Селекция. Биотехнология
Наука биотехнология
Биологические объекты
Причины выбора
Этапы становления
Этапы становления
Этапы становления
Этапы становления
Достижения современной науки
Основные понятия
Генная инженерия
Важные ферменты
Виды генетической инженерии
Клеточная инженерия
Соматическая гибридизация
Соматическая гибридизация
Генно-модифицированные организмы
Основные этапы создания ГМО:
Генетически модифицированные организмы используются в прикладной медицине с 1982 года.
Селекция
Н.И. Вавилов выделил следующие разделы селекции:
Закон гомологических рядов
Индуцированный мутагенез
Соматические мутации
Полиплоидия
 Работы И. В. Мичурина
Бесплодие межвидовых гибридов
ПРИЁМЫ  МЕТОДЫ
МЕТОДЫ  ОТРАСЛИ
Полимеразная цепная реакция
Метод меченых атомов
6.95M
Category: biologybiology

Селекция. Биотехнология

1. Селекция. Биотехнология

2. Наука биотехнология

• Биотехнология (от греч. вios –
жизнь, teken – искусство,
мастерство, logos – наука,
умение, мастерство) – это
получение продуктов из
биологических объектов или с
применением биологических
объектов.
Термин впервые ввел в обиход
венгерский инженер Карл Эреки 1917 год

3. Биологические объекты

• организмы животных и человека
(получение иммуноглобулинов из
сывороток вакцинированных лошадей
или людей; получение препаратов крови
доноров)
• отдельные органы (получение гормона
инсулина из поджелудочных желез
крупного рогатого скота и свиней)
• культуры тканей (получение
лекарственных препаратов)

4. Причины выбора

• Клетки - «биофабрики»,
способны к биосинтезу
ценных БАВ
• Клетки обладают
быстрыми темпами
воспроизведения
• Биосинтез сложных
веществ (белков,
антибиотиков, антигенов,
антител и др.)
экономичнее и
технологически
доступнее, чем
химический синтез

5. Этапы становления

Эмпирический или
доисторический период –
8000 лет.
изготовление пива, хлеба и
др. продуктов
уксус
первая дистилляция вина
осуществлена в ХII в.
получение кисломолочных
продуктов, квашенной
капусты и др.

6. Этапы становления


Этиологический период 1856 – 1933 гг.
исследования Луи Пастера
микробная природа брожения
опроверг самопроизвольное зарождение жизни
основы вакцинопрофилактики и вакцинотерапии
новый метод стерилизации (пастеризацию)
• выделение микробов в виде
чистых культур
• начато изготовление пищевых
прессованных дрожжей,
продуктов обмена, ацетона,
бутанола, лимонной и молочной
кислот
• создание первых биоустановок
для микробиологической
очистки сточных вод

7. Этапы становления

• Биотехнический период начался
в 1933 г.
• публикация работы А. Клюйвера
и Л.Х.Ц. Перкина «Методы
изучения обмена веществ у
плесневых грибов»
• глубинное культивирование
грибов
• проведение процессов в
стерильных условиях
• конструирование, создание и
внедрение в практику
биореактора

8. Этапы становления

• Геннотехнический период начался с 1972 г.
• П. Берг с сотрудниками создали первую
рекомбинантную молекулу ДНК
Рекомбинация
Молекулярное
клонирование

9. Достижения современной науки

• человеческий инсулин, выработанный генномодифицированными кишечными палочками
• генно-инженерные препараты: интерфероны,
интерлейкины, соматотропин
• производство моноклональных антител
• диагностика и профилактика инфекционных и
неинфекционных заболеваний
• антибиотики
• культуры животных и растительных клеток

10. Основные понятия

• Вектор – любая плазмида или фаг, в которые может быть
встроена чужеродная молекула ДНК с целью
клонирования.
• Плазмида – кольцевая внехромосомная ДНК, способная к
автономной репликации.
• Репликация – самоудвоение молекулы ДНК путем
образования её копии при помощи набора ферментов
(ДНК-полимераз, лигаз и т.п.).
• Гибридизация – процесс образования или получения
гибридов, в основе которого лежит объединение
генетического материала разных клеток в одной клетке.
• Клон – совокупность клеток или особей, произошедших от
общего предка путем бесполого размножения.
• Штамм – чистая культура микроорганизма, выделенного из
определенного источника или полученного в результате
мутаций.

11. Генная инженерия

• Генетическая инженерия – целенаправленное
искусственное создание определенных комбинаций
генетического материала, способных нормально
функционировать в клетке, размножаться и
контролировать синтез конечных продуктов
• выделение из клеток отдельных генов или синтез
генов вне клеток
• направленная перестройка, копирование и
размножение выделенных или синтезированных
генов, их перенос и включение в подлежащий
изменению геном
• синтез измененными бактериями важных для
человека соединений

12. Важные ферменты

Рестриктаза
Лигаза
Вектор
разрезает молекулу ДНК
в строго определенных участках
сшивает определенные участки
различных молекул ДНК друг с другом
• короткие, самостоятельно
размножающиеся в клетках
бактерий кольцевые молекулы ДНК
• с помощью рестриктаз и лигаз в
векторы встраивают необходимый
ген, добиваясь в последствии его
включения в геном клетки-хозяина.

13. Виды генетической инженерии

• Генная инженерия: целенаправленное использование
перестроек естественного генома, осуществляемых in
vivo и in vitro, для изменения генетических
характеристик известных вирусов и клеток, прямое
манипулирование рДНК, включающими отдельные
гены.
• Хромосомная инженерия связана с переносом
изолированных хромосом от клетки-донора одного
организма в клетку-реципиент другого организма.
• Геномная инженерия: целенаправленная глубокая
перестройка генома акариот, прокариот и эукариот,
вплоть до создания новых видов, т.е. перенос всего или
большей части генетического материала от одной
клетки к другой. При геномной инженерии возможно
получение половых (слиянием гамет) и соматических
(слиянием неполовых клеток) гибридов.

14.

15. Клеточная инженерия

• Под клеточной инженерией
понимают метод
конструирования клеток
нового типа на основе их
культивирования,
гибридизации и
реконструкции
• эритропоэтин (гормон, стимулирующий образование красных
кровяных тел) активатор плазминогена (используется для
предотвращения образования тромбов)
• фактор свертывания крови III (используется при гемофилии)
• инсулин (для лечения диабета),
• поверхностный белок вируса гепатита В
• интерлейкины

16. Соматическая гибридизация

• Соединение клеток с
хромосомными наборами
систематически далеких форм
Впервые гибриды
соматических клеток
обнаружил
в 1960 г.
биолог Ж. Барский.
В культуре ткани клеток двух линий мышей он выявил третий тип клеток.
Клетки оказались гибридными и содержали хромосомы клеток обеих
исходных линий.
Морфологические и биохимические признаки гибридных клеток были
промежуточными между признаками исходных.
Однако спонтанное слияние клеток наблюдается редко. В связи с этим
разработана техника гибридизации соматических клеток с
использованием вируса Сендай.
Вирус инактивируют УФЛ или алкилирующим мутагеном.
Инактивированный вирус вносят в культуру двух типов клеток.
Некоторые клетки при этом сливаются с образованием одной с двумя
ядрами. После митоза из двухъядерной клетки формируются две
одноядерные гибридные соматические клетки. В каждой гибридной
клетке содержится по одному набору хромосом каждого типа
родительских клеток

17. Соматическая гибридизация

• Получены гибриды клеток многих далеких видов
(мыши и курицы, мула и мыши, кролика и
обезьяны, человека и курицы, коровы и норки и
др.)
• для изучения локализации и характера действия
тех или иных генов
• для картирования хромосом
• для изучения регуляции действия генов
• для дифференцировки клеток в онтогенезе и
механизма взаимодействия ядра и цитоплазмы
• Моноклональные антитела — это
иммуноглобулины, синтезируемый одним
клоном клеток. Моноклональное антитело
связывается только с одной антигенной
детерминантой на молекуле антигена.

18. Генно-модифицированные организмы

• ГМО - организм, генотип которого был
искусственно изменён при помощи
методов генной инженерии.
• Определение может применяться для
растений, животных и микроорганизмов.
• Генетические изменения производятся
в научных или хозяйственных целях.
• Генетическая модификация отличается
целенаправленным изменением
генотипа организма в отличие от
случайного, характерного для
естественного и искусственного
мутационного процесса.
• Основным видом генетической
модификации в настоящее время
является использование трансгенов для
создания трансгенных организмов.

19. Основные этапы создания ГМО:

1. Получение изолированного гена.
2. Введение гена в вектор для
переноса в организм.
3. Перенос вектора с геном в
модифицируемый организм.
4. Преобразование клеток
организма.
5. Отбор генетически
модифицированных организмов
и устранение тех, которые не
были успешно
модифицированы.

20. Генетически модифицированные организмы используются в прикладной медицине с 1982 года.

Генетически модифицированные организмы
используются в прикладной медицине с 1982 года.
Генно-инженерный человеческий инсулин,
получаемый с помощью генетически
модифицированных бактерий
Синтез гормонов роста человека
Факторы свертывания крови ( лечение гемофилии).
Эритропоэтины (лечение серповидной анемии, анемии
других этиологий).
Стволовые клетки (получение лекарств против рака,
иммунодефицитов, для искусственного продления
молодости).
Ферментные препараты – лидаза, панкреатин, мезим и
пр.
Вакцины против полиомиелита, вирусного гепатита,
комплексная вакцина АКДС
Препараты для лечения тромбозов и тромбофлебитов
Получение тканей, пригодных для трансплантации

21.

1982 г. – человеческий инсулин (лечение диабета)
1985 г. – человеческий соматостатин (лечение карликовости)
1986 г. - интерферон-альфа-2а (лечение некоторых типов лейкемии)
1987 г. - тканевый активатор плазминогена для удаления тромбов у
пациентов с острым инфарктом миокарда
1990 г. - интерферон-гамма- альфа (для лечения хронической
грануломы)
1990 г. - тканевый активатор плазминогена при острой эмболии
легких
1990 г. - вакцины против гепатита В
1993 г. - гормон роста для лечения нарушений в росте у детей с
хронической почечной недостаточностью
1996 г. – пульмозим (для лечения запущенных форм муковисцидоза)
1997 г. - ритуксан (для лечения пациентов с лимфомой Ходжкина)
1997 г. - гормон роста (для лечения дефицита гормона роста у
взрослых)
1998 г. - моноклональные антитела для терапии пациентов с
определенным типом метастазируюшего грудного рака.

22.

23.


С 1996 года, когда началось выращивание
ГМ-растений
Площади, занятые ГМ-культурами выросли
до 175 млн гектаров в 2013 году (более 11 %
от всех мировых посевных площадей)
ГМ-растения выращиваются в 27 странах,
особенно широко — в США, Бразилии,
Аргентине, Канаде, Индии, Китае
Начиная с 2012 года производство ГМсортов развивающимися странами,
превысило производство в промышленно
развитых государствах
Из 18 миллионов фермерских хозяйств,
выращивающих ГМ-культуры, более 90 %
приходится на малые хозяйства в
развивающихся странах.

24. Селекция

• Селекция (от лат.selectio,seligere – отбор) – это
наука о методах создания
высокопродуктивных сортов растений, пород
животных и штаммов микроорганизмов.
Задачи современной селекции
-
Создание новых и совершенствование старых сортов, пород и
штаммов с хозяйственно-полезными признаками.
Создание технологичных высокопродуктивных биологических
систем, максимально использующих сырьевые и энергетические
ресурсы планеты.
Повышение продуктивности пород, сортов и штаммов с единицы
площади за единицу времени.
Повышение потребительских качеств продукции.
Уменьшение доли побочных продуктов и их комплексная
переработка.
Уменьшение доли потерь от вредителей и болезней.

25. Н.И. Вавилов выделил следующие разделы селекции:

1) учение об исходном сортовом, видовом и родовом потенциалах;
2) учение о наследственной изменчивости (закономерности в
изменчивости, учение о мутациях);
3) учение о роли среды в выявлении сортовых признаков (влияние
отдельных факторов среды, учение о стадиях в развитии растений
применительно к селекции);
4) теория гибридизации как в пределах близких форм, так и
отдаленных видов;
5) теория селекционного процесса (самоопылители,
перекрестноопылители, вегетативно и апогамно размножающиеся
растения);
6) учение об основных направлениях в селекционной работе, таких,
как селекция на иммунитет, на физиологические свойства
(холодостойкость, засухоустойчивость, фотопериодизм), селекция
на технические качества, химический состав;
7) частная селекция растений, животных и микроорганизмов.

26.

27. Закон гомологических рядов

Н.И. Вавилов - закон гомологических рядов (1920 г.):
1. Виды и роды, генетически близкие,
характеризуются сходными рядами
наследственной изменчивости.
2. Чем ближе генетически расположены в общей
системе роды и виды, тем полнее сходство в
рядах их изменчивости.
3. Целые семейства растений в общем
характеризуются определенным циклом
изменчивости, проходящей через все роды и
виды, составляющие семейство.

28. Индуцированный мутагенез

• Экспериментальное
получение мутаций у растений
и микроорганизмов и их
использование в селекции
Получают:
• высокопродуктивные штаммы
микроорганизмов (продуцентов
антибиотиков)
• карликовые сорта растений с повышенной
скороспелостью
Используют:
• физические мутагены (гамма-излучение,
рентгеновское и ультрафиолетовое
излучение)
• химические супермутагены (например, Nметил-N-нитрозомочевина).
У животных мутации
практически всегда
приводят к снижению
жизнеспособности
и/или бесплодию.
К исключениям
относится тутовый
шелкопряд, с которым
велась интенсивная
селекционная работа с
использованием авто- и
аллополиплоидов (Б.Л.
Астауров, В.А.
Струнников).

29. Соматические мутации

• В результате индуцированного мутагенеза
часто получают частично мутантные растения
(химерные организмы).
• В этом случае говорят о соматических
(почковых) мутациях.
• Многие сорта плодовых растений, винограда,
картофеля являются соматическими
мутантами.
• Эти сорта сохраняют свои свойства, если их
воспроизводят вегетативным путем, например,
прививая обработанные мутагенами почки
(черенки) в крону немутантных растений; таким
путем размножают, например, бессемянные
апельсины.

30. Полиплоидия

• Автополиплоидия представляет собой многократное повторение в
клетке одного и того хромосомного набора (генома).
• Автополиплоидия часто сопровождается увеличением размеров
клеток, пыльцевых зерен и общих размеров организмов.
• триплоидная осина гигантских размеров, долговечна, её
древесина устойчива к гниению
• триплоиды (бананы, чай, сахарная свекла)
• тетраплоиды (рожь, клевер, гречиха, кукуруза, виноград, а также
земляника, яблоня, арбузы)
• Автополиплоиды отличаются повышенной сахаристостью,
повышенным содержанием витаминов.
• Положительные эффекты полиплоидии связаны с увеличением
числа копий одного и того же гена в клетках, и, соответственно, в
увеличении дозы (концентрации) ферментов.
• Автополиплоиды менее плодовиты по сравнению с диплоидами.

31.

Полиплоидия
• Аллополиплоидия – это объединение в
клетке разных хромосомных наборов
(геномов).
• Часто аллополиплоиды получают путем
отдаленной гибридизации, то есть при
скрещивании организмов,
принадлежащих к различным видам.
• Такие гибриды обычно бесплодны (их
образно называют «растительными
мулами»), однако, удваивая число
хромосом в клетках, можно восстановить
их фертильность (плодовитость).
• Таким путем получены гибриды пшеницы
и ржи (тритикале), алычи и терна,
тутового и мандаринового шелкопряда.

32.  Работы И. В. Мичурина

Работы И. В. Мичурина
Объектом селекции служили разнообразные
плодово-ягодные культуры: семечковые,
косточковые
создано свыше 300 сортов культурных растений
И.В. Мичурин: «Мы не можем ждать милостей от
природы, взять их у неё – наша задача».
обосновал эффект смены доминирования: в
зависимости от почвенно-климатических условий,
характера подвоя и привоя генотип может
проявиться в фенотипе, а может и не проявиться
использовал метод ментора, основанный на
различных комбинациях прививок
использовал эколого-географические
скрещивания – если родители происходят из
разных географических районов, то гетерозис
проявляется наиболее сильно
установил, что селекцию сорта нужно вести в тех
условиях, в которых планируется его дальнейшая
эксплуатация

33.

34. Бесплодие межвидовых гибридов


в анафазе, когда хромосомы
расходятся к полюсам клетки, каждая
из них ищет свою гомологичную пару
у особей, у которых слияние
происходило от разных родительских
форм, возможность встречи подобных
структур минимальна или невозможна
поэтому происходит случайное
комбинирование признаков и в
результате особи становятся
бесплодными либо
нежизнеспособными
несовместимость участков ДНК из
ядра клетки и митохондрий приводит к
отсутствию конъюгации хромосом в
мейотическом процессе

35. ПРИЁМЫ  МЕТОДЫ

ПРИЁМЫ
МЕТОДЫ
А) работа с каллусной тканью
Б) введение плазмид в
бактериальные клетки
В) гибридизация
соматических клеток
Г) трансплантация ядер
клеток
Д) получение рекомбинантной
ДНК и РНК
клеточная
инженерия
генная
инженерия

36. МЕТОДЫ  ОТРАСЛИ

МЕТОДЫ
А) получение полиплоидов
Б) метод культуры клеток и
тканей
В) использование дрожжей
для производства белков
и витаминов
Г) метод рекомбинантных
плазмид
Д) испытание по потомству
Е) гетерозис
ОТРАСЛИ
селекция
биотехнология

37. Полимеразная цепная реакция

• ПЦР диагностика – современный метод
исследования в области молекулярной биологии
• Полимеразная цепная
реакция способна
амплифицировать (увеличить
во много раз) необходимый
участок ДНК возбудителя в
исследуемом материале
• для определения отцовства
• для клонирования генов
• для выявления
наследственных заболеваний
• для диагностики возбудителя
инфекционных заболеваний

38. Метод меченых атомов

• Многие химические элементы представляют
собой смесь изотопов.
• Изотопы одного и того же элемента
отличаются друг от друга числом
содержащихся в ядре нейтронов, т. е. по
массе, а химические свойства элементов
зависят от числа и расположения электронов,
окружающих ядро.
• Все изотопы данного элемента, обладают
одинаковыми химическими свойствами.
Вследствие этого изотопы можно
использовать в качестве меченых атомов.
• Соединение, меченое изотопом, вводят в
растение, а затем определяют наличие
меченых атомов в тканях растения по их
радиоактивности или специальными
приборами — масс-спектрометрами.
• Применяют при изучении фотосинтеза,
дыхания, минерального питания и других
процессов.
азот N13 имеет период
полураспада меньше 10
минут
фосфор Р32 — 14,3 дня
сера S35 — 87,1 дня
водород Н3—12,3 года
углерод С14 — 5600 лет

39.

Хроматография
English     Русский Rules