НИС презентация 1

1.

Структурная стабильность каталитической
α-субъединицы бактериальной
люциферазы Photobacterium leiognathi
Магистрант: Кириченко Екатерина
ББ20-03М
Красноярск, 2024

2.

Научная проблема, на решение которой
направлена работа
• Исследование структурно-функциональных особенностей белка с
помощью флуоресцентной спектроскопии

3.

Объект и предмет исследования
• Объект: альфа-субъединица люциферазы Photobacterium leiognathi
• Предмет: структурная стабильность белка (в процессе денатурации)
Пространственная структура люциферазы P. leiognathi. Оранжевым цветом
показана β-субъединица, красным – каталитическая α-субъединица

4.

Гипотеза
(конкретный вопрос в рамках проблемы, на который нужно ответить в ходе
исследования)
• Альфа-субъединица обладает более стабильной структурой,
нежели бета-субъединица
Пространственная структура люциферазы P. leiognathi.
Оранжевым цветом показана β-субъединица, красным –
каталитическая α-субъединица

5.

Как решают вопрос другие исследователи в
мире *поиск через метод и практическое применение
• Использование методов
флуоресцентной
спектроскопии
• Изучение действия
лекарственных трав (масло
эвкалипта, лемонграсс,
нано-эмульсии) на
денатурацию белка в тканях
• Объект: BSA

6.

Какие результаты достигнуты к настоящему
времени в области моего исследования
*Немцева Е.В. Енисейская фотоника, 2024

7.

Цели и задачи
Выявление структурной стабильности альфа-субъединицы люциферазы
Photobacterium leiognathi при денатурации мочевиной в сравнении с данными
для бета-субъединицы и альфа-бета-гетеродимера.
Задачи:
1. Проанализировать изменение характеристик флуоресценции альфасубъединицы люциферазы (стационарной и время-разрешенной) с
ростом концентрации мочевины.
2. Сравнить кривые перехода для альфа- и бета-субъединиц в сравнении
с данными для альфа-бета-гетеродимера.
3. Объяснить наблюдаемые сходства или различия, основываясь на
структуре и стабильности белков.

8.

Этапы работы
(как достигать цели)
1. Обзор литературы о методах время-разрешенной флуоресцентной спектроскопии и
счета одиночных фотонов
2. Обзор литературы о денатурации альфа-субъединицы химическими методами
3. Проанализировать и улучшить уже полученные данные для бета-субъединицы
4. Провести эксперимент, аналогичный прошлому, с альфа-субъединицей
5. Проанализировать полученные результаты для каталитической субъединицы
6. Сделать выводы о стабильности каталитической субъединицы в сравнении с бетасубъединицей люциферазы
7. ...

9.

Ожидаемые результаты
• Наблюдаемые переходы для люциферазы отражают структурные
особенности преимущественно каталитической альфасубъединицы.
• Альфа-субъединица обладает более стабильной структурой,
нежели бета-субъединица, поскольку стабильная структура важна
для связывания лиганда в ходе биолюминесцентной реакции
• (Если результаты разных исследований субъединиц и белка логично
сходятся, а также согласуется с данными извне, то флуоресцентная
спектроскопия позволяет судить о структурных изменениях или
стабильности белка)