Морфологические характеристики клеток зародышей человека при экстракорпоральном оплодотворении

1. «МОРФОЛОГИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ КЛЕТОК ЗАРОДЫШЕЙ ЧЕЛОВЕКА ПРИ ЭКСТРАКОРПОРАЛЬНОМ ОПЛОДОТВОРЕНИИ »

2. Актуальность

• морфологическая диагностика
оптимизирует процесс комплексного
подхода к выбору эмбриона для
имплантации, возможности
определения зародышей с высокими
качествами, повышения
рентабельности процедуры
экстракорпорального оплодотворения,
повышения частоты наступления
беременности и родоразрешения

3. Цель

• изучение морфометрии эмбрионов и
показателей биохимии культуральных
сред зародышей разного качества в
клинической практике для оптимизации
процессов скрининга в программах
экстракорпорального оплодотворения

4. Задачи

1. Изучить российский и мировой опыт по
морфологической оценки эмбрионов на
предмет диагностики их состояния.
2 Выявить клинические группы для испытаний в
специализированной лаборатории, получить
и исследовать морфологические качества
зародышей, а также ооцитов, влияющих на
процесс оплодотворения и впослежствии
развития зародышей.
3 Охарактеризовать особенности эмбрионов
человека, полученных из ооцитов различной
степени нарушенности.

5. Задачи

4 Установить связь между повреждениями
внутриклеточных структур и развитием
эмбрионов при микроскопических
исследованиях.
5 Оценить состояние эмбрионов на основе
морфологии и применить вспомогательный
приём – биохимический анализ
культуральных сред.
6 Выделить факторы, способствующие
протеканию нормальному развитию
эмбрионов и зародышей.

6. Объект и предмет исследования

• Объектом исследования является –
ооциты и эмбрионы человека
• Предметом: морфо-физиологическая
характеристика и процессы развития
эмбрионов

7. Методы исследования

• - общенаучные (анализ, сравнение и т.п.)
• - клинико-диагностические
• - морфо-физиологические для взрослого
населения
• - морфометрия эмбрионов
• - приборный метод исследования
культуральных сред
• - методы математической статистики и
графической обработки данных

8. Новизна и практическая значимость

1) определена функциональная
активность зародышей, которые
отражается на состоянии культуральных
сред
2) данные цитологических исследований
ооцитов и морфометрии зародышей
могут быть использованы для оценки
вероятности наступления беременности
и успешного родоразрешения

9. Литературный обзор

• Был проведен анализ 54 литературных
источников,
• из них 10 на английском языке (перевод
осуществлялся специальными
программами)

10. Литературный обзор

1) в современной медицине существует
огромное количество репродуктивных
технологий
2) разработаны и внедрены программы
скрининговых исследований родителей
3) существуют критерии оценки качества
ооцитов и ранних эмбрионов, но методы
их исследования и сами критерии
ежегодно дополняются и уточняются

11. Характеристика исследования

• Время исследования - 2022 – 2023 г
• Место исследования - ООО «Клиника
профессора Пасман», г. Новосибирск.
• В программе преимплантационного
исследования участвовали 55 супружеских
пар. Средний возраст женщин этой группы
35 лет.
• Разделены на основную и контрольную
группы по причинам бесплодия

12. Скрининговые исследования, в %

70
64
60
48
50
40
35
30
20
13
10
0
Первич
вторич
отсутствие
бесплодие бесплодие овуляции
8
неясная
причина
мужской
фактор

13. Анализ результатов клинико-диагностических методов, в %

Анализ результатов клиникодиагностических методов, в %
25
21
20
15
15
16
18
10
5
0
эндометриоз
аденомиоз
миомы
полипы

14. Морфология ооцитов

42%
45%
40%
35%
30%
28%
25%
25%
20%
15%
5%
10%
5%
0%
нормальные
аном цитопл экстрацитопл.
сочетание
патологий

15. Цитоплазматические формы патологии

1) появление
вакуолей
2) Агрегацией ЭПС
3) гранулярность в
центре
4) рефрактерные
телами
№ 1, 3

16. Экстрацитоплазматические аномалии

• изменение или деформация толщины
блестящей оболочки,
• Изменение объема перевителлинового
пространства
• Изменение первичных полярных телец

17. Способность ооцитов к оплодотворению и развитию

100%
80%
85% 79%
94%
60%
деград.
оплодотв
0%
неоплод.
20%
6% 5% 10%
3% 6%
ЦФП
6%
ЭЦПА
1% 2%
3% Нормальные
аномалии
40%

18. Влияние качество ооцитов на качество эмбрионов

70
66
60
52 46
37
50
40
36
30
22
28
20
10
10
5
0
А
В
С
105
2
D
ЦФП
ЭЦПА
Нормальные

19. Влияние морфологии ооцитов на спонтанный хэтчинг эмбрионов

60%
60%
46%
50%
40%
39%
27%
30%
20%
10%
0%
Нормальные
ЭЦПА
ЦФП
сочетан

20. Влияние качества эмбрионов на наступление беременности

83%
100%
80%
78%
60%
16%
40%
20%
0%
22%
0%
А
основная
6%
В+С
D
контрольная

21. Влияние причин бесплодия на вынашивание плода

90%
68%
10%
32%
основная
контроль
потери
вынашивание
90%
80%
70%
60%
50%
40%
30%
20%
10%
0%

22. Выводы

• 1 Морфологические особенности постовуляторных
женских гамет влияют на развитие Эм человека при
вспомогательных репродуктивных технологиях.
Показатели эмбриогенеза зависят от типа изменений
структур во внутренней и глубинной части цитоплазмы
гамет.
• 2 Частота нормального оплодотворения достоверно
выше в группе с морфологически нормальными
ооцитами и уменьшается при нарушениях. Этот факт
объясняется снижением качества цитоплазмы при
цитоплазматических аномалиях и дефектами
расхождения хромосом.
• 3 Частота выявления остановки дробления Эм в классе
D, полученных из женских гамет с нарушениями
морфологии, почти в три раза выше по сравнению с
группой морфологически нормальных гамет.

23. Выводы

• 4 Показатели естественной имплантации (хэтчинга) у Эм на стадии
бластоцисты, полученных из ооцитов с морфологическими
аномалиями, высока: они самостоятельно высвобождаются из
блестящей оболочки в 5,5 раза чаще, по сравнению с зародышами,
полученными из ооцитов с изменениями глубинных слоёв
цитоплазмы. Морфология клеток эмбриобласта в Эм на стадии
бластоцисты не влияет на процесс хэтчинга.
• 5 Морфологические качества эмбрионов можно прогнозировать с
учетом клинических факторов: фактор бесплодия, данные о
прерывании беременности, оплодотворение методом ИКСИ.
• 6 Факторами, которые предрасполагают к получению анеуплоидных
эмбрионов в программе Эко, является возраст женины, эндометриоз,
вторичное бесплодие.
• Качественная оценка профилей отработанных сред для
культивирования эмбрионов свидетельствует о специфических для
каждого морфологического класса зародышах наборе биохимических
показателей. Эмбрионы с высоким качеством морфологических
показателей изменяют содержание фенилаланина, валина, пролина,
аланина4 эти эмбрионы обладают высоким качеством имплантации.

24. Выводы

7 При оценке морфологического качества эмбрионов на пятые сутки
выращивания выявлена высокая скорость поглощения глюкозы у
эмбрионов класса 1; внутригрупповой анализ потребления глюкозы
не выявил достоверных отличий между эуплоидными и
анеупоидными зародышами. Критерий удачной имплантации –
уровень потребления глюкозы эмбрионами.
• 8 Качественные параметры отбора эмбрионов, обеспечивающих
высокий процент имплантации, – число бластомеров – не менее 6-8,
светлая цитоплазма, отсутствие фрагментации; площадь и периметр
комплекса бластомеров, длина большой оси комплекса
бластомеров, её удлинённость.
• 9 Чем более дифференцирован у бластоцисты (5-6 суток) развития
трофобласт и эмбриобласт, тем более высока степень их
выживаемости. Наличие вакуолей, фрагментации, дегенеративных
клеток понижает качество (ранг) Эм и его толерантность к
замораживанию.