Технологии хранения спермы

1.

Технологии хранения спермы.

2.

Главное преимущество искусственного осеменения как
зоотехнического метода –возможность максимально
использовать высокоценных производителей путём
осеменения многих самок одним эякулятом.

3.

Существуют два подхода к
сохранению спермиев:
1. Обеспечение спермиев
веществами необходимыми
для их жизнедеятельности
и одновременное удаление
или нейтрализация
продуктов метаболизма.
2. Торможение
метаболических процессов
в половых клетках, до
минимума

4.

Высушивание под вакуумом замороженной спермы. Спермии
должны восстанавливать свою активность после смешивания навески
высушенной спермы с изотоническим раствором.
Снижением температуры. При 7°С они становятся неподвижна
температуре около 0°С биохимические процессы снижаются, но не
полностью, что позволяет сохранять спермии в течение нескольких
дней в емкостях со льдом
Прекращением метаболизма в спермиях и введением их в состояние
анабиоза. Достигается путем медленного постепенного охлаждения
до 4-5°С и последующего замораживания на пластинах сухого льда
при -79°С или в жидкого азота при -120°С и окончательное
замораживание в жидком азоте при температуре -196°С.
Сохранение спермиев при помощи химических веществ. При
прекращении доступа кислорода к спермиям (при плотной укупорке
сосудов со спермой) происходит накопление угольной кислоты и
снижение рН до 6.2-б.4. При доступе кислорода кислота
улетучивается, нормализуется рН и восстанавливается активность
спермиев.

5.

Разбавление спермы основано на том, что в одном эякуляте содержится
спермиев значительно больше, чем требуется для оплодотворения самки.
Так для оплодотворения яйцеклетки коровы достаточно 5-15 млн. спермиев,
тогда как в одном эякуляте быка их содержится от 5 до 10 млрд. Правильно
приготовленные разбавители удлиняют срок жизни половых клеток во
внешней среде в 2 раза даже без применения хладоагентов.
Синтетические среды готовят в день разбавления спермы. Сухие заготовки,
выпускаемые промышленностью, готовят в соответствии с ТУ. Санирующие
препараты вносят в среды после полного растворения входящих в их состав
компонентов, а затем добавляют глицерин, желток куриного яйца и
тщательно перемешивают до получения однородной жидкости. Яйца перед
использованием моют, протирают тампоном, смоченным 700 спиртом.
Подготовленный желток без примеси белка вносят в колбу с синтетической
средой. Среда должна быть использована в течение 3-4 часов с момента её
приготовления. Во время разбавления спермы среду держат в водяной бане
или термостате с целью поддержания необходимой температуры тела.
При разбавлении всегда разбавитель небольшими порциями добавляют к
сперме, а не наоборот.

6.

Во всех случаях очень важно, чтобы при хранении
спермы колебания температуры были минимальными.
Для этого ее хранят в термосе со льдом или хорошо
отрегулированном холодильнике. После разбавления
сперму разливают в емкости (флаконы, ампулы,
пробирки и т. д.) до самой пробки так, чтобы при
транспортировке не было взбалтывания. Ампулы,
пробирки или флаконы обертывают слоем ваты или
упаковывают в поролоновые амортизаторы, помещают
в полиэтиленовые или резиновые мешочки,
герметически закрывают их и постепенно охлаждают
до 2—4° в холодильнике или в термосе с тающим
льдом.

7.

Теоретические основы замораживания биологических объектов были
отражены в трудах русских учёных (Бахметьев) ещё в начале ХХ века (1912
г.) Идея хранения спермы в замороженном состоянии вынашивалась вместе с
развитием искусственного осеменения (В.К.Милованов).
В 1947 году была установлена способность спермиев выдерживать глубокое
замораживание с сохранением биологической полноценности и
оплодотворяющей способности. В этом году Ирина Ивановна Соколовская в
журнале «Доклады ВАСХНИЛ» сообщила о том, что было получено
потомство от крольчих, осеменённых спермой, находящейся в течение 5
минут в замороженном состоянии до минус 400 С. Дальнейшие исследования
в этом направлении продолжил под руководством В.К.Милованова Смирнов
Игорь Васильевич. Ему удалось получить потомство от кроликов, а затем от
овец и коров, осеменённых спермой, замороженной до минус 790 и минус
1800 С. Данный факт был зарегистрирован как научное открытие. Первой
среди других покорилась замораживанию сперма быка. Уже в начале 60-х
годов 20 века была разработана практически приемлемая технология
замораживания и использования спермы быка.

8.

Неограниченно долгое сохранение спермы в жидком азоте в
замороженном состоянии даёт возможность более рационального
использования ценных производителей – устраняется сезонность
использования быков.
Замораживание спермы позволяет применить метод оценки быков по
качеству потомства, т.е. повышается уровень селекционно-племенной
работы.
Высокая эффективность использования спермы (отход до 5%).
Экономия средств на транспортировку.
Экономия за счёт ликвидации малоценных производителей.
Систематическое использование производителей по графику
положительно отражается на их здоровье.

9.

Сперма производителей не одинакова по степени разбавления
секретами половых желёз. По этому признаку сперму подразделяют
на две группы: А) сперма быка, барана и козла разбавляется
секретами незначительно; Б) сперма жеребца и хряка разбавлена
секретами в значительной степени. В этой связи и концентрация
спермы различна (баран, козёл – 2-5 млрд/мл, бык – 1-2 млрд/мл,
жеребец, хряк 0,1-0,2 млрд/мл).
По способу получения энергии сперма у производителей также
подразделяется на две группы: А) сперме барана, козла и быка
присущ метод получения энергии путём гликолиза; Б) энергия для
спермиев жеребца и хряка образуется в результате дыхания.
По проявлению анабиоза сперма также подразделяется на два
вида: А) Анабиоз спермиев барана, быка, козла наступает при
повышении кислотности – рН ниже 6,8; Б) анабиоз спермиев
жеребца, хряка наступает при рН свыше 7,4.
Следовательно, на основе биохимических особенностей спермы у
производителей и разработаны методы разбавления и хранения.