Зооантропонозы. Возбудители чумы, туляремии, сибирской язвы, бруцеллеза, листериоза

1. Зооантропонозы. Возбудители чумы, туляремии, сибирской язвы, бруцеллеза, листериоза

Лекция

2. Чума

• Острая зооантропонозная инфекционная
болезнь, вызываемая Yersinia pestis.
• Характеризуется тяжелым клиническим
течением с сильной интоксикацией,
лихорадкой, поражением кожи, лимфатических
узлов, легких и др.органов, высокой
летальностью.
• Относится к особо опасным, карантинным
(конвенционным) инфекциям

3. Таксономия

• Отдел Gracilicutes
• Семейство Enterobacteriaceae
• Род Yersinia
• Вид Yersinia pestis

4.

Yersinia pestis
• Грамотрицательные, неподвижные, биполярно
окрашиваемые палочки, коккобациллы
• Оптимальная температура роста - 28 оС
• Плохо растут на МПА (нужны редуцирующие
вещества, гемолизированная кровь, сульфат натрия)
•Вирулентные штаммы образуют R-формы колоний;
менее вирулентные – S-формы
•Молодые микроколонии (8-10 час) – «битое стекло»,
позднее – «кружевные платочки»
•Зрелые колонии крупные с бурым зернистым центром
и неровными краями «ромашки»
• Не ферментируют мочевину, оксидаза -, каталаза +,
индол -, H2S-, VP- .

5.

6.

7.

Колонии возбудителя чумы

8. Антигенная структура

• О-Аг (эндотоксин) липополисахаридно-белковый
• К-Аг капсульный, F1-Аг предохраняет от поглощения
фагоцитами, не токсичный, но иммуногенный
• Активатор плазминогена – протеаза, активирующая
лизис фибриновых сгустков, которые препятствуют
диссеминированию возбудителя, инактивирует C3b и
C5a компоненты комплемента
• V/W (Vi)- Аг состоит из белка (V-фракция) и
липопротеина (W-фракция) проявляет
антифагоцитарные свойства, способствует
внутриклеточному росту бактерий

9. Мышиный токсин

• Белковоподобное вещество, локализованное
внутриклеточно
• Эффект – антагонист адренергических
рецепторов
• LD50 для мышей менее 1 мг, вызывает шок и
смерть
• Y.pestis выделяет бактериоцины (пестицины)
убивающие родственные бактерии

10. Эпидемиология

• Первичные хозяева – животные, грызуны (на 1
месте крысы)
• Вторичный (случайный) хозяин – человек
• Передается через блох, а также контактным,
алиментарным и аспирационным путями

11.

Блоха

12. Патогенез

• Y.pestis внедряется в месте укуса
инфицированной блохи, которая питалась
кровью больных грызунов
• Y.pestis поглощается фагоцитами, но фагоцитоз
незавершенный, возбудитель распространяется
дальше гематогенным и лимфогенным путем

13. Механизм развития заболевания

• 1. Лимфогенный перенос от места
проникновения до лимфатических узлов
• 2. Распространение бактерий из
лимфатических узлов до кровотока –
бактериемия
• 3. Генерализованная септицемия

14. Клинические проявления

• Инкубационный период 1-6 суток
• Начало острое, внезапный подъем температуры,
головные боли, налет на языке, его отек, речь
невнятная, развиваются галлюцинации
• При внедрении через кожу – в 3-4% пустулы и
карбункул
• Чаще развивается серозно-геморрагическое
воспаление лимфоузла - бубон
• Различают первичные бубоны, связаны с местом
входных ворот и вторичные бубоны (возникают
лимфогенно)

15.

Чумной бубон

16. По клиническим проявлениям выделяют:

• Локальные формы – кожная, кожно-бубонная и
бубонная
• Генерализованные или внутренне-септические
формы (первично- и вторично септическая)
• Внешне диссеминированные формы – первичная
и вторичная легочная, кишечная
• Смерть без лечения при бубонной чуме – 75%,
при других формах – 100%

17.

Лабораторная диагностика чумы
проводится в лабораториях ООИ
Исследуемый материал
Оперативная диагностика
Ретроспективная диагностика
Экспресс-анализ:
ПЦР, РИФ идр.
Серодиагностика
Бактериологический
метод
Индикация
антигенов в
мумифицрованных
объектах
Биологический
метод

18.

Тесты для идентификации
Y.pestis
• характерные морфологичесие и
тинкториальные свойства;
• характерные культуральные свойства на
жидких и плотных средах;
• чувствительность к фагам Л-413 и Покровской;
• отсутствие подвижности на полужидком агаре
при 20-22 оС;
• отсутствие способности к ферментации
мочевины.

19.

Реакции для обнаружения антигенов
Y.pestis
• РНГА (реакция непрямой
гемагглютинации) с антительным
диагностикумом;
• РНАт (реация нейтрализации антител) с
антигенным диагностикумом;
• РИФ (реакция иммунофлуоресценции)
• ИФА (иммуноферментный анализ)
• РИА (радиоимунный анализ)

20. Лечение

Антибиотики:
Стрептомицин
Левомицетин
Препараты тетрациклинового ряда

21. Профилактика

• Специфическая – проводится по
эпидемиологическим показаниям:
• живая чумная вакцина EV (накожно и подкожно),
в России разработана живая оральная
таблетированная вакцина и аэрозольная вакцина
• Неспецифическая: постоянный надзор за
численностью грызунов в природных очагах
(проводится противочумными станциями),
борьба с эктопаразитами
• Необходимо проведение карантинных
мероприятий в случаях появления заболевания

22. Возбудитель сибирской язвы

• Anthrax (греч) – злокачественный карбункул
• Сибирская язва – антропозоонозное заболевание,
вызываемое Bacillus anthracis, характеризуется
тяжелой интоксикацией, поражением кожи,
лимфатических узлов и др. органов.
• Впервые описана русским врачом Андриевским
в 1786-1788 гг. на Урале, который и дал название
«сибирская язва»
• Выделен Р.Кохом в 1876 г., а в 1881 г. Л.Пастер
предложил живую вакцину для профилактики

23.

Морфологические и
тинкториальные свойства
Bacillus anthracis
• Очень крупные палочки.
• Диаметр спор меньше диаметра
клетки.
• Грамположительные.
• Располагаются в мазках в виде
цепочек.
• В организме хозяина образуют
капсулы.

24.

Bacillus anthracis
Фотографии Bacillus anthracis, сделанные Робертом Кохом
В 1877 году Роберт Кох выделил чистую культуру возбудителя и доказал ее спорогенность и
патогенность для животных

25.

Край колонии B.antracis

26.

Факторы вирулентности
Bacillus anthracis
• капсула (поли-Д-глютамат полипептид)
• экзотоксин (3 фракции):
– фактор отека (EF)
– протективный антиген (PA) взаимодействует с
мембранами клеток и опосредует проявление
активности др. компонентов
– летальный фактор (LF) эффект аденилат
циклазы и повышает концентрацию цАМФ

27. Клинические проявления зависят от пути заражения

• Инкубационный период 2-6 сут.
• Кожная форма – карбункул с черной коркой
(anthrax – уголь)
• Легочная форма развивается при ингаляции
спор, протекает тяжело (t°- 40°), насморк,
слезотечение, пневмония, отек легких, с/с
недостаточность, смерть на 2-3 сут.
• Желудочно-кишечная форма – симптомы
поражения ЖКТ, общая интоксикация, с/с
недостаточность, смерть через 3-4 сут.

28.

Сибиреязвенный
карбункул

29.

Дифференциация B.anthracis и B.cereus
Тест
Рост МПБ
B.anthracis
Осадок на дне
B.cereus
Помутнение
Подвижность
-
+
Капсула
+
-
Гемолиз
-/+
+
"Жемчужное
ожерелье"
+
-
Рост при 45 оС
-
+

30.

Лабораторная диагностика сибирской язвы
"Чистый" материал
Контаминированный материал
Прогревание (70 оС-30 мин, 80 оС-15 мин)
или обработка мочевиной
Мазки по Граму, Ожешко,
РИФ
Посев на МПА, кровяной
агар
Кровяной агар - колонии без
гемолиза
МПА - локонообразные колонии
Откол на МПА и МПБ
Идентификация:
Желатиназа
Лецитоветилаза
Фосфатаза
Жемчужное ожерелье
Вирулентность для лаб. животных
Заражение мышей
Вскрытие через
12,18,36,48 ч.
Микроскопия мазков

31.

Идентификация B.anthracis
Откол на
скошеный агар
Морфология колоний
Тест «жемчужное ожерелье» (3-5 ч)
Редукция метиленового синего (3-5 с)
Капсулообразование
Мазок по Граму,
Циль-Нильсену
Фаголизабельность(10-15 ч)
Фосфотазная активность (14-16 ч)
Гемолитическая активность (3-5 с)
In vivo (3 ч)
На среде ГКИ (16-18 ч)
Патогеность
для мышей
(24-48 ч)
1. Морфология
2. Подвижность
3. Характер роста
На сывороточном (3 ч) и
биакрбонатном (24-36 ч) агарах
Выделение чистой культуры и внутривидовое типирование
Микробиологическая диагностика сибирской язвы. ВУНМЦ МЗ РФ М.,1999

32. Лечение и профилактика

• Лечение - антибиотики: пенициллин,
тетрациклин и др., сибиреязвенный
иммуноглобулин
• Профилактика специфическая – живая
сибиреязвенная вакцина СТИ (по
эпидемиологическим показаниям)
• Экстренная профилактика - Иммуноглобулин

33. Возбудители бруцеллеза

• Бруцеллез – инфекционная болезнь,
характеризующаяся длительным течением,
лихорадкой, поражением опорно-двигательного
аппарата, нервной и др. систем.
• Возбудители – бактерии рода Brucella
• Название рода в честь Д.Брюса, который
выделил в 1886 г. B.melitensis из органов
погибшего английского солдата на Мальте

34.

род Brucella
• Грамотрицательные, неподвижные,
аспорогенные, бескапсульные коккобактерии
• Аэробы, но многие нуждаются в СО2
• Каталазоположительны, в большинстве
оксидазоположительны
• Требовательны к питательным средам:
нуждаются в комплексе белков и витаминов
• Рост медленный (2-3 нед.)
• Колонии мелкие, гладкие S-формы, мутноватые

35.

Классификация бруцелл
Вид
Биовары Основные хозяева
B.melitensis
1-3
овцы, козы
B.abortus
1-9
крупный рогатый
скот
B.suis
1
свиньи
2
свиньи, зайцы
3
свиньи
4
северный олень
B.canis
собаки
B.ovis
овцы
B.neotomae
крысы

36.

Способы выделения
чистой культуры бруцелл
Способ выделения
1. Посев в жидкие среды (печеночный бульон,
бульон Д, бульон с глюкозой и глицерином)
2. Посев на плотные питательные среды (эритритагар, печеночный агар)
2. Посев в желток куриных яиц.
3. Посев осадка после центрифугирования
(3000 об./мин, 1-2 часа)
4. Посев осадка после центрифугирования в
присутствии агглютинирующей сыворотки
Вид материала
Все виды материала
Все виды материала
Кровь, костный мозг.
Моча, желчь
Моча

37. Свойства

• Биохимическая активность невысокая:
ферментируют углеводы до кислоты и газа,
некоторые биотипы вырабатывают H2S,
красители (основной фуксин, тионин) оказывают
бактериостатическое действие.
• Антигены: главные поверхностные А и М,
поверхностный L-Аг похож на Vi-Аг
сальмонелл, шероховатые формы содержат R-Аг
• Факторы патогенности: эндотоксин, фермент
гиалуронидаза, белки наружной мембраны
(адгезия)

38. Свойства

• Резистентность – устойчивы к низкой
температуре, в замороженном мясе сохраняются
до 5 мес., в молочных продуктах до 1,5 мес.
Быстро погибают при кипячении и от
дезинфектантов.
• Эпидемиология: Резервуар и источник
инфекции – домашние животные (овцы, козы,
коровы, свиньи, реже собаки).
• Человек – вторичный хозяин.
• Пути заражения – контактный, алиментарный,
аспирационный. Больные люди не являются
источником заболевания.

39. Патогенез

• Проникают в организм через СО или поврежденную
кожу
• По лимфотическим путям попадают в лимфоузлы
• Фагоцитоз не завершенный. Первые 5-10 сут бактерии
размножаются в макрофагах регионарных лимфоузлов.
Выделяют низкомолекулярные продукты,
ингибирующие фагосомо-лизосомальное слияние.
• Отмечают диффузную пролиферацию и гиперплазию
элементов ретикулоэндотелиальной системы.
• К 20 сут. начинают формироваться гранулемы.
• Гематогенно попадают в печень, селезенку, почки,
костный мозг, молочные железы, где формируются
очаги некроза, окруженные инфильтратами.

40. Клиника

• Инкубационный период 1-6 нед(обычно 1-3 нед.)
• Формы: первично- и вторично латентная,
остросептическая, первично- и вторичнохроническая метастатическая.
• Симптомы: длительная лихорадка, озноб,
потливость, боли в суставах, радикулиты,
миозиты и др.
• В патологический процесс вовлекаются
сердечно-сосудистая система, мочеполовая и др.
• Иммунитет. Постинфекционный непрочный.

41. Микробиологическая диагностика

• Основные методы – серологический, аллергический,
бактериологический.
• Серологический: р.Хеддельсона, р.Райта, РПГА, РСК,
ИФА и др.
• Аллергический: кожные пробы Бюрне с бруцеллином
• Бактериологический. Исследуют кровь, мочу, грудное
молоко, аспираты костного мозга и др. Посев в две
порции питательных сред, в одной создают
повышенную концентрацию СО2. Инкубация 4-5 сут.
Идентификация по биохимическим, антигенным
свойствам.
• Вид возбудителя определяют с эпидемиологической
целью для выявления источника заболевания.

42.

Реакция Райта
• Реакция положительна при агглютинации не
менее чем на ++ (просветление жидкости с
заметными хлопьями.
• Результат реакции выражают в МЕ
• МЕ - величина обратная титру сыворотки, при
условии применения для постановки реакции
«единого» бруцеллезного диагностикума
• Диагностическое количество Ат - 200МЕ (титр
1:200)

43.

Сроки появления положительных
реакций при бруцеллезе
Тест
Срок исследования
(сутки)
10 30 60 120 180 360
р.Хеддельсона
р.Райта1
РНГА
ОФР
проба Бюрне
1 при
обострении процесса и реинфекции реакция
восстанавливается

44. Лечение и профилактика

• Лечение антибиотиками: тетрациклин,
стрептомицин рифампин и др.
• Профилактика в основном неспецифическая:
проведение санитарно-гигиенических
мероприятий, пастеризация молока и т.п.
• Специфическая по эпидемиологическим
показаниям: живая бруцеллезная вакцина, однако
она не обеспечивает 100% защитного эффекта

45. Возбудитель туляремии

• Туляремия – зоонозная природноочаговая
инфекционная болезнь человека и жифотных.
• Вызывается Francisella tularensis
• Характеризуется лихорадкой, интоксикацией,
поражением лимфоузлов, дыхательных путей,
нарушением целостности покровов.
• Открыт в 1911 г. Г.Мак-Коем и Х.Чепиным в
районе озера Туляре (штат Калифорния)
• Детально изучен Э.Френсисом

46.

Род Francisella
• Francisella tularensis
– биовар (subsp.) tularensis
– биовар (subsp.) palaearctica
– биовар (subsp.) mediaasiatica
• Francisella novicida

47.

Francisella tularensis
http://www.terrorismcentral.com/Library/WMD/Bio/tularemia/LabProtocols.html

48.

Francisella tularensis
• Мелкие, неспорообразующие,
неподвижные, грамотрицательные
коккобактерии.
• Образуют тонкую капсулу.
• Строгие аэробы.
• Не растут на обычных питательных
средах

49.

Биовары Francisella
tularensis
Биовар
Ареал
tularensis Только
Северная
Америка
palearctica Все
Северное
полушарие
Тяжесть заболевания
Высокая
(летальность около
5%)
Относительно
невысокая

50.

Питательные среды для
F.tularensis
• свернутая желточная среда
Мак-Коя
• агаровая среда с добавлением
желтка
• FT агар (Оболенск)
• кровяная среда Емельяновой

51.

Культуральные свойства
Кровяной агар
Шоколадный агар

52. Свойства

• Ферментирует до кислоты глюкозу, мальтозу,
левулезу и маннозу. Американские,
среднеазиатские и японские штаммы
ферментируют глицерин. Каталаза+, индол-,
H2S+, редуцируют некоторые краски (тионин,
метиленовый синий, малахитовый зеленый).
• Антигены: соматический О-Аг, поверхностный
Vi-Аг, с которым связана вирулентность.
• Эндотоксин
• Резистентность: Долго сохраняется при низких
температурах. Чувствителен к высокой
температуре, УФ-лучам, многим антибиотикам.

53. Эпидемиология

• Туляремия – природно-очаговое заболевание
• Источники заражения человека – мыши
полевые и домашние, животные домашние
(овцы, свиньи, крупный рогатый скот) и дикие
(зайцы).
• Переносчики – кровососущие членистоногие:
клещи, блохи, слепни, комары, москиты.
• Пути заражения: контактный (через кожу и СО
глаз), инокулятивный (при укусе переносчика),
алиментарный (через ЖКТ) и аспирационный
(через дыхательные пути).

54. Патогенез

• После проникновения в организм
распространение с током лимфы, реже через
кровоток, что создает угрозу генерализации
• Фагоцитоз незавершенный, бактерии могут
депонироваться в лимфоузлах.
• При гибели бактерий освобождается эндотоксин
и формируется воспаление лимфоузлов – бубоны
• С током крови попадают в печень, селезенку,
легкие, костный мозг и др. органы с вторичными
поражениями (пневмония, менингит и др.)

55. Клиника

• Инкубационный период – от нескольких часов до
3 недель (в среднем 3-7 дней).
• Начало острое, внезапно повышается
температура без продромального периода.
• Клинические формы: бубонная, легочная,
генерализованная, желудочно-кишечная
(абдоминальная).
• Течение длительное, около месяца.
• Летальность 6% и ниже.
• Иммунитет длительный, иногда пожизненный

56.

Кожно-бубонная (язвенно-бубонная) форма
туляремии
http://www.antropozoonosi.it/Malattie/Tularemia/tularemia.htm

57.

Бубонная форма туляремии
http://www.antropozoonosi.it/Malattie/Tularemia/tularemia.htm

58.

Легочная форма туляремии
http://www.antropozoonosi.it/Malattie/Tularemia/tularemia.htm

59.

60. Микробиологическая диагностика

• Бактериологический метод только в лаборатории ООИ.
Материал: пунктат из бубонов, отделяемое язв, СО глаз, зева,
кровь, мокрота и др.Посев на желточные среды или среду с
цистеином и глюкозой. Идентификация по характерным
морфологическим, тинкториальным, культуральным,
биохимическим, антигенным свойствам. Редко дает
положительный результат.
• Биологический метод. Заражение лаб.животных (мыши,
морские свинки). Гибель через 3-6 сут. Посев из внутренних
органов на желточные среды с последующей идентификацией.
• Серологический метод. РА, РНГА, РСК, РИФ, ИФА и др.
• Аллергический метод. Накожная или внутрикожная проба с
тулярином. Учет через 24-48 ч. Диаметр инфильтрата не менее 5
мм. У больных положительная проба с 5-го дня заболевания.
Положительные пробы у переболевших и вакцинированных.

61.

Тесты для идентификации
F.tularensis
• мазок по Граму (грамотрицательные
палочки);
• характера роста на специальных средах;
• отсутствие роста на простых средах;
• агглютинация туляремийной сывороткой;
• положительный результат РИФ;
• гибель зараженных биопробных животных с
характерными патологоанатомическими
изменениями в органах.

62.

Частота подтверждения диагноза при
обследовании 1000 больных туляремией
84
90
80
70
60
%
50
40
10
30
20
10
0
Се ро д иа гно стика
Бакте рио ло гиче ский
ме то д

63. Лечение и профилактика

• Лечение антибиотиками: стрептомицин,
тетрациклин, хлорамфеникол и др.
• Убитая лечебная вакцина.
• Профилактика. Специфическая – живая
туляремийная вакцина. Проводят по
эпидемилогическим показаниям и лицам группы
риска (охотники, сельскохозяйственные
работники и спец.лабораторий).
• Неспецифическая: оздоровление природных
очагов (уничтожение грызунов, клещей и т.п.),
Обеспечение санитарного состояния источников
воды, складов продовольствия и т.д.)

64. Листерии

• Листериоз – зоонозная природноочаговая
инфекционная болезнь человека и животных.
• Вызывается Listeria monocytogenes
• Характеризуется лихорадкой, интоксикацией,
поражением лимфоузлов, нервной системы,
часто сепсисом.
• Открыт в честь шотландского хирурга Д.Листера
• В патологии человека имеет вид - Listeria
monocytogenes, впервые описанный в 1911 г.
М. Хамфесом

65.

Listeria monocytogenes
Листерии - короткие грамположительные, иногда кокковидные
палочки правильной формы, мелкие (0,4-0,5 х 0,5-2,0 мкм).
Подвижны при комнатной температуре (перитрихи). Спор
и капсул не образуют.

66. Культуральные свойства

• Листерии – факультативные анаэробы (лучше
растут в атмосфере 5-10% СО2
• Температура культивирования – 37 °C
• Культуральная особенность листерий способность размножаться при пониженной
температуре (в т.ч. в холодильнике).
• Могут расти на простых питательных средах при
pH 7-7.2
• Лучше растут на кровяном агаре в виде мелких
полупрозрачных колоний, окруженных зоной
гемолиза

67. Свойства

• Ферментирует до кислоты глюкозу, мальтозу и
маннозу. Каталаза+, индол-, H2S-, желатин не
разжижают.
• Антигены: соматический О-Аг, Н-Аг.
Установлено 7 сероваров листерий.
• Резистентность: хорошо переносят низкие
температуры, замораживание, высушивание. В
молоке и мясе при температуре +4°C – активно
размножаются. Чувствительны к кипячению и
дезинфицирующим веществам.

68. Эпидемиология

• Листериоз – природно-очаговое заболевание
• Источники заражения человека –животные
домашние (овцы, свиньи, крупный рогатый скот,
собаки, кошки) и дикие (кабаны, лисы, зайцы).
• Пути заражения: в основном - алиментарный
(через инфицированные овощи, молоко, сыры,
мясо, воду), контактный (при уходе за больными
животными) и воздушно-пылевой (при вдыхании
инфицированной пыли). Редко –
трансплацентарно (от матери к плоду) и при
прохождении родовых путей).

69. Патогенез

• Патогенез листерий связан с их способностью
вызывать незавершенный фагоцитоз
• После проникновения в организм
распространение с током лимфы и через
кровоток, что создает угрозу генерализации
• С током крови листерии попадают в ЦНС,
миндалины, печень, селезенку, легкие,
лимфоузлы, где образуются некротические
узелки

70. Клиника

• Инкубационный период – от 3 до 45 дней (в среднем 1820 дней).
• У лиц с нормальным иммунитетом заболевание может
протекать в виде легкого недомогания или ангины
• Клинические формы: картина менингита, энцефалита,
менингоэнцефалита
• Течение длительное
• Врожденный листериоз заканчивается гибелью плода,
спонтанным абортом, преждевременными родами,
аномалиями развития плода
• Иммунитет нестойкий

71. Микробиологическая диагностика

• Бактериологический метод
Материал: ликвор, кровь, пунктат лимфоузлов, слизь из
носоглотки, отделяемое влагалища, околоплодные воды,
плацента, трупный материал. Посев на кровяной агар.
Идентификация по характерным морфологическим,
тинкториальным, культуральным, биохимическим,
антигенным свойствам.
• Серологический метод. РСК, РПГА, ИФА
(исследование нарастания титра антител в парных
сыворотках).
• Аллергический метод. Накожная или внутрикожная
проба. Учет через 24-48 ч. Диаметр инфильтрата не
менее 5 мм.
• Молекулярно-биологический метод (ПЦР)

72. Лечение и профилактика

• Лечение антибиотиками: тетрациклин,
левомицетин и др.
• Профилактика. Специфическая профилактика
не разработана.
• Неспецифическая: санитарно-ветеринарные
мероприятия в эндемическом очаге.