Теория и практика лабораторных микробиологических и иммунологических исследований

1.

МДК.04.01. Теория и практика лабораторных
микробиологических и иммунологических исследований
II курс, 4 семестр
Тема 3.9.
Возбудители вирусных инфекций
Теоретическое занятие №37
Биологическая характеристика вирусов.

2.

Вирусы – мелкие, фильтрующиеся (т.е.
проходящие через бактериальные фильтры)
формы микроорганизмов, утерявшие
способности расти на обычных субстратах.

3.

Открытие вирусов принадлежит
русскому учёному Дмитрию Иосифовичу
Ивановскому, который в 1892 году
опубликовал работу по изучению
мозаичной болезни табака. Д. И.
Ивановский показал, что возбудитель
этой болезни имеет очень малые
размеры и не задерживается на
бактериальных фильтрах, являющихся
непреодолимым препятствием для
мельчайших бактерий.
Кроме того, возбудитель мозаичной
болезни табака не способен
культивироваться на искусственных
питательных средах.

4.

Вирусы имеют кардинальные отличия от
других прокариотических микроорганизмов:
1. Вирусы не имеют клеточного строения и
проявляют свойства живого только внутри
клетки-хозяина.
2. Вирусы имеют субмикроскопические
размеры, варьирующие у вирусов человека от
15-30 нм до 250 и более нм.
3. Вирусы имеют в своём составе только один
тип нуклеиновой кислоты: или ДНК, или РНК,
где закодирована вся генетическая
информация вируса.

5.

4. Вирусы не обладают собственными
метаболическими (отсутствуют рибосомы) и
энергетическими (отсутствуют митохондрии)
системами.
5. Размножение вирусов происходит с
использованием белок синтезирующих и
энергетических систем клетки-хозяина,
поэтому вирусы облигатные внутриклеточные
паразиты.
6. Вирусы не способны к росту и бинарному
делению. Они размножаются путём
репродукции их белков и нуклеиновой кислоты
в клетке хозяина с последующей сборкой
вирусной частицы.

6.

Морфология и ультраструктура вирусов.
Вирусы существуют в трех качественно
различных формах:
1. внеклеточной – вирион;
2. внутриклеточной – вирус.
3. интегрированный с ДНК хозяина вирус
(провирус)

7.

По строению различают 2 типа вирусных
частиц:
Простые и сложные.
Внутренняя структура простых и сложных
вирусов сходна.

8.

9.

10.

11.

Взаимодействие вируса с клеткой.
Репродукция вирусов осуществляется в
несколько стадий, последовательно
сменяющих друг друга:
адсорбция вируса на клетке;
проникновение вируса в клетку
«раздевание» вируса;
биосинтез вирусных компонентов в клетке;
формирование вирусов;
выход вирусов из клетки.

12.

13.

Адсорбция - это взаимодействие вируса с
клеткой, т. е. прикрепления вирусов к
поверхности клетки, на клетке могут
адсорбироваться десятки и даже сотни
вирусных частиц.

14.

Проникновение в клетку.
Существует два способа проникновения
вирусов в клетку: виропексис и слияние
вирусной оболочки с клеточной мембраной.
При виропексисе после адсорбции вирусов
происходят инвагинация (впячивание)
участка клеточной мембраны и образование
внутриклеточной вакуоли, которая
содержит вирусную частицу.

15.

«Раздевание».
Процесс «раздевания» заключается в
удалении защитных вирусных оболочек и
освобождении внутреннего компонента
вируса, способного вызвать инфекционный
процесс.
Конечными продуктами «раздевания»
являются сердцевина, нуклеокапсид или
нуклеиновая кислота вируса.

16.

Биосинтез компонентов вируса.
Проникшая в клетку вирусная нуклеиновая
кислота несет генетическую информацию,
которая успешно конкурирует с
генетической информацией клетки.
Она дезорганизует работу клеточных
систем, подавляет собственный метаболизм
клетки и заставляет ее синтезировать новые
вирусные белки и нуклеиновые кислоты,
идущие на построение вирусного
потомства.

17.

Формирование (сборка) вирусов.
Синтезированные вирусные нуклеиновые
кислоты и белки обладают способностью
специфически «узнавать» друг друга и при
достаточной их концентрации
самопроизвольно соединяются в результате
гидрофобных, солевых и водородных
связей.

18.

19.

20.

21.

Методы культивирования вирусов.
Вирусологический метод включает
культивирование вирусов, их индикацию и
идентификацию.
Материалами для вирусологического
исследования могут быть кровь, различные
секреты и экскреты, биоптаты органов и
тканей человека.

22.

В слюне могут быть обнаружены вирусы
бешенства, эпидемического паротита,
простого герпеса.
Носоглоточные смывы служат для
выделения возбудителя гриппа, кори,
риновирусов, респираторносинцитиального вируса, аденовирусов.
В смывах с конъюнктивы обнаруживают
аденовирусы.
Из фекалий выделяют различные
энтеровирусы, адено-, рео- и ротавирусы.

23.

Для выделения вирусов используют
культуры клеток, куриные эмбрионы,
иногда лабораторных животных.
Источник получения клеток — ткани,
извлечённые у человека при операции,
органы эмбрионов, животных и птиц.
Используют нормальные или
злокачественно перерождённые ткани:
эпителиальные, фибробластического типа и
смешанные.
Вирусы человека лучше размножаются в
культурах клеток человека или почечных
клеток обезьян.

24.

Развивающиеся 5—12-дневные куриные
эмбрионы заражают путем введения
исследуемого материала в различные
полости и ткани зародыша.