальные анализы
Сыворотка Гель Биохимия, серология (только «рутинная»)
ЭДТА гематология (Hb, Ht, эритроциты, лейкоциты )
Кровь должна
сворачиваться в
вертикальном
положении
Цитрат 1:9 Коагулогия (МНО, АЧТВ, Фибриноген)
Цитрат 1:5 СОЭ (Вестергрен или Sedivette®)
Фторид
Лактата
Определение глюкозы (стабильно 24 часа) и энз.
Свертывание в
горизонтальном
положении

30. Хранение и транспортировка проб

Пробы крови должны доставляться в лабораторию как
можно быстрее
Разделительные гели или диффузионные фильтры
препятствуют попаданию веществ из эритроцитов в
сыворотку\плазму после центрифугирования.
Сыворотка или плазма, которые не
были отделены от форменных
элементов не должны замораживаться ни
при каких обстоятельствах, так как это
приведет к тотальному гемолизу.

31. Проблемы и рекомендации при работе с капиллярной кровью

• При прохождении через
поврежденную ткань
активируется свертывание
(брать быстро! – в течение 10
сек взята и перенесена в
цитратный буфер – для
гемостаза)
• Прокол глубокий
• Не допускается давление или
сжатие
• Для исследования
используются первые капли
крови – 10-50 мкл в
стерильный капилляр
• не допускается стекание
крови по стенке пробирки

32.

10 правил и рекомендации по транспортировке проб
1. Быстрая транспортировка и короткий срок хранения
2. Чем ниже температура хранения, тем лучше сохранность
образцов ( есть исключения)
3. Всегда хранить в закрытых сосудах
4. Опасность испарения существует в холодильниках
(конденсация влаги на охлаждающих элементах)
5. Использовать одноразовые системы сбора проб
6. Разделительные элементы (гели) улучшают выход
сыворотки\плазмыи позволяют сыворотку в первичных
пробирках над сгустком
7. Избегать встряхивания – гемолиз!
8. Всегда сохранять вертикальное положение
(ускоряется свертывание)
7. Маркировка инфицированного материала и
осторожность в обращении с ним

33. Наиболее важные причины нарушения качества образца:

Метаболизм клеток крови
Испарение\сублимация
Химические реакции
Разрушение микробами
Осмотические процессы
Воздействие света
Диффузия газа

34.

Влияние гемолиза
Причины гемолиза
Гемолизированные пробы не должны
исследоваться, так как они приводят к
ложным результата и влияют на
методики.
Fe – в 500-раз больше в ЭР
Слишком быстрое взятие
ЛДГ – в 250-раз больше в ЭР
Длительное хранение
или транспортировка
Калий - 25- раз больше в ЭР
Продолжительное или
сильное наложение жгута
и «работа» кулаком
Слишком
высокая\низкая
температура
Центрифугирование
(2,000 - 2,500xg)
Загрязнение (спирт,
инфузионный раствор)
Гемолиз становится видимым
при концентрации Hb в сыворотке/плазме ~ 20 mg/dl

35.

Продолжительное или сильное
наложение жгута и «работа» кулаком
Слишком быстрое взятие
Длительное хранение или
транспортировка
Слишком высокая\низкая температура
Центрифугирование (2,000 доo
2,500xg)
Загрязнение (спирт, инфузионный
раствор)