Оценка свойств цервикальной слизи. Исследование взаимодействия сперматозоидов с цервикальной слизью

1. Оценка свойств цервикальной слизи. Исследование взаимодействия сперматозоидов с цервикальной слизью (тесты in vivo и in vitro)

Запорожский государственный медицинский
университет
Кафедра акушерства, гинекологии и
репродуктивной медицины ФПО
ОЦЕНКА СВОЙСТВ ЦЕРВИКАЛЬНОЙ
СЛИЗИ. ИССЛЕДОВАНИЕ
ВЗАИМОДЕЙСТВИЯ СПЕРМАТОЗОИДОВ
С ЦЕРВИКАЛЬНОЙ СЛИЗЬЮ
(ТЕСТЫ IN VIVO И IN VITRO)
К.мед.н., доцент Никифоров О.А.

2. Исследование цервикальной слизи (шеечный индекс, цервикальное число)

ИССЛЕДОВАНИЕ ЦЕРВИКАЛЬНОЙ
СЛИЗИ (ШЕЕЧНЫЙ ИНДЕКС,
ЦЕРВИКАЛЬНОЕ ЧИСЛО)

3.

Эпителий
слизистой оболочки шейки
матки состоит из секреторных
клеток разного типа.

4.

Гормоны
яичников регулируют
секрецию цервикальной слизи:
эстрогены стимулируют обильную
продукцию жидкой слизи, а
гестагены ингибируют секреторную
активность эпителиальных клеток.

5.

Цервикальная
слизь - это
гетерогенный секрет, которому
свойственны определенные
реологические свойства:
консистенция, тягучесть и
кристаллизация.

6.

Циклические
изменения составляющих
цервикальной слизи могут влиять на
проникающую способность и
выживаемость сперматозоидов.

7.

Сперматозоиды
способны
пенетрировать цервикальную слизь
примерно с 9 дня нормального 28дневного менструального цикла и эта
способность постепенно возрастает,
достигая своего пика перед
овуляцией.

8.

После
этого способность к пенетрации
снижается в зависимости от
изменений в характере цервикальной
слизи.

9. Получение цервикальной слизи

ПОЛУЧЕНИЕ ЦЕРВИКАЛЬНОЙ СЛИЗИ
Шейку
матки обнажают в зеркалах и
осторожно протирают тампоном для
удаления выделений из влагалища;
Слизь с наружного зева удаляют с
помощью тампона или пинцета;

10.

11.

Слизь
цервикального канала
собирают одним из перечисленных
методов: методом аспирации с
помощью туберкулинового шприца
(без иглы), шприца для слизи, пипетки
или полиэтиленовой трубки.

12.

Оценку
качества слизи
проводят сразу после
забора.

13. Оценка качества цервикальной слизи

ОЦЕНКА КАЧЕСТВА ЦЕРВИКАЛЬНОЙ СЛИЗИ
Оценка
качества
цервикальной слизи
включает
определение ее
растянутости,
кристаллизации,
консистенции и pH.

14.

Качество
цервикальной слизи
оценивают в баллах по системе
Moghissi (1976).

15.

Максимальная
сумма - 15 баллов.
Оценка, выше 10 баллов означает
хорошее качество цервикальной
слизи (достаточная эстрогенизация
организма), а ниже 10 баллов плохое качество слизи
(гипоэстрогения).

16.

При
подсчете учитывают объем
цервикальной слизи и параметры,
характеризующие ее свойства и
внешний вид.
Сведения о pH не включают в общую
оценку , но это важный фактор
взаимодействия сперматозоидов с
цервикальной слизью.

17. Объем оценивается в баллах следующим образом:

ОБЪЕМ ОЦЕНИВАЕТСЯ В БАЛЛАХ
СЛЕДУЮЩИМ ОБРАЗОМ:
0 - 0 мл
1-0,1 мл
2 - 0,2 мл
3 - 0,3 мл и более.

18. Консистенция

КОНСИСТЕНЦИЯ

19.

Является важнейшим фактором для
пенетрации сперматозоидов.
В середине менструального цикла миграция
сперматозоидов через цервикальную слизь
осуществляется без особых препятствий.
«Вязкая » слизь в лютеиновую фазу образует
барьер.

20. Консистенция оценивается в баллах следующим образом:

КОНСИСТЕНЦИЯ ОЦЕНИВАЕТСЯ В
БАЛЛАХ СЛЕДУЮЩИМ ОБРАЗОМ:
0 - густая, очень «вязкая», предменструальная
слизь;
1 - менее вязкая слизь;
2 - умеренно вязкая слизь;
3 - жидкая, минимально вязкая слизь
середины цикла (преовуляторная).

21. Кристаллизация

КРИСТАЛЛИЗАЦИЯ

22.

«Симптом папоротника»
оценивают при
исследовании под
микроскопом мазка
цервикальной слизи,
который высушен на
воздухе. При этом в
препарате можно видеть
различные узоры
кристаллов, которые
похожи на листья
папоротника.

23.

В
зависимости от структуры слизи
«листья папоротника» могут иметь
только первичные стволы или
образовывать вторичные,
третичные и четвертичные стволы.

24.

а– отдельные элементы в раннюю фолликулярную фазу;
b – выраженный симптом в среднюю фолликулярную фазу;
c – густой рисунок папоротника в период овуляции;
d – отрицательный симптом папоротника.

25. Сумму баллов подсчитывают по наибольшей степени образования «листьев папоротника» :

СУММУ БАЛЛОВ ПОДСЧИТЫВАЮТ ПО
НАИБОЛЬШЕЙ СТЕПЕНИ ОБРАЗОВАНИЯ
«ЛИСТЬЕВ ПАПОРОТНИКА» :
0 - кристаллизации нет;
1 - формирование атипичных стволов
папоротника;
2 - образование первичных и вторичных
стволов папоротника;
3 - образование третичных и четвертичных
стволов папоротника.

26. Растянутость

РАСТЯНУТОСТЬ

27.

Предметное
стекло с цервикальной
слизью покрывают вторым
предметным стеклом накрест, затем
его осторожно поднимают.

28.

Длину
нити цервикальной слизи между
стеклами измеряют в сантиметрах и
оценивают в баллах следующим
образом:
0 < 1см
1 - 1 - 4см
2 - 5 - 8см
3 - 9 см и больше.

29. Состав клеток цервикальной слизи

СОСТАВ КЛЕТОК
ЦЕРВИКАЛЬНОЙ
СЛИЗИ

30.

Под
микроскопом при увеличении 400- х
определяется число лейкоцитов и других
клеток в пробе цервикальной слизи:
0 - > 11 клеток
1 - 6-10 клеток
2 - 1-5 клеток
3 - 0 клеток.

31. pH

PH

32.

pH
эндоцервикальной слизи измеряют с
помощью индикаторной бумаги.
Оптимальным является pH 7 - 8,5 , но
разрешается значения от 6 до 7.

33. Взаимодействие сперматозоидов с цервикальной слизью

ВЗАИМОДЕЙСТВИЕ
СПЕРМАТОЗОИДОВ С
ЦЕРВИКАЛЬНОЙ
СЛИЗЬЮ

34.

Цервикальная
слизь способствует
миграции сперматозоидов в
ограниченный период
менструального цикла.
Насыщенная эстрогенами
цервикальная слизь способствует
пенетрации сперматозоидов.

35. Тест in vivo (посткоитальний тест)

ТЕСТ IN VIVO
(ПОСТКОИТАЛЬНИЙ
ТЕСТ)

36. Время проведения

ВРЕМЯ ПРОВЕДЕНИЯ
Посткоитальний
тест следует проводить
ближе к моменту овуляции.
Супружескую пару следует предупредить
о необходимости полового воздержания
в течение не менее двух дней до
проведения теста.

37.

Тест
следует проводить не позднее,
чем через 6-10 часа после полового
контакта, но промежуток времени в
18 - 24 часа тоже допускается.

38. Методика посткоитального теста

МЕТОДИКА
ПОСТКОИТАЛЬНОГО
ТЕСТА

39.

Во
влагалище вводится чистое
зеркало и туберкулиновым шприцом
или пипеткой забирают образец
слизи из заднего свода.

40.

Образцы слизи из разных отделов
цервикального канала берут разными
шприцами.
Каждая проба наносится на
разные предметные стекла,
покрывается покровным
стеклом и исследуется под
микроскопом при увеличении
400 - X.

41. Пробы влагалищного ПУЛА

ПРОБЫ
ВЛАГАЛИЩНОГО ПУЛА

42.

В
течение двух часов
сперматозоиды во влагалище
погибают.

43.

Целью
исследования образцов
влагалищного пула является
установление факта наличия
сперматозоидов во влагалище.

44. Образец цервикальной слизи

ОБРАЗЕЦ ЦЕРВИКАЛЬНОЙ СЛИЗИ
Количество
сперматозоидов в
нижней части цервикального канала
изменяется в зависимости от
времени, прошедшего после
полового контакта.

45.

Через
2-3 часа после коитуса в
нижней части цервикального канала
скапливается большое количество
сперматозоидов.

46. Подвижность сперматозоидов в цервикальной слизи классифицируется по следующим категориям:

ПОДВИЖНОСТЬ СПЕРМАТОЗОИДОВ В
ЦЕРВИКАЛЬНОЙ СЛИЗИ
КЛАССИФИЦИРУЕТСЯ ПО СЛЕДУЮЩИМ
КАТЕГОРИЯМ:
а ) быстрое движение с продвижением
вперед;
б) медленное и вялое движение с
продвижением вперед;
с ) движение без продвижения вперед;
d ) неподвижные сперматозоиды.

47.

Наличие
любого количества
сперматозоидов с быстрым
движением с продвижением вперед
является наиболее важным
показателем нормальной функции
цервикальной слизи.

48. Интерпретация результатов

ИНТЕРПРЕТАЦИЯ
РЕЗУЛЬТАТОВ

49.

Целью
посткоитального теста является
не только определение количества
активных сперматозоидов в
цервикальной слизи, но и оценка
выживаемости и поведения
сперматозоидов через много часов
после полового контакта (роль
резервуара).

50.

Проведение
теста через 9-24 часа
является оптимальным для оценки
жизнеспособности и выживаемости
сперматозоидов.

51.

Наличие
в слизи цервикального
канала на этом этапе любого
количества сперматозоидов с
быстрым движением вперед
является аргументом против роли
цервикального фактора, как
причины бесплодия у данной
супружеской пары.

52. Тесты in vitro

ТЕСТЫ IN VITRO

53.

Тесты
in vitro проводят в течение
часа после получения образца
эякулята.

54.

55.

Использовать
следует только
цервикальную слизь, которая
получена от женщин в середине
менструального цикла.

56. Тест на совместимость спермы и цервикальной слизи

ТЕСТ НА
СОВМЕСТИМОСТЬ
СПЕРМЫ И
ЦЕРВИКАЛЬНОЙ
СЛИЗИ

57.

Целью
этого анализа является
выявление в эякуляте и
цервикальной слизи
антиспермальных антител.

58.

На
один конец предметного стекла
наносят небольшое количество
преовуляторной цервикальной слизи
(10 - 50 мкл) и примерно равное
количество спермы.
Образцы слизи и спермы тщательно
перемешивают.

59.

На
второй конец предметного стекла
наносится образец спермы.
Препараты покрывают
предметными стеклами и
инкубируют во влажной камере при
комнатной температуре.

60.

Через
30 минут определяют процент
сперматозоидов, которые
колеблются.

61.

Образец
спермы используется для
контроля активности
сперматозоидов.
Неподвижные сперматозоиды НЕ
подсчитываются.

62. Интерпретация результатов

ИНТЕРПРЕТАЦИЯ
РЕЗУЛЬТАТОВ

63.

Отрицательный
тест: 0 - 25 %
сперматозоидов , которые
колеблются;
Слабо отрицательный: 26 - 50 %
сперматозоидов , которые
колеблются (тест следует повторить).

64.

Положительный
тест : 51 - 75 %
сперматозоидов , которые
колеблются.
Высоко положительный : 76 - 100 %
сперматозоидов , которые
колеблются.

65.

Если
тест на совместимость дает
положительный результат, для того,
чтобы определить, где присутствуют
антитела - в сперме или в
цервикальной слизи, следует
провести тесты с донорской
спермой и слизью.

66.

Несмотря
на высокий процент
сперматозоидов, которые
колеблются специфический для
антиспермальных антител, ответ
может быть ложноположительным.

67.

Ложноположительные
реакции
обусловлены факторами
цервикальной слизи.

68.

Целесообразно
вместе с тестами на
совместимость исследовать и
цервикальную слизь.

69.

Действительным
является
результат теста на
совместимость спермы и
цервикальной слизи, когда
показатель цервикальной слизи
находится в пределах 10-15
баллов.

70. Спасибо за внимание!!!

СПАСИБО ЗА
ВНИМАНИЕ!!!