Презентация АЖС

1. Новая питательная среда для первичной идентификации холерного вибриона «Аргинин-железо-сахарозный агар» (АЖС-агар) Каминский

Денис Игоревич
ФКУЗ Ростовский-на-Дону противочумный институт Роспотребнадзора

2.

Состав среды АЖС-агар на 1,0 л среды (г/л):
пептон ферментативный для бактериологических целей сухой 1,0±0,02;
натрий хлористый - 5,0±0,50;
L-аргинин солянокислый - 1,30±0,30;
сахароза - 1,0±0,02;
натрий серноватистокислый 5-водный - 0,30±0,02;
соль закиси железа и аммония двойная сернокислая 6-водная (Соль
Мора) - 0,20±0,01;
калий фосфорнокислый двузамещённый 3-водный - 0,30±0,01;
агар микробиологический - 12,0±1,0;
бромтимоловый синий водорастворимый - 0,08±0,001;
крезоловый красный водорастворимый - 0,015±0,001;
вода дистиллированная - до 1,0 литра;
рН среды – 6,7.

3. Дифференцирующие свойства питательной среды АЖС-агар в отношении микроорганизмов - целевых аналитов

Дифференцирующие свойства питательной среды АЖСагар в отношении микроорганизмов - целевых аналитов

4. Форма выпуска питательной среды АЖС-агар: во флаконах вместимостью 250,0 мл в объеме 200,0 мл.

5.

Для прохождения процедуры
государственной регистрации
сконструированная среда
получила следующее название:
«Плотная питательная среда
для идентификации холерного
вибриона, готовая к
использованию после
переплавки «Аргинин-железосахарозный агар (АЖС-агар)».

6. Анализируемые образцы в ходе клинических испытаний питательной среды АЖС-агар

Анализируемый образец
Колонии
микроорганизмов,
подозрительные
на
принадлежность к виду
V. cholerae
Происхождение анализируемого образца
Прямой посев на
Пассаж через среду
Исследуемый
щелочной агар обогащения (основной
материал
пептон, 1% пептонная
вода)
+
нет
Испражнения
Количество
образцов
50
+
+
+
+
+
нет
+
+
Испражнения
Рвотные массы
Рвотные массы
Вода поверхностных
водоемов
50
50
50
25
+
+
Вода поверхностных
водоемов
25
+
нет
Хозяйственнобытовая сточная вода
25
+
+
Хозяйственнобытовая сточная вода
25
+
нет
Водопроводная вода
25
+
+
Водопроводная вода
25
Всего образцов
350

7.

По результатам клинических испытаний было установлено:
1. Среда АЖС-агар соответствует своему назначению, указанному в
эксплуатационной и технической документации, а именно: идентификации холерного
вибриона и его дифференциации от микроорганизмов сопутствующей ему в пробах
клинического материала и материала из объектов окружающей среды микрофлоры:
A.hydrophila, E.coli, P.vulgaris.
2. Биологические показатели среды АЖС-агар «дифференцирующие свойства»
(показатель, определяющий специфичность среды) и «стабильность основных свойств
микроорганизмов» соответствуют заявленным в ТУ 20.59.52-001-01898316-2019 на данное
медицинское изделие значениям (качественным характеристикам) в отношении всех
использованных штаммов микроорганизмов – целевых аналитов: V.cholerae,
A.hydrophila, E.coli, P.vulgaris.
3.Результаты идентификации холерного вибриона и его дифференциации от других
микроорганизмов – целевых аналитов из образцов проб клинического материала
(испражнений, рвотных масс) и материала из объектов окружающей среды (воды
поверхностных водоемов, хозяйственно-бытовых сточных вод, водопроводной воды) с
использованием среды АЖС-агар и с помощью референтных методик имеют полное
соответствие (100%).

8.

9. Сравнение вариантов идентификации микроорганизмов, формирующих подозрительные на холерный вибрион колонии при культивировании

на щелочном агаре
Принадлежность
колоний к роду
микроорганизмов
Доля колоний в %, идентифицируемая с помощью
посева в
посева в
метода
АЖС-агар
агар Клиглера
MALDI-TOF MS
Vibrio
51,74
Дифференциация
колоний невозможна
51,74
Aeromonas
48,26
Другие микроорганизмы
нет
47,06
нет
1,2

10.

11.

Выводы
1. Впервые разработана питательная среда, которая позволяет дифференцировать
холерный вибрион от других микроорганизмов сразу по трем признакам – наличию
способности ферментировать сахарозу, отсутствию дигидролазы аргинина и
отсутствию способности к образованию сероводорода.
2. Разработанная питательная среда АЖС-агар является единственной из используемых в
практике питательных сред для отбора подозрительных колоний, позволяющей
дифференцировать между собой холерные вибрионы и аэромонады.
3. Разработанная питательная среда эффективна при исследовании как клинического
материала, так и материала из объектов окружающей среды.
4. Использование данной среды на IV и V этапах лабораторной диагностики холеры
позволяет существенно сократить объём исследований на последующих этапах.