Особенности изоплотностного центрифугирования

1. Особенности изоплотностного центрифугирования

ОСОБЕННОСТИ
ИЗОПЛОТНОСТНОГО
ЦЕНТРИФУГИРОВАНИЯ
Выполнила:
Студентка 2 курса
3 группы (БФК)
Бондарева И.Р

2.

Препаративное центрифугирование – один
из методов выделения биологического
материала для последующего проведения
биохимических исследований.
Сфера использования: медицинские,
химические и биохимические
исследования.

3.

Препаративное центрифугирование
может, осуществляется по одной из
следующих методик:
• 1.Дифференциальное.
• 2.Зонально-скоростное.
• 3.Изопикническое(или
Изоплотностное)
• 4. Равновесное

4. Изоплотностное(Изопикническое) центрифугирование

Зонное центрифугирование при условии,
что плотность вблизи дна кюветы выше, чем
плотность любого из компонентов образца,
было названо изопикническим градиентным
центрифугированием.
Изопикническое центрифугирование
проводят как в градиенте плотности, так и
обычным путем

5. Изопикническое центрифугирование

• 1)Если центрифугирование проводится не в
градиенте плотности, препарат сначала
центрифугируют так, чтобы осели частицы,
молекулярный вес которых больше, чем у
исследуемых частиц. Эти тяжелые частицы
отбрасывают, и образец суспендируют в среде,
плотность которой такая же, как и у фракции,
которую хотят выделить, а затем центрифугируют
до тех пор, пока исследуемые частицы не осядут
на дно пробирки, а частицы меньшей плотности
не всплывут на поверхность жидкости.

6. Изопикническое центрифугирование

• 2)Другой способ заключается в наслаивании образца на
поверхность раствора с непрерывным градиентом
плотности, охватывающим диапазон плотностей всех
компонентов смеси.

7. Изопикническое центрифугирование

• Методом изоплотностного центрифугирования в
градиенте плотности сахарозы проводили
разделение компартментов клеток щитка
кукурузы. В качестве объектов исследования
использовали 4х-дневные щитки кукурузы (Zea
mays). Изоплотностное центрифугирование
осуществляли на центрифуге Beckman (США), в
градиенте плотности сахарозы со ступенями 1,3;
1,5; 1,8;2,3; 2,5 М.

8.

Таким образом, было выявлено, что
изоцитратлиаза из щитков кукурузы имеет
преимущественно глиоксисомальную
локализацию, что следует из данных,
полученных методом изоплотностного
центрифугирования.

9. Cпасибо за Внимание!